Введение к работе
Актуальность темы. Димефосфон представляет собой диметиловый гр 1,1-диметил-З-оксобутялфосфоиовой кислоты, синтезированный А.О. $елем под руководством Б.А. Арбузова в ИОФХ им. А.Е. Арбузова )бузов Б.А. и др., 1968).
Препарат обладает широким спектром терапевтического действия. Он >являет антидотный эффект при отравлении ингибиторами холинэстера-(Гараев Р.С., Студенцова И.А., 1968), эффективно применяется при партии нервной системы для нормализации мозгового кровообращения и іьішения устойчивости ткани к гипоксии (Студенцова И.А. с соавт., »5; Данилов В.И. с соавт., 1996 и др.), оказывает кардиопротекторное іствие (Латфуллин И.А., 1985), нормализует функции вегетативной івной системы (Исмагилов М.Ф. с соавт., 1986), обладает иммуностиму->ующей активностью (Цыремпилов П.Б., 1987; Зернов И.Н., Володина 5., J 988; Курбанов Р.З., 1992), проявляет стресспротективные свойства іфизьянова Р.Х., 1991), используется при лечении бронхиальной астмы и іерреактивности бронхов (Святкина О.Б. с соавт., 1989), имеет выражен-й противовоспалительный эффект с подавлением хемотаксиса нейтронов (Зиганшина Л.Е. с соавт., 1996; Цибулькина В.Н., 1996), оказывает )тивосудорожное действие (Студенцова И.А., Гараев Р.С., 1969), а также іавляет секрецию соляной кислоты париетальными клетками желудка ібулькина В.Н. с соавт, 1995).
Тем не менее, существующие представления о механизмах действия -іефосфона не обладают универсальностью. Актуальным является поиск санизма, объясняющего если не все, то многие наблюдаемые эффекты іпарата. Углубление изучения механизма действия димефосфона важно [ обоснования расширения сферы клинического применения препарата и >еделения новых направлений в исследовании его биологических эф-стов. Материал, изложенный в диссертации, получен в исследованиях, вших продолжением совместных работ с проф. В.Н. Цнбулькиной и ». Ибрагимовым, предположивших возможность наличия у препарата агонизма кальцийзависимым звеньям внутриклеточной передачи акти->ующего сигнала.
Для выяснения ведущих механизмов действия димефосфона в наших :ледованиях в качестве клеточной модели были выбраны тромбоциты.
2 Их агрегация, воспроизводившаяся на фоне стимуляции различными ш цукторами, рассматривалась как стандартный пример клеточной актив ции. Важным фактором выбора модели агрегации тромбоцитов послужш наличие у изучаемого препарата антиагрегационного действия (Еналееі Д.Ш., 1981; Мороков B.C., 1988; Фазылов В.Х, 1995; Цибулькина В.Е 1997).
Цель исследования - на модели антиагрегационного действия дим фосфона на тромбоциты раскрыть механизмы реализации влияния преп рата на универсальные процессы клеточной активации.
Задачи исследования: 1. В прямых исследованиях оценить особенности изменения концентрації
внутриклеточных ионов кальция как фактора, определяющего характе
антиагрегационного действия димефосфона. I. Изучить возможность подавления димефосфоном клеточной активаци
через влияние на системы внутриклеточных, посредников. 3. Исследовать особенности тромбоцитарной активации при взаимодейс
вии димефосфона с соединениями, обладающими свойствами усилена
трансмембранного тока ионов кальция или снижения его внутриклето'
ного содержания за счет комплексообразования. \. Изучить влияние выявленных универсальных механизмов антиагрег
ционного действия димефосфона на особенности клеточного взаимі
действия в системе «тромбоцит - эндотелиальная клетка».
Научная новизна. Проведено углубленное исследование универсал: 1ых механизмов действия димефосфона на модели активации тромбоці :ов с использованием расширенного комплекса индукторов их агрегаци: Доказано отсутствие прямой связи антиагрегационного эффекта препараї : изменениями в системе аденилатциклаза - цАМФ. Исключена возмо>; юсть реализации терапевтического действия препарата через звено ци: юоксигеназного метаболизма арахидоновой кислоты.
Впервые доказано, что в основе воздействия препарата на процесс легочной активации лежит его способность модулировать движение in юв кальция через клеточные мембраны.
Впервые исследованы механизмы действия димефосфона в ко? шексной системе взаимодействующих компонентов: сосудистый эндот [ий - тромбоциты.
Практическая значимость. Влияние димефосфона на универсальнь: іеханизм клеточной активации - трансмембранный перенос ионов кальці
^следующим изменением его внутриклеточной концентрации - опреде-г широту клинического применения препарата.
Способность димефосфона подавлять кальцийзависимые процессы точной активации позволит прогнозировать еще не выявленные эффек-з области клинического применения препарата.
Выявление разнонаправленных эффектов действия препарата в ком-ксных клеточных системах предполагает проведение клинических поганий с формированием оптимальных схем применения димефосфона с ью получения максимального клинического эффекта.
Положения, выносимые на защиту, дтиагрегационное действие димефосфона реализуется за счет влияния репарата на один из универсальных механизмов клеточной активации -одержание ионизированного внутриклеточного кальция. Торможение величения внутриклеточной концентрации ионов кальция в ответ на іДФ определяет подавление агрегации тромбоцитов, егуляция димефосфоном системы внутриклеточного кальция реализу-тся на уровне непосредственного влияния препарата на функциониро-ание кальцийтранспортирующих систем.
> системе эндотелий - тромбоциты антиагрегационное действие диме-юсфона может нивелироваться под влиянием подавления выработки эн-отелием гуморальных кальцийзависимых факторов с антиагрегацион-ой активностью.
Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на чно-практической конференции «Актуальные проблемы кардиологии» зань, 1995); II республиканской научной конференции молодых ученых и циалистов (Казань, 1996); Республиканской научно-практической конфе-ции «Новые методы диагностики и лечения» (Казань, 1996); Российской ференции «Фармакология и токсикология фосфорорганических и других логически активных веществ» (Казань, 1996); научных конференциях [одых ученых Казанской государственной медицинской академии (1997, 8); V Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» >сква, 1998); заседании сотрудников кафедры биохимии Казанского госу-ственного университета (1998).
Внедрение результатов исследования. Основные положения диссер-ии внедрены и используются в учебном процессе на кафедре клиниче-
4 :кой иммунологии с аллергологией, а также на кафедре фармакологии Ка анского государственного медицинского университета.
Публикации, По теме диссертации опубликовано 11 научных работ.
Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзор штературы, описания материалов и методов исследования, трех глав соЄ лвенных исследований, обсуждения результатов, выводов, практически рекомендаций и указателя литературы (90 отечественных и 169 инострат тх источников). Работа объемом 132 страницы включает 23 таблицы иллюстрирована 10 рисунками.
