Введение к работе
Актуальность. Несмотря на устойчивый интерес к эмбриогистотерапии с начала прошлого века и по настоящее время, накопленный многолетний клинический опыт и широкий спектр применения клеточной терапии (В.Г Бруслик, 1975; ВС. Репин, 1998, ГЕ Островерхое, 1982 и др), многие закономерности ее влияния на организм реципиента остались мало изученными Об этом свидетельствуют неоднородность клинических данных при использовании эмбриогистотерапии, неодинаковые, иногда противоположные результаты клинической эффективности При этом не вызывает сомнения необходимость использования эмбриогистотерапии и как самостоятельного метода лечения, и, особенно, в трансплантологии, как метода, предшествующего трансплантации органов
Применение трансплантации эмбриональных тканей в трансплантологии обусловлено тем, что она эффективно корригирует метаболические дефекты, а также является "мостом" к пересадке печени (I J. Fox et al, 1998, S P Horslen et al, 2003; R R Mitry et al, 2004) Фетальные ткани обладают высоким пластическим потенциалом, связанным с большим содержанием бластных клеток, способных к росту, миграции и образованию новых межклеточных связей В эмбриональных тканях значительно снижено количество зрелых иммунокомпетентных клеток, отсутствует видовая специфичность, так как в 1 и 2 триместрах гестации еще не экспрессированы белки гистосовместимости I и II класса (А С Брюховецкий, 1993, А.П Милованов с соавт, 2006). Они содержат большое количество регуляторних веществ, стимулирующих и ограничивающих пролиферацию клеток (Д В Бузник, 1992, М Gieissner et all, 1997, Ю Н Лебедева, 2001)
Установлено, что ростовые факторы фетальных тканей способны обеспечивать выживание и (или) стимуляцию регенерации поврежденных тканей рецепиента, стимулируют функции аналогичного органа реципиента (В И Шумаков, 1981, AM Stefan, 1999, N Kobayastu, 2000, BE Рябинин, 2002; H Nagata, 2003, А А Рунович, 2005) Сейчас разработаны биомедицинские технологии лечения с помощью трансплантации эмбриональной ткани печени (ЭТП) таких заболеваний как атеросклероз, онкозаболевания печени (А М Esch et al, 2005), ферментопатии (I J Fox et al., 1998, M Muraca et al, 2002 E M. Sokal et al, 2003, S P Horslen et al, 2003; R R Mitry et al, 2004, G Ambrosmo et al , 2005), острая печеночная недостаточность (В Е Рябинин, 2002, A Dhawan et al, 2004, A A Khan et al, 2004), а также экспериментальный цирроз печени (А М Stefan et al, 1999, N Kobayashi, 2000, H Nagata, 2003)
Исследование корригирующего влияния трансплантации ЭТП при различных типах поражения печени открывают возможности для сравнительного анализа общих и специфических закономерностей влияния ЭТП на структуру печени Учитывая, что ЭТП содержит как стимуляторы, так и ингибиторы пролиферации, необходимо выяснение вопроса, в каких условиях проявляется преимущественно тот или иной эффект Подобных работ в литературе не обнаружено, хотя это имеет решающее значение для определения сроков и режимов проведения эмбриогистотерапии и получения максимального клинического эффекта
У"
Цель работы. Выявить гепатотропные корригирующие эффекты ксенотрансплантации эмбриональной ткани печени в условиях иммобилизационного стресса и интоксикации этиленгликолем
Задачи:
Определить структурные критерии и отличительные особенности альтерации и процессов репарации печени при иммобилизационном стрессе и интоксикации этиленгликолем.
Исследовать влияние ранней ксенотрансплантации эмбриональной ткани на структуру печени крыс при интоксикации этиленгликолем и при иммобилизационном стрессе.
3) Выявить гепатотропные корригирующие эффекты ксенотрансплантации
эмбриональной ткани печени, проведенной в поздние сроки интоксикации
этиленгликолем и иммобилизационного стресса
Научная новизна. Установлено негативное влияние на структуру печени ранней эмбриогистотерапии, проведенной в период действия альтерирующих факторов - через 6 часов после интоксикации этиленгликолем и через 2 часа после окончания иммобилизации Показано, что ранняя трансплантация эмбриональной ткани печени усиливает осмотическое повреждение и некротизацию гепатоцитов, ослабляет их способность к выживанию и восстановлению, что приводит к усугублению альтерации печени и замедлению репаративных процессов
Доказано гепатотропное корригирующее влияние отсроченной трансплантации эмбриональной ткани печени, проведенной в конце вторых суток после иммобилизации и интоксикации этиленгликолем, которое проявляется уменьшением некротизации паренхимы печени, стимуляцией коллагеногенеза и пролиферации гепатоцитов
Выявлены основные гепатотропные корригирующие эффекты отсроченной трансплантации эмбриональной ткани печени в условиях иммобилизационного стресса и интоксикации этиленгликолем, которые выражаются в мембранопротекторном и вазопротекторном действии, стимуляции пролиферации гепатоцитов, сохранении функциональной активности клеток Купфера и активации коллагеногенеза
Сравнительный анализ гепатотропного влияния ксенотрансплантации эмбриональной ткани, проведенной в разные сроки развития иммобилизационного стресса и интоксикации этиленгликолем, доказал, что эффективность корригирующего действия эмбриональной ткани печени определяется преимущественно сроками проведения трансплантации и, в меньшей мере, типом повреждения
Теоретическая и практическая значимость На основе экпериментальных данных доказано гепатотропное корригирующее действие и выявлен ряд протекторных и стимулирующих эффектов отсроченной трансплантации эмбриональной ткани печени в условиях иммобилизационного стресса и интоксикации этиленгликолем Определен оптимальный срок проведения трансплантации эмбриональной ткани печени, которым является временной период патологического процесса, характеризующийся прекращением или ослаблением
действия альтерирующих факторов и началом естественной активации восстанови гельных процессов
Полученные результаты дают основание рекомендовать применение трансплантации эмбриональной ткани с целью коррекции нарушений печени, вызванных стрессом и интоксикацией этиленгликолем, после ослабления острых явлений альтерации
Основным типом альтерации печени при стрессе является диффузное осмотическое повреждение гепатоцитов (гидропическая и баллонная дистрофия), а при интоксикации этиленгликолем преобладают метаболические нарушения, проявляющиеся диспротеинозом, гиалиново-капельной дистрофией, формированием очагов матово-стекловидных гепатоцитов.
Ксенотрансплантация эмбриональной ткани печени, совпадающая по времени с альтерирующим действием стресса и токсическими эффектами этиленгликоля, усиливает дистрофические и некротические процессы, снижает репаративный потенциал гепатоцитов, усугубляя нарушение структуры печени и замедляя ее восстановление
3 Отсроченная ксенотрансплантация эмбриональной ткани печени,
проведенная в период ослабления острых явлений повреждения и начала
репаративных процессов, оказывает эффективное корригирующее воздействие,
проявляет мембранопротекторный и вазопротекторный эффекты, сохраняет
функциональную активность клеток Купфера, стимулирует пролиферацию
гепатоцитов, активирует коллагеногенез, таким образом, ускоряет восстановление
паренхимы и стромы печени
Апробация полученных результатов. Результаты исследований опубликованы в 5 работах, 3 из них в изданиях, рекомендуемых ВАК РФ, и доложены на VII конгрессе с международным участием «Паллиативная медицина и реабилитация» (Красноярск, 2005), на расширенном заседании кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии ИГМУ (2007), на заседании проблемной комиссии ИГМУ «Морфология, физиология и общая патология» (2007)
Структура и объем работы. Диссертация изложена на 158 страницах по традиционному плану, включает введение, обзор литературы, описание материалов и методов исследования, изложение собственных результатов, обсуждение результатов, выводы, список литературы из 251 источников (149 на русском языке, 102 иностранных) Полученные результаты представлены в 5 таблицах и иллюстрированы 104 рисунками в виде графиков, диаграмм, микрофотографий
