Введение к работе
, „..J'"I
Микоплазмы - прокариотические организмы, широко распространенные в природе. Таксономически микоплазмы вьщелены в класс Moincutes. В отличие от бактерий, клетки микоплазм окружены только цитоплазнатической мембраной, то есть лишены клеточной стенки и не способны синтезировать ее биохимические предшественники. Все микоплазмы являются симбионтами или паразитами человека, животных или растений.
Актуальность исследования. Б связи с относительной простотой организации, клетки микоплазм представляют собой объекты, чрезвычайно привлекательные для молекулярной биологии. Интерес к микоплазмам определяется также практической необходимостью - представители семейств
Mycoplasmataceae И Acholeplasmataceae КЛЗССа Mollicutes
играют существенную роль в патологии человека, сельскохозяйственных животных, в том числе птиц, а
Представители СеМеЙСТВа Spiroplasmataceae - В ПЭТОЛОГИИ
растений и насекомых. Микоплазмы являются контаминантами клеточных культур, в частности культур-продуцентов биологически активных веществ на биотехнологических производствах. Микоплазмы часто сопутствуют вирусным и бактериальным инфекциям. У людей и животных микоплазмы поражают слизистые оболочки респираторного и урогенитального трактов, вызывая хронические воспалительные процессы и иммунодеФицитные состояния.
РЯД ПаТОГеННЫХ МИКОПЛаЗМ (М. gallisepticum, И. pneumoniae, М. genital ium. И Другие) ОбЛЭДЭеТ СКОЛЬЗЯЩеЙ ПОДВИЖНОСТЬЮ, МЄХаНИЗМ КОТОРОЙ ДО СИХ ПОр Не ЯСЄН. М. pneumoniae,
возбудитель первичной атипичной пневмонии человека, вызывает по эпидемиологическим наблюдениям от 3 до 10% острых респираторных заболеваний, н. gain sept icum. - распространенный возбудитель респираторного микоплазмоза домашних птиц. Эта миноплазма способна поражать дыхательные пути и яйцеводы кур и индеек, передаваясь потомству через яйца. Заболевания,
вызываемые м. gainseptic-um, как правило не приводят к массовой гибели птиц, но резко снижают скорость их роста, увеличивают потребление кормов и снижают качаство продукции птицефабрик, что выражается для крупных хозяйств в больших экономических потерях. Отличительная черта этих патогенных микоплазм - наличие специализированных концевых клеточных структур.
Естественно предполагать, что в организации клеток. Форма которых отличается от сферической, и к тому же обладающих подвижностью, должны принимать участие внутренние цитоскелетные структуры, подобно тону, как это известно для клеток эукариот.
Цель и задачи исследования. Цель настоящей работы -
Изучение ПОВерХНОСТНЫХ ИММуНОГеНОВ M.gallisepticxim. И ПОИСК
белков, аналогичных белкам цитоскелета эукариот. Задачи работы состояли в следующем:
1. ИйМуНОЛОГИЧеСКИЙ анализ беЛКОВ M.gallisepticwn. с помощью
антител к тубулину эукариот.
-
Электронномикроскопическое исследование внутриклеточных структур микоплазмы.
-
Поиск возможной связи между выявленными тубулярными структурами и мембранными белками, экспонированными на
ПОВерХНОСТИ КЛеТКИ M.gallisepticxim..
4. Сравнение разных штаммов M.gainsepticvm по электроФорети-
ческим свойствам поверхностных иммуногенов и спектрам
рестриктазных Фрагментов ДНК.
Научная новизна работы. Впервые показано, что в клеточных ЭКСТраКТаХ Mycoplasma gallisepticxim (прОКарИОТИЧеСКОГО
организма) присутствует 40 кДа белок, специфически связывающий антитела против тубулинов эукариот. Методом иммунной электронной микроскопии показано, что этот белок входит в состав цитоплазматических тубулярных структур.
Показано, что сильные иммуногены различаются у разных
ШТаММОВ M.gallisepticxim. ПО ЗЛЄКТр0Ф0рвТИЧЄСК0Й ПОДВИЖНОСТИ.
Эпитопы этих белков локализованы на поверхности клеточной мембраны.
Получены результаты, позволяющие предполагать наличие связи (in situ) между сильным поверхностным иммуногеном и тубулиноподобным белкой. Сделана рекострукция пространственного расположения тубулярных структур в микоплазменной клетке и предложена гипотетическая схема
ДВИЖеНИЯ КЛеТКИ М. gallisepticxun.
Научно-практическая ценность работы. Полученные результаты дополняют сведения об элементах цитоскелета микоплазм, мембранной организации поверхностных иммуногенов
М. gallisepticxtm. И ПОЗВОЛЯЮТ раЗВИВЭТЬ ПреДСТЭВЛеНИЯ О
механизмах скользящего движения прокариот.
Апробация работы. Материалы диссертации были представлены на viii Конгрессе Международной Организации Микоплазмологов (Стамбул, 1990), на Всесоюзной конференции "Функциональная морфология клетки" (Санкт-Петербург, 1991) и на совместном семинаре лабораторий структурной организации генома, биохимических основ репродукции клетки и отдела клеточных культур Института цитологии Российской Академии Наук (Санкт-Петербург, 1992).
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на
Похожие диссертации на Мембранные белки-иммуногены и тубулиноподобный белок микоплазмы (MYCOPLASMA GALLISEPTICUM)
