Введение к работе
Актуальность темы: Вирусный гепатит В представляет од -ну из наиболее острых проблем здравоохранения. В настоящее вре-*—"мя решение задач иммунодиагностики и иммунопрофилактика гепатита В сопряжено с трудностями репликации поверхностного антигена вируса ( HBsJj ) в различных системах, развитием побочных реакций организма на введение белков, полученных генно-инженерным способом, а также существованием нескольких субтипов вируса, наличием разных форм и стадий заболевания. Учить;вая, что основным источником вирусных белков пока, остается кровь доноров-хронических носителей, становится очевидным, что одним из перспективных подходов к разработке систем диагностики и вакцинации против гепатита В является химический синтез антигенных детерминант белков вируса.
Известно, что использование синтетических пептидных фрагментов вирусных белков позволяет вести серологическую диагностику инфекций без ложноположительных результатов и фактически использовать такие тест-системы как верификационные, а также проводить ди^іїеренциальную диагностику различных форм и стадий заболевания. Синтетические антигены, в отличие от рекомбинантных, безопасны в производстве и хранении, их получение более дешево и технологично.
Так как пептидные фрагменты вирусных белков являются, как правило, лишь слабими иммуногенами, проблемой является вьбор носителя, поскольку именно им в значительной степени определяется иммуногенность конъюгата. Поэтому создание норых высокомолекулярных, слабоиммуногенных носиїелей, усиливающих иммунный ответ организма на введение антигена , является важнейшей задачей при конструировании вакцинирующих препаратов.
Настоящая работа выполнена в рамках программы ГКНТ СССР 0.74.05 'f ОІ660Ш263 - "Синтез биологически активных соединений пептидной природы".
Целью габоти является разработка рациональных схем синтеза и синтез потенциальных антигенных детерминант белков вируса гепатита В ( HfcV ) и их коныогатов с различными при-роднгуи и синтетическими носителями для решения проблем им-
,-2-цунодкагностики и иммунопрофилактики вирусного гепатита В.
Научная новизна. Проведен компьютерный анализ антигенной структуры поверхностного и корового белков по про-. грашам выявления В- и Т-клеточных эпитопов. Разработаны схемы синтеза потенциальных антигенных детерминант HBV ,их аналогов и фрагментов. Предложены новые синтетические носители антигенных детерминант.Получены кокъюгаты синтезированных пептидов с природными и синтетическими носителями. Показана возможность использования синтезированных пептидов и их кокъюгатов в системах диагностики HBV С помощью полученных соединений проведено Т-клеточное эпитопное картирование химерных структур, полученных на основе кор-анти-гена вируса гепатита В.
Практическая ценность работы. Полученные пептида и их конъюгаты могут служить основой для создания диагностических тест-систем и вакцинирующих препаратов.
Синтезированные высокомолекулярные носители пептидной природы могут быть использованы для получения конъюгатов с различными антигенами с целью увеличения их имыуногенно-стл.
На защиту выносятся следующие положения и результаты:
синтез потенциальных антигенных детерминант поверхностного и корового белков вируса гепатита В, их аналогов и фрагментов, выявленных на основании данных компьютерно--аналитического расчета;
синтез высокомолекулярных секвекционных полипептидов-носителей антигенных детерминант;
исследование иммунологических свойств синтезированных пептидов и их конъюгатов с природными и синтетическими носителями.
Апробация работы. Результаты работы, докладывались на Всесоюзной симпозиуме по химии пептидов (Рига-Юрмала, 1990 г),на научно-практической конференции УНЦХ СП6ІУ (С.-Петербург,1990), на семинарах кафедры химии природных соединений химического факультета СПоТУ.
Публикации. По материалам диссертационной работы опубликовано 3 печатные работы.
Объем и структура работы. Диссертация содержит 219 страниц машинописного текста, включая 12 таблиц, 10 рисунков, ІЗ схем.Работа состоит из введения, обзора литературы, посвященного структуре HbV , созданию диагностических и вакцинирующих. препаратов HBV и проблемам получения новых носителей антигенных детерминант, обсуждения результатов, экспериментальной части, списка литературы, включающего 162 наименования, и приложения.
