Введение к работе
Актуальность проблемы. На фоне продолжающегося демографического кризиса в России одной из актуальных проблем на сегодняшний день остается воспроизводство здорового потомства.
Здоровье детей в ранний постнатальный период во многом определяется состоянием материнского организма. В настоящее время отмечается увеличение числа женщин фертильного возраста с различными экстрагенитальными заболеваниями, среди которых особое место занимают болезни гепатобилиарной системы, в том числе хронические гепатиты, холециститы, холангиты, циррозы, хроническая жировая дистрофия печени, желчнокаменная болезнь, являющиеся одной из важных причин материнской и перинатальной патологии (Михайленко Е.Е. с соавт., 1991; Бударина Н.А, 2005). Особое место в ряду этих заболеваний в последнее время занимают вирусные гепатиты, в связи с их нарастающей распространенностью в мире. Специалисты отмечают, что сейчас в России насчитывается около 5 миллионов носителей вируса гепатита В и около 200 000 случаев заболевания гепатитом А (Арямкина О.Л, 2008; Онищенко Г.Г., 2005). Согласно литературным данным, беременность, сопровождающаяся патологией печени, относится к беременности с высоким риском, исход которой не всегда однозначен (Jabeen Т., 2000; Heneghan М. А., 2001). Влияние хронических поражений гепатобилиарной системы на течение беременности и здоровье потомства в настоящее время является одной из наиболее актуальных проблем современной физиологии (Егоров А.Ю., 2002).
Многочисленные экспериментальные исследования и клинические наблюдения указывают на нарушение структурно-функционального становления систем жизнеобеспечения у потомства матерей с хронической патологией гепатобилиарной системы (Брюхин Г.В., 1990 - 2006; Михайлова Г.И., 1990, 2001; Грачев А.Ю., 1990, 1994; Пивснь Г.В., 1995; Бояков А.А., 1999,2001; Николина О.В., 2000; Евченко Е.В., 2001; Вторушина Е.В., 2003; Пашнина Е.Н., 2002, 2003; Федосов А.А., 2002, 2004, 2006; Сизоненко М.Л., 2005, 2006; Ильиных М.А., 2006), Согласно данным литературы (Ayelet Laronne-Bar-On, 2008; Е. Castermans, 2008), дети матерей с хронической патологией печени предрасположены к различным заболеваниям. Не вызывает сомнения, что одной из причин этих нарушений является изменение иммунологической реактивности организма, которая определяется состоянием иммунной системы организма в целом и характером клеточного иммунитета, центральным органом которого является тимус. Анализ работ современных ученых показывает, что на сегодняшний день недостаточно изучены вопросы влияния поражения печени матери различной этиологии на морфофункциональное становление систем жизнеобеспечения потомства, в частности на систему клеточного иммунитета.
Отмеченное выше, предопределило выбор темы, объекта и предмета исследования, постановку цели и задач, структуру исследования.
Цель оценка влияния патологии печени самок крыс на морфофункциональное становление клеточного звена иммунитета потомства.
Цель исследования обусловила постановку следующих основных задач:
провести морфофункциональную оценку клеточного состава внутритимусного микроокружения (макрофагов и тучных клеток) у потомства самок крыс с экспериментальным поражением печени различного генеза.
на основе иммуноферментного метода проанализировать пролиферативную и апоптотическую реакцию тимоцитов у потомства животных с хроническим поражением печени различного генеза.
оценить интенсивность реакции гиперчувствительности замедленного типа у потомства самок крыс с хроническим экспериментальным поражением печени в различные сроки постнатального периода.
провести сравнительный анализ морфофункционального состояния тимуса у потомства самок крыс с D(+) - галактозаминовым поражением печени и у потомства самок крыс при поражением печени с использованием фильтрата Е. coll.
Научная новизна:
Выявлена депрессия клеточного иммунитета у потомства самок крыс с экспериментальным поражением печени различного генеза (D - галактозамин и E.coli) на 1, 15, 30, 45 и 60 - ые сутки постнатального онтогенеза, что нашло свое проявление в достоверном снижении весового индекса тимуса, делимфатизации, инверсии площадей коркового и мозгового вещества тимусной дольки.
Новыми являются данные об угнетении у потомства самок крыс с хронической патологией печени Т-лимфоцитопоэза на центральном уровне, о чем свидетельствует достоверное увеличение числа малодифференцированных клеток за счет снижения числа зрелых тимоцитов, увеличение их среднего диаметра (р < 0,05) и достоверного уменьшения клеточной плотности лимфоцитов тимуса.
В отличие от ранее проведенных исследований новыми являются данные об усилении пролиферативной активности тимоцитов у потомства самок крыс с экспериментальным поражением печени, о чем свидетельствует гиперэкспрессия белка Ki-67, а также то, что нарушение Т-клеточного лимфоцитопоэза на центральном уровне сопровождается увеличением числа р53 позитивных лимфоцитов тимуса.
Установлено изменение клеточного состава внутритимусного микроокружения потомства самок крыс с патологией гепатобилиарной системы, обусловленного введением D-галактозамина и E.Coli: снижение числа CD68 позитивных клеток, увеличение числа и секреторной активности тучных клеток.
Теоретическая и практическая значимость работы
Полученные результаты, выявившее общие и специфические эффекты неблагоприятного влияния гепатобилиарной патологии различного генеза матери на формирование клеточного иммунного ответа у потомства, расширяют представление о роли хронической патологии гепатобилиарной системы матери в нарушении становления клеточного звена иммунитета у потомства и могут быть использованы для обоснования направленной иммунной коррекции.
Результаты проведенного исследования экспериментально обосновывают необходимость выделения потомства матерей с поражением печени различного генеза в группу повышенного риска в связи с нарушением формирования иммуномодулирующих ответов в постнатальном периоде.
Результаты научного исследования внедрены в научно-исследовательский и учебный процессы кафедры гистологии, эмбриологии и цитологии ГОУ ВПО «Челябинская государственная академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»: разделы «Иммунная система», «Нарушение внутриутробного развития человека», а также в учебный процесс биологического факультета Челябинского государственного университета: дисциплины «Физиология человека и животных», «Иммунология» Некоторые аспекты научного изыскания отображены в лекционном курсе и на лабораторных занятиях при изучении иммунной системы.
Положения, выносимые на защиту:
Хроническое экспериментальное поражение печени самок крыс, обусловленное введением D-галактозамина и E.Coli, сопровождается угнетением Т-лимфоцитопоэза у потомства в раннем постнатальном периоде.
Основными механизмами угнетения лимфоцитопоэза у потомства самок крыс с хроническим экспериментальным поражением печени различного генеза на ранних сроках постнатального онтогенеза является дисбаланс пролиферативной и апоптотической активности тимоцитов.
Поражение гепатобилиарной системы различной этиологии у самок крыс приводит к нарушению клеточного иммунного ответа у потомства экспериментальных животных в раннем постнатальном периоде.
Апробация материалов работы
Результаты исследования были представлены на IX Международном конгрессе морфологов «Медико - экологические проблемы возрастной морфологии» (Бухара, 2008); на II Международной научно-практической конференции «Адаптация биологических систем к естественным и экстремальным факторам среды» (Челябинск, 2008); на VI итоговой научно-практической конференции молодых ученых Челябинской государственной медицинской академии (Челябинск, 2008); на Всероссийской научной
конференции «Нейробиологические аспекты морфогенеза и регенерации» (Оренбург, 200$); на IV Международной конференции по иммунотерапии (Москва, 2008); на Международной гистологической конференции «Морфогенезы в эволюции, индивидуальном развитии и эксперименте» (Тюмень, 2008); на, конференции в рамках 14-ой Российской Гастроэнтерологической неделе (Москва, 2008); на конференции, посвященной десятилетию биологического факультета Челябинского государственного университета (Челябинск, 2008), на VI Международной конференции «Актуальные проблемы биологии и ветеринарной медицины мелких домашних животных» (Троицк, 2009), ра заседании Челябинского отделения Всероссийского общества анатомов, гистологов и эмбриологов (Челябинск, 2009).
Публикации
По теме диссертации опубликовано 12 работ, в том числе 1 статья в издании, рекомендованном ВАК РФ. Объем и структура диссертация
Основное содержание работы изложено на 222 страницах машинописного текста, содержит 25 таблиц, 70 рисунков, из которых 23 микрофотографии. Диссертация состоит из введения, обзора литературы (глава 1), описания материалов и методов исследования (глава 2), собственных результатов исследования (глава 3), заключения, списка использованных источников, включающего 347 наименование, в том числе 201 работа зарубежных авторов, 4 приложения.
