Введение к работе
Актуальность темы исследования. В медицинской практике для лечения опухолевых процессов, в частности для лимфом, широко практикуют периодическое применение цитостатшсов и глюкокортикоидов. Так, например, в схемы лечения онкологических больных включены препараты: циклофосфан, имеющий противоопухолевый эффект, и преднизолон, обладающий противовоспалительным действием. При курсовом применении цитостатики вызывают ряд осложнений: снижение иммунитета, присоединение бактериальных, вирусных, грибковых инфекций, что приводит к удлинению сроков лечения, а нередко, и к угрозе жизни.
Мониторинг (постоянное наблюдение) за содержанием лекарственных веществ в биологических средах организма позволяет осуществлять своевременную коррекцию фармакотерапии, особенно у категории лиц с онкозаболеваниями.
Представляет интерес изучение возможности использования спектрофотометрии как ключевого метода в контроле качества и для целей терапевтического мониторинга циклофосфана и преднизолона.
Для количественного определения преднизолона Государственная фармакопея (ГФ) предлагает методику спектрофотометрического определения в различных лекарственных формах. В существующей методике используются сильнодействующие органические растворители высокой степени очистки (метанол). Этот факт осложняет выполнение исследований по данной методике из-за проблем с приобретением растворителя, в особенности для рутинных анализов.
Для количественной оценки циклофосфана в ГФ описана методика обратного аргентометрического титрования, которая длительна по времени определения и имеет невысокую чувствительность.
Таким образом, разработка экспресс-методик. количественного определения циклофосфана иТпзеднизолона спектрофотометрическим методом,
а также проведение на их основе фармакокинетических исследований и мониторинга концентраций позволят не только расширить показания к назначению данных лекарственных средств, создать оптимальные алгоритмы их использования для онкобольных, но и во многом реализовать индивидуальный подход при подборе терапии в каждом конкретном случае.
Цель работы. Изучение возможности применения
спектрофотометрического анализа количественного экспресс-метода определения циклофосфана и преднизолона для анализа лекарственных форм и биологических объектов, проведение фармакокинетических исследований у животных и у онкобольных для мониторинга концентраций лекарственных веществ.
Задачи исследования
-
Подобрать условия количественного спектрофотометрического определения преднизолона и циклофосфана на модельных растворах (субстанциях).
-
Сравнить разработанные методики количественного определения лекарственных средств с фармакопейными методиками.
-
Применить разработанные методики преднизолона и циклофосфана для готовых лекарственных форм.
-
Адаптировать спектрофотометрические методики преднизолона и циклофосфана для биологических объектов, подобрать условия пробоподготовки.
-
Применить разработанные экспресс-методики для фармакокинетических исследований на животных и сравнить их с данными в научной литературе.
-
Провести фармакокинетические исследования и рассчитать параметры у онкобольных с помощью разработанных спектрофотометрических методик.
Научная новизна
1. Впервые разработаны методики количественного
спектрофотометрического экспресс-определения циклофосфана и модифицирована методика определения преднизолона в модельных растворах (субстанциях).
-
Разработанные методики адаптированы для целей контроля качества лекарственных препаратов (таблетки, растворы, лиофилизированный порошок; для инъекций).
-
Впервые определены оптимальные условия пробоподготовки сыворотки крови и мочи (объем пробы и концентрация осадителей) при количественном определении циклофосфана и преднизолона.
-
На основе разработанных спектрофотометрических экспресс-методик проведены фармакокинетические исследования для преднизолона и циклофосфана на животных, определены следующие параметры: начальная и поддерживающая дозы, период полувыведения, константа скорости элиминации, константа скорости всасывания. Полученные параметры подтверждены данными в научной литературе.
-
Впервые проведены фармакокинетические исследования и рассчитаны основные показатели у групп онкологических больных с лимфомой для дальнейшего использования этих показателей в мониторинге концентраций лекарств и для подбора индивидуальных доз лекарственных средств.
Работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ГОУ ВПО НГМУ Минздравсоцразвития России по теме «Разработка методик количественного определения лекарственных препаратов в биологических средах и проведение фармакокинетических исследований» (номер государственной регистрации 01200956813).
Практическая значимость. Впервые разработаны экспрессные методики количественного определения циклофосфана и преднизолона, которые могут использоваться для количественной оценки в объектах: сыворотке, моче, таблетках, растворах, лиофилизированном порошке. Результаты исследования внедрены в практическую деятельность Новосибирского областного бюро судебно-медицинской экспертизы и Производственного объединения
000 «Диафарм» (г. Бердск).
Полученные параметры фармакокинетических исследований лекарственных веществ с помощью предложенных методик позволят проводить мониторинг в терапии препаратами «Циклофосфан» и «Преднизолон» для пациентов с онкологическими заболеваниями крови.
Основные положения, выносимые на защиту
-
Условия спектрофотометрического определения циклофосфана и преднизолона, позволяющие регистрировать спектральные кривые лекарственных средств в стандартных растворах и биологических объектах.
-
Прямолинейная зависимость между величиной оптической плотности и концентрацией препарата говорит о незначительном влиянии компонентов крови на величину аналитического сигнала. Минимально определяемая концентрация составляет 1-Ю"7 г/мл.
-
Условия пробоподготовки (подбор концентраций осадителей) в биологическом образце и определение объема пробы для количественного анализа.
-
Показатели фармакокинетических исследований при введении циклофосфана и преднизолона у пациентов с онкозаболеванием (лимфома) с помощью разработанных спектрофотометрических методик.
Апробация работы. Основные результаты диссертации обсуждены и одобрены на II Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Вопросы патогенеза типовых патологических процессов» (Новосибирск, 2010), на научно-практической конференции «Авиценна» (Новосибирск, 2007), на научно-практической конференции «Авиценна» (Новосибирск, 2009), на Всероссийской научно-практической конференции «Авиценна» (Новосибирск, 2010), на межвузовской научной конференции «Актуальные вопросы фармакологии и фармации», посвященной памяти профессора В. В. Пичугина и 75-летию КГМУ (Курск, 2009 г.).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 работ, в том числе
1 статья - в ведущем рецензируемом научном журнале, рекомендуемом ВАК
Минобрнауки России.
Структура и объем работы. Диссертационная работа изложена на 123 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описаний материалов и методов исследования, 3-х глав описаний собственных исследований, выводов. Диссертация содержит 28 таблиц и 31 рисунок. Список литературы включает 126 источников, из которых 37-зарубежных авторов.
