Введение к работе
Актуальность тема. Заболевания, в основе которых лежит атеросклероз, являются наиболее частыми причинам,, инвалидности и смертности во многих странах мира. Выяснение причин атеросклероза представляется одним из основных вопросов медицины и позволит избежать существенных экономических и социальных потерь.
Изучение организации генов аполипопротеидов, где локализована значительная часть атерогенных мутаций, представляется- актуальным как с точки зрения нахождения генетических маркеров атеросклероза, так и для. расшифровки генных механизмов развития атеросклеротических поражений коронарных артерий. В настоящее время одним из подходов к решению этой научной проблемы представляется путь анализа рестрикционного полиморфизма ДНК с целью поиска связи полиморфных аллелей с важными показателями липидно-го обмена, например, такими как обший холестерин, триглицериды, липопротеиды различной плотности и некоторые аполипопротеиды, и т. д., с гиперлипопротеинемиями, а также с атеросклерозом, и его клиничесгаши проявлениями в виде ИБО и инфаркта миокарда. При этом полиморфные аллели выступают в качестве генетических маркеров атеросклероза. С помощью генетических маркеров можно осуществлять оценку повышения риска заболевания для конкретного индви-диуума на очень ранних вплоть до пренатальной, стадиях развития. Такое заболевание, как атеросклероз, может быть гетерогенным с разными полигенными детерминантами, оказывающими действие в разных географических местностях. Поэтому, необходимы широкие исследования в разных мировых популяциях по выявлению полиморфных маркеров атеросклероза, которые могут быть специфичными для каждой конкретной популяции.
Цель и задачи исследования. Целью работы являлось выявление в популяции Москвы полиморфных по рестриктазам SacI, PstI, PvuII и KfepI аллелей генного кластера AI-CIII-AIV и поиск их возможной связи с рядоы важных показателей липидного обмена, с гиперлипопротеинемиями и, таким образом, с риском развития атеросклероза. При этом'ставились следующие основные задачи:
разработать простой метод регистрации полиморфизмов на генном кластере A1-CIII-AIV путем амплификации методом ПНР с последующей рестрикцией;
провести анализ популяционных частот аллелей изучаемых полиморфных локусов генного кластера AI-CIII-AIV; , .
- исследовать возможную связь рассматриваемых полиморфных
аллелей с такими показателями липидного обмена как общий колес-
- г -терин, триглицериды, ХС ЛПВП, аполипопротеиды AI и В, величина
ОТНОШеНИЯ B/AI;
исследовать, имеется ли корреляция между наличием изучаемых редких полиморфных аллелей и типами гиперлипопротеинемии, при которых наиболее велика вероятность развития атеросклероза;
провести сравнение частот редких полиморфных аллелей в группе больных атеросклерозом коронарных артерий и контрольной группе.
Научная новизна работы. В ходе данной работы исследована связь полиморфных по рес'триктаэам Mspl, SacI, PstI, PvuII аллелей генного кластера АІ-СПІ-AIV о широким набором липидных показателей в популяции Москвы. Кроме того, произведена оценка корреляции между присутствием редких полиморфных аллелей и наличием гиперлипопротеинемии На, Пб, IV типов и атеросклероза коронарных ' артерий. ' Разработан ' простой и довольно быстрый метод регистрации полиморфизмов на генном кластере АІ-СПІ-AIV с использованием полимераэной цепной реакции с последующей рестрикцией. Тем самым, раэравотан новый способ маркирования 11-той хромосомы по четырем локусам, который может быть использован в разнообразных генетических исследованиях, связанных с изучением сцепления при генетиеском картировании. Предложенный подход иск-' лючает трудоемкие процедуры блот-гибридиэации и изотопного мече-ния, используемые в традиционном подходе, основанном на ПДРФ.
Практическая ценность работы. Данные, полученные в ходе работы, позволяют оценить вклад определенных аллелей в повышение риска развития атеросклероза. Исследования в этом направлении и обобщение полученных'результатов в перспективе могут привести к нахождению генетических маркеров атеросклероза и обнаружению основных этиологических локусов заболевания. Кроме того, разработанный метод выявления полиморфизмов на генном кластере АІ-СГІI-AIV с помощью ІЩР, являющийся новым способом маркирования 11-той хромосомы, может быть использован в различных генетических исследованиях. *' ' '
Апробация работы. Материалы диссертации докладывались на 2-ом Всесоюзном симпозиуме "Теоретические и прикладные аспекты молекулярной биологии" ( Самарканд, 1991); на межлабораторном семинаре в БНЦ молекулярной диагностики и лечения (Москва, 1992).
. -_3_- .... --
