Введение к работе
Актуальность проблемы
Крымская геморрагическая лихорадка (КГЛ) - это природно-очаговая острая инфекция человека, протекающая с лихорадочной реакцией, общей интоксикацией и, часто, с геморрагическим синдромом, выраженным в виде кожных кровоизлияний и разнообразных полостных кровотечений. Вирус ККГЛ передается, главным образом, при укусе иксодовых клещей. Возбудитель относится к роду Nairovirus семейства Bunyaviridae. Ареал этой инфекции охватывает многие эндемичные регионы Африки, Азии и Европы. В России заболеваемость КГЛ зарегистрирована в Астраханской, Ростовской, Волгоградской областях, Ставропольском и Краснодарском краях, Калмыкии, Дагестане, Ингушетии и Карачаево-Черкесии.
Для специфической диагностики КГЛ в эндемичных регионах России и зарубежных стран в настоящее время широко используются методы иммуноферментного анализа и ОТ-ГЩР. Однако, сведения по применению ИФА-IgM, ИФА-IgG и ОТ-ГЩР, опубликованные в отечественных и иностранных изданиях, весьма ограничены и основаны на анализе обследования незначительного числа сывороток больных. При большом объеме подобных исследований, выполняемых в диагностических лабораториях Астрахани, Волгограда, Ростова-на-Дону, Ставрополя и Элисты, полученные результаты недостаточно проанализированы. Не представлены данные по сравнению эффективности применения методов ИФА-IgM, ИФА-IgG и ОТ-ГЩР и динамике IgM и IgG в разные периоды заболевания у больных с различными формами КГЛ, в разных возрастных группах, у мужчин и женщин.
Таким образом, актуальность темы диссертации определяется недостаточным качеством доступной информации по разделам диагностики, имеющим важное значение для быстроты, специфичности и точности выполнения анализов, лечения и, возможно, прогнозирования исходов заболевания КГЛ.
Цели и задачи исследования
Цели исследования заключались в определении динамики IgM и IgG антител в разные периоды заболевания у больных КГЛ с разными клиническими формами, в разных возрастных группах, у мужчин и женщин, и сравнительном определении эффективности использования тест-систем ИФА-IgM, ИФА-IgG и ОТ-ГЩР для специфической диагностики КГЛ.
Для достижения этих целей были поставлены следующие задачи: охарактеризовать чувствительность и специфичность использованных в работе
экспериментальных тест-систем производства НИИ вирусологии
им. Д. И. Ивановского для обнаружения специфических IgM и IgG антител у больных КГЛ;
обследовать сыворотки крови больных КГЛ из эндемичных регионов России методами ИФА-IgM, ИФА-IgG и ОТ-ПЦР;
изучить динамику IgM и IgG антител у больных КГЛ в зависимости от тяжести заболевания, возраста и пола с использованием статистического анализа данных;
определить вероятность заболевания КГЛ в эндемичном регионе среди лиц, покусанных клещами Н. marginatum]
определить тактику специфической диагностики КГЛ.
Научная новизна исследований
Впервые по результатам обследования методами ИФА репрезентативного числа сывороток крови больных КГЛ (338 сывороток крови от 254 больных из Астраханской, Ростовской, Волгоградской областей, Ставропольского края, Калмыкии) с применением статистической обработки данных проведен анализ динамики обнаружения и титров специфических IgM и IgG антител в разные периоды заболевания, при разных клинических формах, в различных возрастных группах, у мужчин и женщин.
Установлена тенденция выявления более высоких титров IgM антител при легкой форме заболевания, по сравнению со среднетяжелой и тяжелой, а также более высоких титров при среднетяжелой, по сравнению с тяжелой (вероятность альтернативной гипотезы р < 0.02).
Титры IgM антител у больных КГЛ в возрастной группе до 40 лет значительно выше, чем в группе 60 и более лет (р < 0.009).
Впервые установлено, что частота регистрации клинически выраженных, лабораторно верифицированных случаев КГЛ среди лиц, покусанных в эндемичном регионе клещами Н. marginatum, составляет 0,3-0,4 %.
Практическая значимость
На основании полученных данных подтверждена целесообразность использования принятой в настоящее время схемы специфической диагностики КГЛ, включающей применение ОТ-ПЦР (в первые 8 дней болезни), а затем ИФА-IgM (с 8-го дня и позднее). Метод ИФА-IgG может использоваться как подтверждающий, но необязательный тест.
Положения, выносимые на защиту
1. По результатам обследования методами ИФА репрезентативного числа сывороток
крови больных КГЛ с применением статистической обработки данных впервые проведен анализ динамики обнаружения и титров специфических IgM и IgG антител в разные периоды заболевания, при разных клинических формах, в различных возрастных группах, у мужчин и женщин.
-
Частота выявления IgM-позитивных сывороток с 1 по 16 день болезни возрастает от 40,0 до 100 %. Средние геометрические значения титров IgM при этом увеличиваются от 1 : 8700 до 1 : 22 700, сохраняясь на высоком уровне до конца месяца (срок наблюдения).
-
Частота обнаружения специфических IgG с 1 по 16 день болезни возрастает от 24,4 до 92,3 %, а средние геометрические значения титров IgG от 1 : 290 до 1 : 1100. Средний показатель титров 1 : 960 сохраняется до конца месяца.
-
Установлена статистически достоверная тенденция выявления более высоких титров IgM антител при легкой форме заболевания, по сравнению со среднетяжелой и тяжелой, а также более высоких титров при среднетяжелой форме по сравнению с тяжелой.
-
Титры IgM антител у больных КГЛ в возрастной группе до 40 лет значительно выше, чем в группе 60 и более лет.
-
Подтверждена целесообразность использования принятой в настоящее время схемы специфической диагностики КГЛ, включающей применение ОТ-ПЦР с 1 по 8 день заболевания, метод ИФА-IgM - с 8 дня и позднее, ИФА-IgG с 9-16 дня заболевания.
-
Впервые установлено, что частота регистрации клинически выраженных, лабораторно верифицированных случаев КГЛ среди лиц, покусанных в эндемичном регионе клещами Н. marginatum, составляет 0,3-0,4 %.
Апробация результатов исследования и публикации
Результаты работы были представлены на X Межгосударственной научно-практической конференции государств-участников СНГ «Актуальные проблемы предупреждения и ликвидации последствий чрезвычайных ситуаций в области санитарно-эпидемиологического благополучия населения государств-участников СНГ» (Ставрополь, 2010 г.).
Основные положения работы заслушаны и обсуждены на заседании апробационного совета ФГБУ «НИИ вирусологии им. Д. И. Ивановского» Минздрава России 25 апреля 2013 г. (Протокол № 22).
По материалам диссертации опубликовано 4 научные работы, в том числе в изданиях, рекомендуемых ВАК - 3.
Объем и структура диссертации
