Введение к работе
Актуальность проблемы. Полиреактивность иммуноглобулинов является широко известным явлением, характерным как для естественных, так и для искусственно полученных антител. Многие моноклональные антитела при исследовании с неродственными антигенами оказываются олиго- и даже полиспецифичными. Описано несколько механизмов полиреактивности иммуноглобулинов - лабильность антигенсвязывающих центров, образование димеров в случае смесей антител, полученных от тысяч доноров, действие факторов, дестабилизирующих белки, и обмен IgG4 HL-фрагментами. Получение биспецифичных моноклональных терапевтических иммуноглобулинов является актуальной задачей молекулярной иммунологии. Полиреактивность также описана и для искусственно полученного мультикаталитического антитела, гидролизующего ДНК, РНК и казеин. Полиреактивность природных абзимов к настоящему времени изучена недостаточно. Молоко человека представляет собой уникальный источник каталитически активных антител (абзимов), которые гидролизуют разнообразные субстраты и обладают уникальными синтетическими активностями.
Целью настоящей работы было изучение природы полифункциональности иммуноглобулинов классов G и А молока человека. Для достижения данной цели необходимо было решить следующие задачи:
-
Исследовать каталитические активности IgG и slgA молока человека, обладающих различным сродством к ДНК, АТР, казеину, липидам молока, а также различной гндрофобностью, в гидролизе ДНК, олигосахаридов, АТР, фосфорилировании казеина и прочно связанных с иммуноглобулинами липидов и олигосахаридов.
-
Выяснить, присутствуют ли в молоке человека каталитически активные IgG и slgA, содержащие одновременно легкие цепи двух типов. Выяснить возможность обмена HL-фрагментами (половинами молекул) среди подклассов IgG (IgGl-IgG4) молока человека.
-
Исследовать in vitro возможность обмена HL-фрагментами или другими структурными компонентами между различными молекулами IgG, а также между молекулами slgA молока человека.
Научная новизна и практическая ценность работы. В работе впервые показана каталитическая полифункциональность Ig молока человека, обладающих высоким сродством к ДНК, АТР, казеину, липидам молока, и активных в гидролизе ДНК, АТР, олигосахаридов, фосфорилировании казеина, липидов и олигосахаридов. Впервые показано, что в молоке человека существуют химерные AT, содержащие одновременно легкие цепи типа каппа (к) и лямбда (к), причем такие IgG представлены всеми подклассами (IgGl-IgG4). Показано, что в присутствии плазмы молока, лишенной AT и восстановленного глютатиона (GSH) IgG молока обмениваются HL-фрагментами, a slgA HL- и/или (НЬ)2-компонентами, но не свободными легкими (L) или тяжелыми (Н) цепями.
Публикации и апробация работы. По материалам диссертации опубликовано 4 печатные работы. Результаты были представлены на конференциях - «Студент и научно-технический прогресс» (НГУ, Новосибирск, 2007, 2008, 2010), XII Всероссийская медико-биологическая конференция «Фундаментальная наука и клиническая медицина» (Санкт-Петербург, 2009), «Медицинская геномика и протеомика» (Новосибирск, 2009), «Фундаментальные науки — медицине» (Новосибирск, 2010).
Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, результатов и их обсуждения, выводов и списка цитированной литературы. Работа изложена на 116 страницах, содержит 31 рисунок, 1 таблицу. Библиография включает 290 литературных источников.
