Введение к работе
Актуальность проблемы: Хронический лимфолейкоз (ХЛЛ) представляет собой доброкачественную опухоль, ее субстрат составляют преимущественно морфологически зрелые лимфоциты. Болезнь проявляется лимфатическим лейкоцитозом, диффузной лимфоцитарной пролиферацией в костном мозге, увеличением лимфатических узлов, селезенки и печени (Воробьев А.И., 2007). Хронический лимфолейкоз является самым частым видом лейкоза у взрослых. Наиболее распространен в странах Европы и Северной Америки. В этих странах на его долю приходится около 30% от всех лейкозов (Rai К. et al, 2000, Gatovsky D., 2007, Волкова M.A., 2007), a ежегодная заболеваемость ХЛЛ составляет 3-3,5 на 100 000 населения, увеличиваясь до 20 на 100 000 для лиц старше 65 лет и до 50 на 100 000 после 70 лет (Leporriet М., 2001, Linet M.S. et al, 2002, Волкова M.A., 2007).
В настоящее время важное этиопатогенетическое значение при хроническом лимфолейкозе придается нарушениям в системе апоптоза и пролиферации (Kim Y. et al, 2010, Jung Y., 2010, Chen J. et al, 2010). Одно из центральных звеньев в этих процессах занимают полифункциональные цитокины- факторы некроза опухолей и их рецепторы (Pfeifer D. et al, 2007, Mohr J., 2010, Helfrich H., 2010, Fuge M., 2010). Обладая множеством медико-биологических эффектов (цитотоксическое, индукция апоптоза, стимуляция пролиферации лимфоцитов, влияние на гемопоэз, провоспалительное действие и др. (Levy V. et al, 1999, Magliazza A. Etal,2001, Sturm J., 2005, Jamroziak K. et al, 2006, 2009, Bogunia-Kubik K. et al, 2006, Nuckel H. et al, 2007, Dong H.J. et al., 2010)) эти цитокины влияют на развитие и прогрессирование хронического лимфолейкоза.
Согласно данным литературы (Rawstron А.С. et al, 2002, Capalbo S.,
2003, Воробьев А.И., 2007) значимую роль в формировании хронического
лимфолейкоза играют генетические факторы. Как свидетельствуют
результаты цитогенетических исследований, при В-ХЛЛ регистрируются
определенные хромосомные аномалии, ассоциированные с особенностями
течения и прогрессирования заболевания (Абраменко И.В., 2003, Домрачева
Е.В. и др., 2005, Heinter D. et al, 2003, Crespo M. et al, 2003). С молекулярно-
генетических позиций хронический лимфолейкоз изучен недостаточно.
Подавляющее число работ по исследованию роли различных генов-
кандидатов в формировании подверженности к хроническому лимфолейкозу
проведено за рубежом (Levy V. et al, 1999, Magliazza A. et al, 2001,
Hulkkonen J. et al, 2000, 2002, Sturm J., 2005, Jamroziak K. et al, 2006, 2009,
Bogunia-Kubik K. et al, 2006, Nuckel H. et al, 2007, Dong H.J. et al, 2010). В
Российской Федерации лишь несколько работ посвящено молекулярно-
генетическим аспектам хронического лимфолейкоза (Клинков А. А. и др.,
2004, Бакиров Б.А. и др., 2005, 2009, Гра О. А. и др.,2008, Овсепян В.А. и
др., 2010), при чем основное внимание в этих исследованиях уделено генам
системы детоксикации ксенобиотиков. Роль генетических вариантов
факторов некроза опухолей и их рецепторов в формировании и клиническом течение В-клеточного хронического лимфолейкоза среди населения России изучена крайне слабо.
Работа выполнена в рамках Федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России на 2009-2013 г.г. (государственный контракт № П384 «Разработка молекулярно-генетических основ мультифакториальной патологии человека (на модели генов цитокинов»)».
Цель: Изучить вовлеченность генетических полиморфизмов факторов некроза опухолей и их рецепторов в формирование и клиническое течение хронического лимфолейкоза.
Задачи:
Изучить распространенность полиморфных вариантов генов фактора некроза опухоли a (-308G/A TNFa), лимфотоксина a (+250A/G Lt a), рецепторов фактора некроза опухоли 1-го (+36A/G TNFR1) и 2-го (+1663A/G TNFR2) типов у больных ХЛЛ и в популяционной выборке.
Рассмотреть роль молекулярно-генетических маркеров и их комбинаций в формировании хронического лимфолейкоза.
Исследовать влияние генетических полиморфизмов на дебют хронического лимфолейкоза.
Проанализировать ассоциации генов-кандидатов с особенностями клинического течения хронического лимфолейкоза.
Оценить взаимосвязь генетических вариантов факторов некроза опухолей, и их рецепторов с гематологическим статусом больных хроническим лимфолейкозом.
Научная новизна. Впервые проведен анализ ассоциаций
полиморфных локусов факторов некроза опухолей (-308G/A TNFa, +250A/G Lta) и их рецепторов (+36A/G TNFR1, +1663A/G TNFR2) с развитием хронического лимфолейкоза среди русского населения Центральной России. Установлены генетические факторы подверженности к хроническому лимфолейкозу. Выявлены молекулярно-генетические маркеры повышенного риска тяжелого клинического течения заболевания и развития осложнений в дебюте и течение ХЛЛ. Определены межгенные сочетания, ассоциированные с формированием ХЛЛ.
Научно-практическое значение. Установленные в исследовании молекулярно-генетические маркеры неблагоприятного клинического течения ХЛЛ могут быть использованы в работе гематологических стационаров для выявления среди больных группы риска тяжелого течения заболевания, развития осложнений. Полученные данные послужат основой для последующих исследований по определению генетических факторов риска развития ХЛЛ. Результаты работы используются в учебном процессе в ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет».
Апробация работы. Основные результаты диссертации доложены и
обсуждены на: X Международном конгрессе «Здоровье и образование в XXI
веке» (Москва, 2009), 63-й Итоговой научной конференции молодых ученых
Ростовского государственного медицинского университета с
международным участием, посвященная 70-летию СНО (Ростов-на-Дону,
2009), II международной дистанционной научной конференции «Инновации
в медицине», посвященной 75-летию Курского государственного
медицинского университета (Курск, 2009), межрегиональной научно-
практической конференции «Актуальные вопросы диагностики и лечения
заболеваний внутренних органов» (Белгород, 2009), IV Международной
научной конференции молодых ученых-медиков (Курск, 2010), VI Съезде
Российского общества медицинских генетиков (Ростов-на-Дону, 2010),
Международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы
полиморбидной патологии в клинике внутренних болезней (Белгород, 2010),
IX Всероссийской университетской научно-практической конференции
молодых ученых по медицине (Тула, 2010), V Международной (XIV
Всероссийской) Пироговской научной медицинской конференции (Москва,
2010), II Всероссийской научно-практической конференции с
международным участием «Медико-биологические аспекты
мультифакториальной патологии» (Курск, 2011).
Личный вклад автора. Автором лично определены цель и задачи исследования, разработаны методические подходы для их решения, проведено клиническое обследование всех больных ХЛЛ. Автор лично принимал участие в выполнении молекулярно-генетических исследований, проводил обработку, анализ и обобщение полученных результатов, подготовку основных публикаций по выполненной работе, апробацию результатов исследования, написание и оформление рукописи.
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 16 печатных работ, в том числе 4 в журналах из перечня ВАК Минобрнауки РФ.
Положения, выносимые на защиту:
Генетические полиморфизмы -308G/A TNFa, +250A/G Lta и +1663A/G TNFR2 определяют риск формирования хронического лимфолейкоза.
Молекулярно-генетические маркеры ассоциированы с клиническими особенностями дебюта хронического лимфолейкоза.
Клиническое течение заболевания связано с генами-кандидатами.
Гематологический статус больных зависит от носительства определенных генетических вариантов факторов некроза опухолей.
Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, описание использованных материалов и методов, результаты и их обсуждение, а также выводы, практические рекомендации и список литературы. Материалы диссертации изложены на 122 страницах машинописного текста и содержат 12 таблиц и 35 рисунков. Библиографический указатель содержит 206 наименований, из
которых 135 иностранных.
