Введение к работе
_Актуальность_проблемы. Углеводные цепи гликоконъюгатов
поверхности клетки, а также углеводсвязывэюшие белки являются нвиболее чувствительными к онкотрансформвмии структурными элементами кдетки. В последнее время накоплено больяое количество данных об ' углеводных антигенах как диагностически .значимых маркерах онкотрансформации. Такие структуры найдены и среди О-пепей гликопротсипов - это антиген Томсена-Фридепрейха (TF-антиген, игаунодоминантная группе - дисахарид Galfl1-3GalNAc, связанный а-гликозидной связью с Ser/Thr полипептидной цепи), erfc предшественник в биосинтетичеСіїом . пути - Тп-аятигея (GalNAcal-Ser/Thr), а также несколько других структурно близких иіг антигенов.
В настоящее время' Для выявления опухолевых маркеров углеводной природы широкое применение нашли лектины и моноклональные антитела; другой подход заключается в определении ауто-антител к опухолевссоциированяым антигенам. Проведение такого рода исследов шй, также как и многих других работ, связанных с изучением гликоконышатов, трудно представить без соответствующих углевод-содержящих соединений -- синтетических олигосахаридов и неогликоконъюгвтов, Поэтому их синтез и применение в качестве инструментов для изучения природных гликоконъюгатов во многих .. лэненно важіш процессах функционирования клетки представляется актуальной задачей.
Цельюработы были
1) синтез фрагментов 0-цепеЙ гликопротеинов: тп- и ГР-структур;
структурно близких дисахаридов Gatpi-3GalNAcB- (Tg »),
Gala1-3GalNAca- (Ta a) и GalNAcal -ЗСаШо p . а твкже '-
группоспецифичвских олигосахаридов А..В.Н типа 3, для которых
TF-дисахарид является коровым фрагментш и бкосинтотическим
предшественником; ,
2) получение неоглпкоконъюгатов различных типов - неогликопроте-
инов, чеогликолипидов, псевдополисахаридов и их использование в
качестве антигенов и зондов.
- г -
Нхдн8я_нощзна_и_п^актическая_ценндсть^аботн^ Синтезированы фрагменты О-цепей гликопротеинов: Т_- и TF-структуры; Gaipi-3GalHAcp- , Galal-3GalKAca- и. GalNAcal-3GalHAcp- дисахариди, группоспецифические олигосахариды А, В и Н типа 3, причем последние Б олигосахаридов синтезированы впервые,.
Получены и: хроматографически (ВЭЖХ) охарактеризованы флуоресцентно-меченые производные дисахаридов Gal)1-3GalNAc, Galal-3GalHAc и GalMca1-3GalNAc - соединения для структурного анализа О-цепей гликопротеинов.
' Реализован новый универсальный путь синтеза неогликоконъюга-тов* с полиакриламидной матрицей: конденсацией олигосахаридных гаптенов с псш;(4-нитрофенилакрилатом) получены полимерные псевдополисахариды, неогликолипида и биотин-содержащие зонды.
Синтезированные яеогликоконъюгвты были испытаны в нескольких областях иммунодиагностики: полимерные неоглнколигшды проявили себя как.сильные иммуногены, а псевдополисахариды - как удобные формы антигенов для изучения специфичности поли- и моноклоналышх антител,' в также лектинов.
На основе искусственного TF-антигена разработана иммуноферментная тест-система для количественного определения естественных антител к антигену Томсена-Фриденрейха в сыворотке крсви. При помощи зонда с TF-специфичностью нв поверхности лимфоцитоз человека обнаружен специфический рецептор дисахарида Gaipi-3GaiNAca.
_4пробация_полученных_аанных^. Результаты настоящей работы были представлены на VIII Всесоюзной конференции по химии и биохимии углеводов (Тбилиси, 1987), на У Европейском симпозиуме по углеводвм (Прага,. . Чехословакия,' 1989), на XV Международном симпозиуме по углеводам (Иокогама, Япония, 1990), на IX Международном симпозиуме по гликоконъюгатам (Торонто, Канада, 1991) и на XIII Международной конференции по лектинам (Берлин, ФРГ, 1991).
* Данный подход разработан коллективом авторов.
Стрхктщз_и._объем. диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы ("Опухолеассоцинроватшнй антиген Томсеня-Фриденрейхя"), обсуждения результатов (3 раздела), экспериментальной часта, заключения и выводов. Обший объем диссертации 180 страниц; работа содержит "ш таблиц, 2 рисунка , список цитируемой литературы из' 1&, наименований и приложение из f таблиц.
