Введение к работе
Актуальность работы. Лекарственные растения являются одним из источников получения новых лекарственных средств. По современным представлениям, растительное лекарство - это цельный биогенетически сложившийся комплекс, включающий в себя активно действующие вещества и другие вторичные метаболиты, протеины, эфирные масла, хлорофилл, микроэлементы, неорганические соли, витамины и т. д. [Гриневич М.А., 1990]. Существует мнение, что такой комплекс, сформировавшийся в живой клетке, имеет большее сходство с человеческим организмом, чем изолированное, химически чистое действующее вещество, легче ассимилируется и дает меньше побочных эффектов. Для решения данной задачи наука постоянно обращается к богатому опыту народной медицины и фитотерапии, пользуясь новейшими достижениями фармацевтической практики.
Среди большого разнообразия лекарственных растений отечественной флоры значительный интерес представляют растения рода Козлобородник: козлобородник восточный (Tragopogon orientalis L.) и козлобородник луговой (Tragopogon pratensis L.) семейства Астровые (Asteraceae), не используемые в научной медицине.
Козлобородник восточный и козлобородник луговой широко распространены на территории Центральной России, имеют достаточную сырьевую базу и с древних времен применяются в народной медицине при кашле, почечнокаменной болезни, как ранозаживляющее и противовоспалительное средство. Их химический состав и биологическая активность отечественными учеными практически не изучались. Поэтому всестороннее изучение растений рода Козлобородник является актуальной проблемой.
Цель и задачи исследования. Целью нашей работы явилось фармако-гностическое изучение травы козлобородника восточного и козлобородника лугового флоры Центральной России, выявление возможности использования их в качестве источника получения фитопрепаратов.
Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:
- проведение общего фитохимического изучения козлобородника восточного и козлобородника лугового;
- изучение состава основных групп биологически активных веществ;
- разработка методик количественного определения основных групп биологически активных веществ;
- проведение морфолого-анатомических исследований для выявления диагностических признаков;
- установление товароведческих показателей сырья;
- проведение предварительных фармакологических исследований травы козлобородника восточного и козлобородника лугового, комплексов биологически активных веществ, полученных из них.
Научная новизна. Проведено фитохимическое изучение травы козлобородника восточного и козлобородника лугового флоры Центральной России. Установлено наличие углеводов, азотсодержащих соединений, органических кислот, тритерпеновых соединений, каротиноидов, фенольных соединений (дубильных веществ, флавоноидов, кумаринов, фенолкарбоновых кислот), минеральных элементов.
С использованием различных методов хроматографии (бумажной, тонкослойной, ВЭЖХ) в траве козлобородника восточного были обнаружены 22 соединения фенольной природы, из которых идентифицированы 13 соединений, представленных дубильными веществами (танин), флавоноидами (виценин, рутин, ориентин, лютеолин, апигенин, кверцетин) и фенолкарбоновыми кислотами (галловая, хлорогеновая, неохлорогеновая, кофейная, коричная и феруловая). В траве козлобородника лугового обнаружено 12, идентифицировано 8 соединений: флавоноиды (рутин, виценин, ориентин, лютеолин), фенолкарбоновые кислоты (галловая, хлорогеновая и кофейная) и дубильные вещества (танин). Новыми для изученных видов явились: из фенолкарбоновых кислот в траве козлобородника восточного – галловая, хлорогеновая, неохлорогеновая, кофейная, феруловая, коричная кислоты, в траве козлобородника лугового - галловая, хлорогеновая, кофейная кислоты; из флавоноидов в траве козлобородника восточного - виценин, рутин; в траве козлобородника лугового – рутин.
Впервые проведено выделение полисахаридов по фракциям: водорастворимые полисахариды, пектиновые вещества, гемицеллюлозы А и Б. Изучен качественный и количественный моносахаридный состав.
Проведено морфолого-анатомическое изучение травы (стебля, листа, корзинки) козлобородника восточного и козлобородника лугового. Установлены диагностические признаки для определения подлинности сырья. Определены числовые показатели доброкачественности сырья «Козлобородника трава».
Впервые проведены исследования по стандартизации травы козлобородника, в результате чего разработаны методики количественного определения суммы водорастворимых полисахаридов (гравиметрический метод) и суммы флавоноидов в пересчете на цинарозид (методом спектрофотометрии по реакции комплексообразования с алюминия хлоридом). Проведена валидация методики спектрофотометрического определения по линейности, правильности, воспроизводимости и повторяемости.
Результаты скрининговых фармакологических исследований настоев и полисахаридных комплексов травы козлобородника восточного и козлобородника лугового показали наличие противовоспалительного, диуретического, антимикробного эффектов.
Практическая значимость. Результаты проведенных исследований позволяют расширить сведения о морфолого-анатомических признаках, химическом составе, фармакологической активности травы козлобородника восточного и козлобородника лугового. Данные, полученные в ходе фармакологических исследований, являются экспериментальным обоснованием для дальнейшего углубленного изучения с целью внедрения растений рода Козлобородник в научную медицину.
Предложена стандартизация сырья по содержанию суммы флавоноидов и суммы полисахаридов. На основании морфолого-анатомического исследования установлены макро- и микродиагностические признаки для определения подлинности сырья «Козлобородника трава».
На основании проведенных исследований разработаны и внедрены:
- микродиагностический анализ травы козлобородника лугового (Акт внедрения в работу фармацевтического факультета ГОУ ВПО «Северо-Осетинский государственный университет им. К.Л. Хетагурова» от 20.01.2011 г.);
- методика количественного определения суммы флавоноидов в траве козлобородника восточного (Акт внедрения в работу ОКК ЗАО «Фирма «Здоровье» от 20.11 2009 г.);
- методика количественного определения суммы флавоноидов в траве козлобородника лугового (Акт внедрения в работу кафедры фармацевтической химии и клинической фармации ВГМА им. Н.Н. Бурденко от 12.05.2010 г.).
Положения, выносимые на защиту:
- результаты фитохимического исследования травы козлобородника восточного и козлобородника лугового;
- методики количественного определения суммы флавоноидов и суммы полисахаридов;
- результаты морфолого-анатомических исследований с установлением диагностических признаков сырья;
- результаты разработки и определения показателей доброкачественности сырья «Козлобородника трава»;
- результаты предварительных фармакологических исследований травы козлобородника восточного и козлобородника лугового.
Апробация работы. Основные положения диссертации апробированы и представлены на 74-й научной конференции КГМУ, сессии Центрально-Черноземного научного центра РАМН и отделения РАЕН «Университетская наука: теория, практика, инновации» (Курск, 2009); на 75-й межвузовской научной конференции студентов и молодых ученых-медиков «Молодежная наука и современность» (Курск, 2010); на 3-й и 4-й международных научных конференциях «Актуальные проблемы регионоведения» (Курск, 2008, 2009); на научной конференции КГМУ, сессии Центрально-Черноземного научного центра РАМН и отделения РАЕН «Университетская наука: взгляд в будущее», посвященной 76-летию КГМУ (Курск, 2011); на юбилейной научно-практической конференции с международным участием «Фармакогнозiя XXI столiття. Досягнення та перспективи» (Харкiв, 2009); на 2-м Российском фитотерапевтическом съезде (Москва, 2010); на Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Традиции и инновации фармацевтической науки и практики», посвященной 45-летию фармацевтического факультета КГМУ (Курск, 2011).
Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Курского государственного медицинского университета (номер государственной регистрации 01200952872).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 22 работы, из них 4 в изданиях из перечня, рекомендованного ВАК.
Личный вклад автора. Автор принимал участие в постановке цели и задач исследования, определении путей их реализации. Диссертантом проведен анализ отечественных и зарубежных источников литературы, выполнены фитохимические, микродиагностические и фармакологические исследования. Под руководством научного руководителя осуществлен анализ полученных экспериментальных данных, статистическая обработка результатов, сделаны выводы. Доля автора в сборе, анализе и обобщении информации составляет 90%. В работах, выполненных в соавторстве, использованы результаты исследования с долей личного участия диссертанта 80-90%.
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 145 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы (1 глава), главы «Объекты и методы исследования», экспериментальной части (3 главы), общих выводов, списка литературы, приложения. В тексте содержится 31 таблица, 73 рисунка. Список цитируемой литературы включает 153 источника, из них 37 – на иностранных языках.
