Введение к работе
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Заболевания печени и желчевыводяших путей занимают во всем мире одно из первых мест го частоте встречаемости. Ведущей причиной развития гепатобилиарной патологии на современном этапе развития общества становится воздействие на печень токсических химических соединений. К их числу относятся вещества, загрязняющие окружающую среду, пищевые добавки, моющие и косметические средства, а также лекарственные препараты. Опасность для здоровья и социальная значимость заболеваний печени токсической этиологии определяют необходимость углубленного изучения их патогенеза и разработки аффективных, патогенетически обоснованных методов фармакопрофилактики и терапии.
В последнее время значительно возросло число медикаментозных поражений печени, особенно в странах с высоким уровнем развития здравоохранения (H.Rubin 1980). Одним из первых проявлений токсического поражения печени является жировая дистрофия различной степени выраженности. Среди лекарственных препаратов, вызывающих жировой гепатоз, известны цитостатики, антидепрессанты, антиаритмические, гормональные средства и др. Особое место в этой группе препаратов занимает тетрациклин, который, несмотря на выраженные стеатогенные свойства, продолжает использоваться в терапии (М. Д. Маяковский 1987).
Тригерные механизмы развития жирового гепатоза неизвестны, также как и способы зашиты клетки при этой патологии (Ю. И. Губский 1972; Э. С. Горштейн и соавт. 1987). Однако, учитывая, что узловым ЮМ9НТОМ в патогенезе жирового гепатсза является нарушение баланса между скоростью образования нейтральных триглицеридов и их катаболизмом (П. Мэйес 1993), т.е. реакциями, протекающими в разных ком-лартментах клеток печени, в том числе а митохондриях и шкросомах,-можно предпологать, что нарушения в этих системах могут играть определенную роль в развитии патологического' процесса. Действительно, в литературе имеются указания на разобщающее процессы окислительного фосфоршшрования действие тетрациклина (W. F. Loomis 1950; Г. КХ Мальцев, М.Ф. Нестерин 1978). Данные же о состоянии монооксиге-назной системы при этой патологии противоречивы. С одної стороны описано угнетение, либо отсутствие изменений активности ферментов
при жировом гепатозе (Е. Hagel et al., H.R Скакун, А. КОлейник 1984). С другой стороны ряд фармакологических препаратов, обладающих способностью индуцировать систему микросомального окисления, успешно используют при лечении жировой дистрофии печени в клинике и эксперименте (А.Кирай ig84; А.И.Венгеровский 1991). Параллельное изучение функционального состояния этих субклеточных структур, позволяющее выявить характерные патогенетические особенности токсических поражений печени и определить тригерные механизмы развития жирового гепатоза, дало бы возможность теоретически обосновать принципы фармакологической коррекции этой патологии, основанные на возможности модуляции клеточного метаболизма
Вышеизложенное определило ЦЕЛЬ работы, которая состоит в установлении регуляторной роли митохондриального и микросомального окисления в стеатогенном действии тетрациклина.
В соответствии с поставленной целью определены следующие ЗАДАЧИ исследования:
-
Выбор и апробация модели экспериментального теграциклинового жирового гепатоза.
-
Исследование влияния тетрациклина гидрохлорида на функции митохондриальной и микросомальной систем печеня.
-
Поиск биохимических предикторов стеатогенкого действия тетрациклина на печень.
-
Изучение влияния индукции монооксигеназной системы микросо мадьного окисления на развитие тетрациклинового жирового гепатоза
НАУЧНАЯ НОВИЗНА исследования. Впервые проведено комплексное изучение функционально-метаболического состояния системы биотрансформации печени и знергообразуюшей систему митохондрий печени'крыс при остром тетрациклиновом жировом гепатозе. Установлено слабо* разобщающее действие тетрациклина на процессы окислительного фос-форилирования в митохондриях без достоверного влияния на их эффективность. При этом выявлено Са-зависимое снижение активности первого ферментного комплекса электронтранспортной цепи митохондрий, о чем свидетельствуют изменения редокс-цикла пирвдиянуклеотидо] при фосфорилировании АДФ, уменьшение степени восстановления пири-
диннуклеотидов при . окислении НАД-зависимых субстратов, снижение обратного переноса электронов при окислении сукцината, а также более выраженное подавление Са-транспортной функции митохондрий при окислении глутамата с манатом.
Установлено сильное дозозависимое ингибирующее действие тетрациклина на ферменты ионооксигеназной системы микросомального окисления, коррелирующее со степенью накопления общих липидов и триг-лицеридов в клетках печени и позволяющее рассматривать эту систему как одну из мишеней токсического эффекта данного антибиотика
Впервые проведенное исследование влияния индукции системы микросомального окисления на ее функциональное состояние, процессы окислительного фосфорилирования , состояние различных участков дыхательной цепи и липидный обмен при тетрациклиновом жировом гепа-тозе показало, что в этих условиях сохраняется как стеатогенный эффект тетрациклина, так и его повреждающее действие на систему микросомального окисления. Однако а атом случае моноокеигеназная система после ингибируицего действия тетрациклина имеет болел высокую функциональную активность сравнительно с неиндуцированными животными.
Впервые проведена оценка и установлены различия биохимического статуса крови у животных с нормальной и индуцированной системой монооксигеназного окисления микросомальной системы при тетрациклиновом жировом гепатоэе.
НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ значимость работы. Сравнительный анализ различных функционально-метаболических параметров при тетрациклиновом жировом гепагозе позволил определить наиболее информативные предикторы этой патологии. Для ткани печени - это триадилглвдериды и в меньшей степени общие липиды, для крови животных с нормальной исходной активностью монооксигеназной системы микросомального окисления - это содержание холестерина и коэффициент де Ритиса, для животных с предварительно индуцированной активностью этой системы - билирубин, отношение [ билирубин] Л мочевая кислота1 и коэф-. фициент де Ритиса
Дэказано, что оценка влияния тетрациклинового жирового гепатоза на состояние проницаемости плазматических мембран, определяемая по активности трансаминаз, не является достаточно чувствительным тес-
том. Более информативным является коэффициент де Ритиса ([активность Ac AT]/[активность АлАТ]).
Выявлено, что предикторами исходной активности системы микросо-мального окисления у животных с тетрациклиновым жировым гепатозом являются содержание холестерина и отношение [содержание билирубина] /t содержание мочевой кислоты], определяемые в плазме крови.
Впервые показано, что при тетрациклиновом жировом гепатозе происходит значимое снижение активности монооксигеназной системы мик-росомального окисления у животных с различным исходным ее уровнем.
Установлено, что предварительная индукция системы микросомаль-hoj'O окисления фенобарбиталом не может рассматриваться как способ, корригирующий интенсивность тетрациклидавого жирового гепатоаа и не может быть рекомендован для клинической практики.
Излученные данные обосновывают перспективность комплексного изучения функционального состояния митохондриальной и микросомаль-ной систем окисления печени при жировом гепатозе для понимания тонких механизмов этой патологии.
Работа выполнена в рамках ГНТП "Создание лекарственных средств методами химического и биологического синтеза", направление 05 "Оармакокинетические и биофармацевгические принципы совершенствования лекарственных препаратов", тема "Создание новых лекарственных препаратов на основе изучения взаимодействия химической структуры, биотрансформации, фармакокинетики и фармакологической активности".
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Результаты настоящего диссертационного исследования докладывались на Второй международной конференции " Биологические основы индивидуальной чувствительности к действию'_ психотропных средств" (Москва, 1993), на Российской научной конференции " Антигипоксанты и актопротекторы: итоги и перспективы" (Санкт -Петербург, 1994), а также апробированы на мекпабораторном семинаре Института фармакологии Российской АМН 14 июня 1994. г.
ПУБЛИКАЦИИ. По материалам диссертации опубликовано 3 работы и
сдано в печать 3 статьи.-1 ..'..';.- .*-.;_
ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ. Диссертация содержит следующие разделы : Введение, Обзор литературы, Материалы и методы исследо-
вания, Экспериментальная часть, состоящая из четырех глав, Общее заключение, Выводы и Библиографический указатель, включающий работы на русском (116) и иностранном (112) языках. Диссертация изложена на -/У,Гстр., иллюстрирована39 таблицами и
Похожие диссертации на Роль микросомального и митохондрального окисления в механизме стеатогенного действия тетрациклина
