Введение к работе
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Селективная регуляция пролиферации различных ' категорий иммунокомпетентных клеток представляет собой одну из основных задач иммунокорригирущей терапии. В настоящее время препараты, обладающие антипролиферативным действием, широко используются в клинической практике.
Ранее было показано, что пептид-фрагмент молекулы интерферо-на-а2 (ИФН-а2) человека со 124 по 138 аминокислотные остатки (названный 2438) обладает биологической активностью: данный пептид, также как и нативная молекула ИФН, подавляет индуцированный под действием митогена лролиферативный ответ Т лимфоцитов периферической крови человека in vitro (Dartilkovich et. al., 1992).
В противоположность ИФН, пептид 2438 не проявляет антивирусной активности' (Shevalier et. al., 1990) и не влияет на активность естественных кллерных клеток (Danilkovich et. al., 1992). Таким образом, .данный пептид обладает более узким, чем ИФН спектром биологической активности. Использование синтетических пептидов является одним из подходов к изучению структурно-функциональной организации молекулы ИФН. Кроме того, такие биологически активные пептиды можно рассматривать как потенциальные препараты для применения в клинике.
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Целью данной работы являлось изучение биологической активности синтетических пептидов-аналогов ранее обнаруженного пептида 2438, которые короче на 1-3 аминокислотных остатка с NHg-Konua, в модельных системах in vitro.
Экспериментальные задачи исследования:
1. Выявить среди исследуемых пептидов - фрагментов молекулы
ИФН-ой человеїсз те, которые обладают биологической активностью и
изучить их влияние на:
а. пролиферативный ответ лимфоцитов периферической крови чело
века, индуцированных поликлональным активатором;
б. Интерлейкин-2 (ИЛ-2)-зависимый путь активации Т лимфоцитов;
в. пролиферативный ответ лимфобластоидных клеточных линий
человека с анализом распределения клеток по клеточному циклу.
2. Определить наличие специфических пептидных рецепторных
структур на мембране лимфобластоидных клеточных линиий человека
и определить параметры связывания'биологичеки-активных пептидов
с данными структурами.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ. Впервые показано, что синтетические пептиды - фрагменты молекулы ИФН-а2 со 126, 126 и 127 по 138 аминокислотные остатки (2536, 2638 и 2738) подавляют пролиферацию активированных конканавалином А (КонА) лимфоцитов периферической крови человека и ингибируют ИЛ-2-зависимую пролиферацию лимфоцитов. Данные пептиды подавляют пролиферацию лимфобластоидных клеточных линий человека МГ4 и СЕМ, оказывая влияние на
"-2-
распределение клеток по фазам клеточного цикла, и действие пептидов зависит от их длины.
Показано, что биологически активные пептиды 2538'; 2638 и 2738 специфически взаимодействуют с рецепторними структурами на поверхности клеток линий МТ4 и СЕМ и аффинность связывания коррелирует с длиной пептидов и их биологической акт івностью.
ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ И ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ РАБОТЫ. Данные пептиды-фрагменты молекулы ИФН-сс2 человека, обладающие узким спектром действия, могут быть использованы при изучении механизмов активации, пролиферации и дифференцировки по крайней мере лимфоидных клеток. Понимание этих процессов приведет к возможности их селективной регуляции при различных патологических состояниях. Полученные в результате таких исследований данные могут быть использованы при конструировании молекул ИФН с заранее определенными свойствами. Кроме того, изучаемые биологически активные синтетические пептиды могут рассматриваться как потенциальные антипролиферативные препараты для использования в медицине.
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Материалы диссертации докладывались' на заседании кафедры клеточной физиологии и иммунологии Биологического факультета МГУ, на семинаре лаборатории клеточной инженерии Института вирусологии РАМН и на межлабораторном семинаре НЖЭК КНЦ РАМН.
ПУБЛИКАЦИИ. По материалам диссертации опубликовано 2 печатные работы.
СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ. Диссертация состоит из введения, обзора литературы,. материалов и методов, результатов, обсуждения результатов,, выводов и списка цитируемой литературы (123 ссылки). Работа изложена на 94 страницах- машинописного текста, содержит 1 таблицу и 14 рисунков.
