Введение к работе
Актуальность проблемы. Выяснение структурной организации компонентов нервной системы является одной из основных, задач молекулярной нейробиологии. Большой интерес представляют рецепторы, взаимодействующие с эндогенными и экзогенными пептидамп-нейромо-дуляторами. В группу эндогенных-пептидов-нейромодуляторов входят соединения, играющие ключевую роль в регуляции таких физт-злоги-ческих реакций мозга как сон, эмоции, память. Эти соединения оказывают на нервную систему воздействия, природа которых в большинстве случаев остается невыясненной. Наиболее благоприятна в этом отношении ситуация с веществом P(SP): этот ундехапептид является одним из наиболее вероятных кандидатов на роль пептидного нейропередатчика и участвует в проведении болевых сигналов.
Сходную с SP структуру и фармакологический спектр действия имеют нейрокинины А и В (NKA и NKB), обнаруженные в мозге млекопитающих, а также целая группа пептидов из иных источников (эле-доизин, физалеймин и др.). Эти пептиды получили название тахики-нинов, так как все они вызывают быстро наступающие сокращения гладкомышечной ткани.
Рецепторы тахикининов обнаруже:ш в нервной системе млекопитающих. В мозге, периферических органах и тканях они присутствуют в крайне малых количествах. В их изучении в последнее время- достигнут значительный прогресс благодаря применению генно-инженерных методов. Впервые для нейропептидных рецепторов установлены нуклеотидные последовательности генов белков, связывающих SP и NKA, и на основе анализа первичной структуры предложены модели укладки полипептидных цепей в мембрана. Однако дляподтверждения этих моделей, для выяснения детальной структурной организации и механизмов действия этих рецепторних систем необходимы дополнительные экспериментальные данные.
Поэтому задача поиска нових удобных инструментов исследования тахикиннновых рецепторов не утратила актуальность в настоящее время.
Цель работы. Данная работа является частью проводимых в Институте биоорганической химии им.М.М.Шемякина АН СССР исследований рецепторов тахикининов. В ее задачу входило: I) изучение влияния полипептидных нейротоксинов из ядов змей и некоторых хо-лкнергических лигандов на связывание радиоактивных производных тахшашипов с рецепторами, 2) изучение взаимодействия новых фото-ахтивируемых производных SP с тахикининовыми рецепторами и анализ ковалентних комплексов, которые являются результатом фотоиндуци-рованных сшивок этих лигандов с мембранами мозга крыс.
Научная новизна работы. Обнаружено взаимодействие некоторых низксмолекулярных Олокаторов никотиноеого ацетплхолинового рецептора (нАХР), а также ряда нейротоксинов постсинаптического действия из ядов змей с тахикининовыми рецепторами. При этом показано, что наибольшей эффективностью среди изученных нейротоксинов характеризуется взаимодействие с а-бунгаротоксином (а-Бт). Этот по-липоптгд д;.:зет наибольшее сродство к рецепторам NK-I типа. На ; -к ..:аш;и полученных данных высказано предположение о том, что пикотор::: из а-оунгаротоксинсвязывающих белков мозга могут быть еорлочєіп; в осуществление физиологических ответов на SP. В ко 'тояіцєй работе охарактеризовано взаимодействие с мембранами ь-.озгь крыс трмх нових радиоактивных фотоактивируемых производных SP и покг>:>а;;о ковалонтное іг.е-чояію этими соединениями а-бунгаро-токсинсвязнвачдих .компонентов мозга.
Практі:-'-:ск::л ценность работы. Исследования показали перспективность исіг.-і.'[ьг;оі!ан:їн токсинов шстс.ш.читичеокого действия (а-Ст и токсина f! fl'ij-j '„її: зіагя;-:;<1з) для выделения компонентов тахи -
кининовых рецепторов NK-I типа с помощью аффинной хроматографии, п тйктіч изучение топографии рецепторного комплекса в мембрано.
ПуСлжацш. По теме диссертации опубликовано 4 статьи, материалы диссертации докладывались на 9 Советско-индийском симпозиуме по химии природних создиненкй (Рига, 1939), Международном симпозиуме по рецепторам и ионным каналам (Зап. Берлин, 1989), 2 Форуме пептидного общества Франции (Нант, 1988), Симпозиуме по нейропептицам и иммунопептиднм (Нью-Йорк, 1989).
Объем работа. Диссертация изложена на /#> страницах мазинописного текста и состоит из введения, литературного обзора, результатов и обсуждения, экспериментальной части и выводов. Список цитируемой литературы включает №& наименований.
