Введение к работе
Актуальность темы. Поиск новых перспективных источников получения растительных биологически активных веществ (БАВ) является одной из стратегических задач современной фармации. Благодаря комплексному воздействию БАВ растительного происхождения особую актуальность приобретает разработка препаратов на основе лекарственного растительного сырья (ЛРС) (Киселева Т.Л. и др., 2008; Куркин В.А., 2007; Самылина И.А. и др., 2003, 2010). В настоящее время особое внимание уделяется изучению лекарственных растений (ЛР), обладающих антиоксидантной активностью. В этом отношении интерес представляет ЛРС, содержащее антоцианы. Поскольку этиологию многих заболеваний (сердечно-сосудистые, онкологические заболевания, артрит, сахарный диабет, болезнь Альцгеймера и др.) ассоциируют с разрушающим эффектом свободных радикалов, в этих условиях необходимо дополнительное поступление веществ с антиоксидантной активностью. Многие лекарственные препараты, относящиеся к группе антиоксидантов, являются синтетическими, однако большой интерес представляют растительные вещества фенольной природы, в частности антоцианы. Кроме того, наряду с антиоксидантной активностью антоцианы обладают противовоспалительными, антимикробными, гепатопротекторными свойствами. Вещества антоциановой природы обнаружены в растворенном виде в клеточном соке почти во всех частях растений – в листьях, стеблях, запасающих органах, хотя наибольшее их количество содержится в цветках и плодах. В этом отношении интерес представляют плоды таких растений, как черника обыкновенная, арония черноплодная, смородина черная, черемуха обыкновенная и другие. Однако, на наш взгляд, в изучении сырья некоторых из вышеперечисленных видов лекарственных растений существуют нерешенные вопросы. Так, современное состояние действующей нормативной документации (НД) на плоды аронии черноплодной, смородины черной, черемухи обыкновенной требует глубокого анализа и переосмысления устаревших данных. В частности, в разделах существующей НД, посвященных качественному анализу сырья, данные по морфолого-анатомическим особенностям плодов обсуждаемых растений представлены не в полном объеме, отсутствует визуальная поддержка данных признаков. Набор качественных реакций также, на наш взгляд, нуждается в дополнении более специфическими. В разделе, посвященном количественному определению, не находят отражения методики, основанные на физико-химических методах с применением современных инструментальных возможностей, а также отсутствуют числовые показатели качества сырья. Кроме того, обсуждаемое ЛРС не изучено в сравнительном плане, что создает определенные трудности при идентификации сырья и препаратов. Достаточно высокая нестабильность антоциановых соединений создает трудности при выделении индивидуальных компонентов и последующем их хранении. В этой связи ЛР, содержащие данную группу веществ, должны быть востребованы, прежде всего, как источник получения суммы антоцианов, а также в качестве препаратов на их основе. В этой связи целесообразным представляются исследования по стандартизации ЛРС, содержащего антоцианы, а также разработка методик качественной и количественной его оценки.
Цель работы и основные задачи исследования. Целью настоящей работы являлется исследование по стандартизации некоторых видов лекарственного растительного сырья растений, содержащих вещества антоциановой природы.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
-
Выявление диагностических признаков плодов аронии черноплодной.
-
Выявление диагностических признаков плодов смородины черной.
-
Выявление диагностических признаков плодов черемухи обыкновенной.
-
Сравнительное изучение анатомо-морфологических и гистологических особенностей плодов аронии черноплодной, смородины черной, черемухи обыкновенной.
-
Сравнительное изучение химического состава плодов аронии черноплодной, плодов смородины черной, плодов черемухи обыкновенной.
-
Разработка методик качественного определения антоцианов в плодах аронии черноплодной.
-
Разработка методики качественного определения антоцианов в плодах смородины черной.
-
Разработка методики количественного определения суммы антоцианов в плодах аронии черноплодной.
-
Разработка методики количественного определения суммы антоцианов в плодах смородины черной.
-
Определение числовых показателей качества сырья «Аронии черноплодной плоды».
-
Определение числовых показателей качества сырья «Смородины черной плоды».
-
Разработка проектов ФС на сырье «Аронии черноплодной плоды» и «Аронии черноплодной плоды свежие».
-
Разработка состава и технологии получения нового лекарственного препарата «Аронии черноплодной сироп».
Научная новизна. В результате проведенного сравнительного анатомо-морфологического исследования впервые выявлены диагностические признаки сырья «Аронии черноплодной плоды», заключающиеся в наличии одноклеточных волосков, характерных следов мест прикрепления волосков с неравномерно утолщенными одревесневшими клетками, групп склереид с характерным строением, семенной кожуры с тонким ослизняющимся эпидермисом и слоем склеренхимы с широкопросветными клетками. Для сырья «Смородины черной плоды» выявлены признаки: наличие неотпадающего, сросшегося с ягодой, околоцветника; наличие крупных щитовидных (пельтатных) эфиромасличных железок, определяемых по всей поверхности плода; «паркетный» эндокарп околоплодника; гребневидный эпидермис семенной кожуры. Впервые для сырья «Черемухи обыкновенной плоды» проведено исследование анатомического строения плодоножки. Обоснована целесообразность стандартизации ЛРС «Аронии черноплодной плоды», «Смородины черной плоды» по сумме антоцианов в пересчете на цианидин-3-О-глюкозид. Подобраны оптимальные условия для проведения качественной и количественной оценки суммы антоцианов в плодах аронии черноплодной, смородины черной с использованием хроматографических и спектрофотометрических методов, позволяющих определить качество и подлинность лекарственного растительного сырья. В результате сравнительного исследования спектральных характеристик извлечений из плодов аронии черноплодной свежих и воздушно-сухих показана целесообразность переработки свежего сырья для получения лекарственных препаратов с высоким содержанием антоцианов. Изучены показатели качества сырья «Аронии черноплодной плоды», «Аронии черноплодной плоды свежие» «Смородины черной плоды», «Черемухи обыкновенной плоды».
Впервые разработаны унифицированные методики качественного и количественного анализа плодов аронии черноплодной, смородины черной и препаратов на их основе по сумме антоцианов.
Практическая значимость. Разработаны унифицированные методики качественного и количественного анализа плодов аронии черноплодной и смородины черной, заключающиеся в определении антоцианов методами тонкослойной хроматографии (ТСХ) и спектрофотометрии. Методики количественного анализа ЛРС «Аронии черноплодной плоды», «Смородины черной плоды» базируются на определении содержания суммы антоцианов в пересчете на цианидин-3-О-глюкозид методом спектрофотометрии при аналитической длине волны 534-538 нм. Разработаны показатели качества ЛРС «Аронии черноплодной плоды», «Аронии черноплодной плоды свежие», «Смородины черной плоды» и лекарственного препарата (ЛП) «Аронии черноплодной сироп». Разработаны и оформлены проекты ФС «Аронии черноплодной плоды свежие», «Аронии черноплодной плоды», направленные на экспертизу в ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения РФ (вх. № 1230/01-37-187; 1230/01-37-215).
Разработаны состав и технология получения нового лекарственного препарата «Аронии черноплодной сироп».
Результаты исследований используются в учебном процессе на кафедрах фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии, химии фармацевтического факультета, фармацевтической технологии, управления и экономики фармации ГБОУ ВПО СамГМУ Минздрава России, в ГУЗ «Центр контроля качества лекарственных средств Самарской области», в ЗАО «Самаралектравы» (акты внедрения от 2012 г.).
Связь задач исследования с планами научных работ. Диссертационная работа выполнена в соответствии с тематическим планом научно-исследовательских работ ГБОУ ВПО СамГМУ Минздрава России (№ Гос. регистрации 01200900568).
Основные положения, выдвигаемые на защиту:
-
Результаты сравнительного анатомо-морфологического исследования плодов аронии черноплодной, смородины черной, черемухи обыкновенной.
-
Результаты сравнительного изучения химического состава плодов аронии черноплодной, смородины черной, черемухи обыкновенной.
-
Результаты исследований по разработке подходов к стандартизации ЛРС аронии черноплодной плоды, аронии черноплодной плоды свежие, смородины черной плоды и ЛП на основе плодов аронии черноплодной.
-
Методики качественного анализа ЛРС «Аронии черноплодной плоды», «Аронии черноплодной плоды свежие», «Смородины черной плоды» и ЛП «Аронии черноплодной сироп» с использованием методов ТСХ и спектрофотометрии.
-
Методики количественного анализа ЛРС «Аронии черноплодной плоды», «Аронии черноплодной плоды свежие», «Смородины черной плоды» и ЛП «Аронии черноплодной сироп» с использованием методов ТСХ и спектрофотометрии.
Апробация работы. Материалы работы доложены и обсуждены на XIV и XVI Всероссийском конгрессе «Экология и здоровье человека» (г. Самара, 2010, 2012); конференции дипломированных специалистов Аспирантские чтения «Молодые ученые - медицине» (г. Самара, 2010; 2011; 2012); XVIII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (г. Москва, 2011); IV Всероссийской конференции «Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья» (Барнаул, 2007); International Сonference on Polyphenols Communications (Salamanca – Spain, 2008; Montpellier – France, 2010).
Публикации. Основное содержание диссертации опубликовано в 15 научных работах, из них 7 статей в журналах, рекомендуемых ВАК РФ.
Личный вклад автора. Все экспериментальные результаты, приведенные в диссертации, получены самим автором. Автором выполнены исследования по сравнительному изучению анатомо-морфологических особенностей строения плодов некоторых видов растений, содержащих вещества антоциановой природы; автором апробированы и подобраны оптимальные условия экстракции антоцианов из плодов аронии черноплодной, смородины черной. Автором разработаны методики качественной и количественной оценки исследуемых видов лекарственного растительного сырья. Автор самостоятельно рассчитал метрологические характеристики методик качественного определения суммы антоцианов в исследуемых видах сырья. Автором разработан лекарственный препарат «Аронии черноплодной сироп», методики его качественной и количественной оценки, показатели качества.
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 143 страницах машинописного текста, содержит: 14 таблиц и 53 рисунка. Диссертация состоит из введения, обзора литературы (глава 1), описания объектов и методов исследования (глава 2), обсуждения результатов собственных экспериментальных исследований (главы 3-6), общих выводов, приложения и списка литературы, включающего 153 источника, из которых 60 на иностранных языках.
Во введении обоснована актуальность темы, сформулированы цель и задачи исследования, показаны научная новизна и практическая значимость полученных результатов, изложены положения, выносимые на защиту. Первая глава посвящена обзору современного состояния исследований растений, содержащих вещества антоциановой природы, в котором систематизированы сведения по изучению химического состава, фармакологических свойств, применению в медицине, стандартизации сырья и препаратов на основе аронии черноплодной, смородины черной, черемухи обыкновенной. Глава 2 содержит характеристику объектов и методов исследования. В 3 главе отражаются результаты морфолого-анатомического анализа плодов растений, содержащих вещества антоциановой природы. В главе 4 представлены результаты фитохимического изучения плодов изучаемых растений – аронии черноплодной, смородины черной, черемухи обыкновенной. Глава 5 посвящена исследованиям по стандартизации плодов, содержащих вещества антоциановой природы. В 6 главе приведены результаты исследований по разработке лекарственных средств на основе сырья, содержащего антоцианы.
В Приложение вынесены акты внедрения, проекты ФС на сырье «Аронии черноплодной плоды», «Аронии черноплодной плоды свежие», рационализаторское предложение на методику анализа сырья «Аронии черноплодной плоды».
![Исследования по стандартизации и созданию лекарственных средств на основе плодов расторопши пятнистой [Silybum marianum (L.) Gaertn.].](/i/i/4243/375120.png "Исследования по стандартизации и созданию лекарственных средств на основе плодов расторопши пятнистой [Silybum marianum (L.) Gaertn.]. Рыжов Виталий Михайлович")
