Введение к работе
1. 1.1 Актуальность проблемы
Известно, что проведение ритмического возбуждения (РВ)
миелиновым нервным волокном (МНВ) сопровождается комплексом изменений как мембранных белков и липидов, так и аксоплазмы [Watanabe et al. 1973; Левин 1976; Cohen, Lesher 1986]. При РВ нервного волокна выявлена переориентация микрофилламентов, связанных с внутренней поверхностью мембраны, увеличение площади перехвата Ранвье, а так же увеличение объема периаксонального пространства [Шалатонин et al. 1973; Розенгарт 1974; Сотников 1976; Tasaki, Iwasa 1980].
В состоянии покоя в аксолемме нервного волокна происходят процессы, обеспечивающие готовность к проведению РВ (например, работа К+-каналов и Na+,K+-ATOa3bi). В аксоне обнаружены регулярные низкоамплитудные изменения мембранного потенциала, которые при увеличении внутриклеточного рН) трансформируются в потенциал действия (ПД) [Tasaki 1982]. Механизм подобных перестроек в нерве в состоянии покоя практически не изучен. Возможно, что в их основе лежит изменение
содержания Са и Н в плазматических мембранах или примембранных участках, приводящее к изменению мембранного потенциала и вязкости аксолеммы [Tasaki 1982; Максимов 1997].
Особый интерес вызывают исследования структуры и вязкости миелина МНВ, которая зависит от упорядоченности жирнокислотных остатков (ЖК-остатков) фосфолипидов (ФЛ), поверхностного заряда, уровня "связанной" (малоподвижной) воды, как при РВ, так и в состоянии покоя [Finean 1956; Левин 1976; Bush et al. 1980; Максимов 1997]. Существенную роль в изменениях вязкости и структуры миелина нервного волокна могут выполнять белки аксо-глиального комплекса (Рис. 1).
межпеоехватный сегмент перехват Ранвье
Рис. 1 Схематическое изображение структуры миелинового нервного волокна. Отмечены белки аксо-глиального комплекса: структурные белки (серые кружки), ион-транспортирующие системы (Na -канал, К -каналы, Na ,К -АТФаза).
1.2 Цели исследования
Цель работы заключалась в исследовании роли белков аксо-глиального комплекса в изменениях вязкости и структуры миелина нервного волокна. Для осуществления данной цели были поставлены следующие задачи:
Изучить изменения ПД, упорядоченности ЖК-остатков ФЛ, уровня "связанной" воды миелина при гидролизе пептидных связей белков аксо-глиального комплекса миелинового нерва (действие проназы Е).
Изучить изменения ПД, упорядоченности ЖК-остатков ФЛ, количества
9+
мембраносвязанного Са и уровня "связанной" воды миелина при изменении конформации экстраклеточных участков белков аксо-глиального комплекса миелинового нерва (действие блокатора белковых SH-групп (пХМБ)).
3. Изучить изменения упорядоченности ЖК-остатков ФЛ, количества
9+
мембраносвязанного Са и уровня "связанной" воды миелина нервного волокна при блокировании активности К+-каналов и АТФаз.
4. Изучить изменения ПД, упорядоченности ЖК-остатков ФЛ, количества
9+
мембраносвязанного Са и уровня "связанной" воды миелина нервного волокна при действии оксида азота (N0).
5. Изучить изменения ПД, упорядоченности ЖК-остатков ФЛ и количества
9+
мембраносвязанного Са миелина нервного волокна при действии белка внешней мембраны спирохеты Borrelia burgdorferi (ОціК).
6. Исследовать изменения морфологии миелинового нервного волокна и
структуры миелина (показателя преломления миелина) в покое и при
изменении свойств белков аксо-глиального комплекса.
1.3 Научная новизна работы
Впервые обнаружено, что изменение вязкости миелина в МНВ может осуществляться как за счет белков аксо-глиального комплекса, так и за счет активности К+-каналов и N0. В состоянии покоя активность К+-каналов, локализованные под миелином и перераспределение N0 может регулировать
9+
упорядоченность ЖК-остатков ФЛ, количество мембраносвязанного Са и уровень "связанной" воды миелина.
1.4 Научно-практическая ценность работы
Полученные данные вносят существенный вклад в понимание роли белков аксо-глиального комплекса (структура, конформация, функция) в изменении
9+
упорядоченности ЖК-остатков ФЛ, количества мембраносвязанного Са и уровня "связанной" воды миелина, а также структуры миелинового нервного волокна и могут быть использованы при разработке новых фармакологических средств для периферической нервной системы (N0, белок OspA).
1.5 Апробация работы
Результаты работы были представлены на всероссийских научных конференциях студентов-физиков и молодых ученых ВНКСФ-10 (Москва, 2004) и ВНКСФ-11 (Екатеринбург, 2005), международных конференциях молодых ученых "Ломоносов" (Москва, 2004, 2005, 2007), международной научной конференции памяти проф. М.В. Гусева "Физиология микроорганизмов в природных и эксперементальных системах" (Москва, 2006), 9-ой международней летней школе по биофизике "Supramolecular structure and function" (Ровинь, 2006), 3-ей международной научно-практической школе-конференции МЕДБИОТЕК "Актуальные вопросы инновационной деятельности в биологии и медицине" (Москва, 2006), международном симпозиуме "Modern Spectroscopy Methods in Studying Structure and Function of Biopolymers in Biology and Medicine" (Дубна, 2007), 6-ом Европейском биофизическом конгрессе (Лондон, 2007), международной школе Физиологического общества "Molecular physiology of membrane transport and cell excitability" (Яремче, 2007).
1.6 Публикации
По материалам диссертации опубликовано 15 работ, из них 3 статьи в отечественных и зарубежных журналах.
1.7 Структура и объем диссертации
