Введение к работе
Актуальность темы. Известно, что у человека и различных видов животных
потребление богатой холестерином пищи приводит к развитию
пшерхолестеринемии (Чазов,1982; Климов и соавт..1984; Перова, 1987) В то жо
время установлено, что у одних индивидуумов в ответ на пищевую нагрузку
холестерином развивается выраженная гиперхолестерипемия
(гиперреак-ппшые іпідивидуумьі), в то время как другие (гипореактивные)
являются устойчивыми к ее развитию. Такая гетерогенность была показана
как на кроликах, других видах животных, так и на человеке (Roberts et а).. 1974;
Katan et al.,1986). В исследованиях, проведенных в последнее время, изучались
основные механизмы, лежащие в основе явления гипо — и гнперреактивности:
а) эффективность всасывания холестерина в кишечнике; б) способность к
компенсации избыточного поступления холестерина за счет подавления его
биосинтеза; в) экскреция холестерина печенью в составе желчи; г) рецетггор —
опосредованный захват липопротеидов низкой плотности (ЛНП) плазмы крови
(Beynen et al.,1987). Результаты этих исследований не позволили сделать
однозначных выводов о том, какие из механизмов и в какой степени
определяют устойчивость к пищевой нагрузке холестерином. Наличие
косвенных данных позволяет высказать предположение, что стимуляция
окисления холестерина в желчные кислоты и их последующая зкекреция с
желчью может являться одной из основных причті устойчивости
гипореактивных индивидуумов к развитию алиментарной
гиперхолестеринемии. Однако на уровне клеток печени это предположение до сих пор не нашло своего подтверждения.
Поскольку низкий уровень синтеза желчных кислот при пищевой нагрузке холестерином может прігводить к развитию гиперхолестеринемии, то возникает необходимость поиска фармакологических препаратов, способных в
печени стимулировать окисление холестерина в желчные кислоты. Некоторые
косвенные данные указывают на то, что пробукол — известный
гиполипидемический препарат с антиоксидантными свойствами — может
стимулировать этот процесс, однако убедительные доказательства этого еще не
получены (Miettinen,1972). До сих пор остаются до конца неизученными
механизмы действия пробукола. Б последнее время высказываются
предположения, что в основе гиполипидемического и
антиатеросклеротического эффекта пробукола лежит его влияние на систему обратного транспорта холестерина (Yamamoto et al.,1988). Поскольку пробукол является антиоксидантом, то его эффект на метаболизм холестерина было бы шітересно сравнить с эффектом другого лшюфилыюго антиоксиданта — а — токоферола, а также соединениями нового класса природных и синтетических антиоксидантов — производных полигидроксинафтахинона (ПГНХ). Цель и задачи исследования. Цель настоящей работы состояла в исследовании некоторых параметров метаболизма холестерина в гепатоцитах кроликов с различной чувствительностью к пищевой нагрузке холестерином, а также изучение влияния некоторых антиоксидантов на метаболизм холестерина и лшгядов на модели первичной культуры гепатоцитов кролика. В задачи исследования входило:
1) изучить липидный состав, секрецию лштидов в составе ЛОНП, секрецию
аполипопрогеина (апо) Е, продукцию желчных кислот в культивируемых
гепатоцитах кроликов с различной чувствительностью к развитию
алиментарной гиперхолестеринемии;
2) изучить влияние антиоксидантов — пробукола, а—токоферола и
производных ПГНХ на синтез холестерина и желчных кислот, секрецию апоЕ
и захват ЛВПо.
Научная новизна работы, В работе впервые было показано, что в гепатоцитах пшореактивных кроликов синтез желчных кислот значительно выше, а секреция холестерина и его эфиров в составе ЛОНП ниже по — сравнению с гепатоцитами гиперреактивных животных. Результаты работы указывают на то, что в основе устойчивости к пищевой нагрузке холестерином пшореактивных кроликов может лежать относительно высокая скорость синтеза желчных кислот в гепатоцитах. С другой стороны феномен гаперреактивности связан с увеличением продукции ЛОНП печенью. Показано, что пробукол, а —токоферол и пістохром — одно из производных ПГНХ стимулируют синтез желчных кислот культивируемыми гепатоцитами. При этом впервые установлен один из механизмов стимуляции пробуколом синтеза желчных кислот на уровне клеток печени.
Теоретическое и практическое значение работы. Полученные результаты показывают, что основным механизмом поддержания нормального содержания холестерина в плазме пшореактивных кроликов является относительно высокая скорость его окисления в желчные кислоты. Снижение способности к стимуляции синтеза желчных кислот гепатоцитами гиперреактивных кроликов в .условиях избыточного поступления шпцевого холестершш приводит к накоплению в печени холестерина в виде его эфиров. Гепатоциты гиперреактивных животных избыток холестерина выводят путем увеличения секреции холестерина и его эфиров в составе ЛОНП.
Исследование влияния пробукола на метаболизм холестерина позволило установить один из возможных механизмов пшолипидемического эффекта пробукола на уровне клеток печени, при котором пробукол в терапевтических концентрациях стимулирует синтез апоЕ. Секретированный печенью апоЕ связывается с ЛБП2 плазмы, что приводит к увеличению рецептор — опосредованного захвата этих липопротеидов печенью и последующей
стимуляции синтеза желчных кислот. Гистохром стимулирует синтез желчных кислот подобно пробуколу, в то время как а —токоферол активирует этот процесс по —видимому за счет увеличения пула сіє novo синтезированного холестерина. Установленный факт, что гистохром может выступать в качестве стимулятора сшітеза желчных кислот позволяет говорить о перспективности использования этого гштиоксидакта в качестве гиполипидемического средства. Апробация работы. Научные результаты представленные в диссертации были доло»кены на 57 —й (Лиссабон, 1991), 59 —й (Ницца, 1992), 62 —й (Иерусалим, 1993) конференциях Европейского Общества по изучению атеросклероза, на 7 —ом Международном симпозиуме по лішопротеидам и атеросклерозу (Дрезден, 1991). Диссертация апробирована на межлабораторном семинаре в Кардиологическом научном центре РАМН (Москва, 1993).
Структура и объем работы. Диссертация состоит из разделов: "Введение", "Обзор литературы", "Заключение", "Материалы и методы", "Результаты", ' Обсуждение результатов", "Выьоды" и "Список литературы". Объем работы 118 страниц машинописного текста, она содержит 7 рисунков и 12 таблиц. Список литературы включает 181 наименование.
Похожие диссертации на Метаболизмы холестерина в культивируемых гепатоцитах кроликов с различной чувствительностью к развитию алиментарной гиперхолестеринемии
