Введение к работе
Актуальность тами. Массовые «елудочно~кншьчи;із заболевания телят являются одной из серьезнейших проблем, стоя -щих перед ветеринарной наукой, В условиях промшаденного ведения животноводства они приобретают широкое-распространение и наносят большой экономический ущерб. В настоящей пряна а ти болезни рас -сматривают как комплексную проблему, при которой патогенная и условно-патогенная микрофлора вызывает тяжелую патологию на фоне пониженной резистентности и иммуноде<{ицитішх состояний.
Традиционными методами лечения неонатальных диарей являются диетотерапия, применение отваров лекарственных растений, рогидря-тационннх составов, вяжущих и антибактериальных средств. Мсполь -зовакие последних в первые дни жизни животного не всегда дает же-* лаемые результаты, а антибиотики, я.тляяоь иммунодепрзосантами, усугубляют временный врожденный иммунодефицит у новорожденных топят и не оказывают действия на широкораспространенные резистенг --ше гатаммы условно-патогенных агентов (З.В.Ермольеяа, Г.Е.Вайс-5ерр, 1976; В.И.Проданов, 1980} А.К.Чулков, 1983; В.Г.Зароэа, [984$ А.Ю.Кассич, 1986).
Многие исследователи сообщают о том, что применение лекарст -зенных средств, стимулирующих иммунореэисгеитность, предупреждз -it возникновение у теля1" в ранний постнатальный период гхизни аго-[удочно-кншечных заболеваний, а терапия этих болезней иммуностиму-іяторами способствует болез легкому и кратковременному их течению. і средствам, облагающим иммуностимулирующими свойствами, относяї-'Я препарата оот.'зтвонмого происхождения (лизоцяч, прсдипгозпн, іуклоинат натрия, низкололекуіярная РНК), гормональные вещества і пептиды из пкговидной железа и тимуса (тнмозин, тимолии, гемо -ин, блаотолизин, тимоатерич), коллоидные раствори металлов (золо-а, серебра), зчограктн ралпячП (элеутерококка, атое), лилополн -
сахариди бактерий и дроюкей. Среди иммунотропних средств много химических соединений, активно влияющих на различные звенья иммунной системи - синтетические полинуклеотиды, серосодержащие препараты, производные бензимидазола, пиридина и пиримидина и некоторна дру -rise,. Эффективность иммуностимуляции зависит от дози и кратности приминания препаратов, индивидуальных особенностей макроорганизма, характера и тяжести патологических изменений. Несмотря на положительное действие, многие иммуностимуляторы дают побочные нежелательные эффекты. Актуальним является поиск новых, доступных в синтезе и применении, эффективных отечественных стимуляторов иммунитета Предварительные исследования показали, что перспективными являются производные пиридинкарбоновых кислот, что требует более глубокого изучения и экспериментальной проверки. : Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы было изучение возможности профилактики желудочно--кише~ чних болезней телят с использованием двух новых иммуномодуляторов - производных амидов пиридинкарбоновых кислот и известного стиму -лятора иммунитета метилурацила,
В процессе выполнения работы необходимо было реаить следующие задачи:
1. Изучить этиологию неонаталышх диарей в стационарно неблаго-* получном базовом хозяйство.
2? Выявить уровень, направленность и закономерности изменения ;слияико*гематологическчх и иммунологических показателей у новорожденных телят при пароральном применении иммуномодуляторов.
Э, Выявить уровень, направленность и закономерн сти изменения климжсо-гекатологических и иммунологических показателей у телят nj і.іс\р«'нтеральнои применении иммуномодуляторов стельным коровам на фо на иммунизации против олерихиоза.
Ы Определить профилактическую эффективность производных амс -дов пнридинкарбоношх кислот и мэ тилу радила в отношении неоната -льных диарей телят.
"Научная новизна. Впервые использованы в ветеринарной практика для профилактики остры» рвоотройотв пищеварения у новорожденных телят производимо амидов пиридинкарбоновых киолот -йодматилат 3-( w-бензил) карбамидопиридиний и йодметилат 4-( я-бензил) карбамидопиридиний. Разработаны схемы применения этих препаратов и мэтилурацила перорально новорожденным животным и парен -терально на фоне иммунизации против эшерихиоза стельным коровам, обеспечивающие повышение иммунологической защити, скиженйоЛ»аболэ-ваемооти, летальности, а также продолжительности и тяжести течо - . ния кэонатальных диарей.
Результаты исследований защищены автороким овидетельотвом. на изобретение.
Теоретическая значимость и практическая цэннооть работы. Комплексным изучением . причин желудочно-кишечных болезнай телят в условиях стационарного неблагополучия установлена их полиэтиологичнооть о доминирующим положением инфекционных агентов - эшэрихий, оальмонелл, ротавиру-оа.
Разработаны схемы применения новых синтетических иммуномоду -ляторов и метилурацила для профилактики неонатальных диарей у телят, являющиеся эффективными, нотрудоемкимн, выполнимыми обслужи -вапщим животных персоналом.
Разработано и утеэржлено "Временное наставление по применению тамбана при жялудочнп-кишрчных заболеваниях новорожденных телят тз кт-гествэ крчзбиого и нрогЧілактіг'оокого орсдотла".
Апробация р ч <5 о т ч . Материалы диссертационной ра -
боты доложены и обсуждены на заседаниях Ученого совета ветеринарного факультета, научных конференциях профессорско-преподавательского состава Украинской СКА (1987-1990г.г.); Республиканской на-учно-практичзокой конференции молодых ученых, поовященной 70-ле -тип ВЛКСМ (г.Харьков,1988); ветеринарной секции 6 Всесоюзного сьезда фармакологов (г,Тааікект,1988); научно-теоретических конференциях молодых ученых и аспирантов К.-Подольского СХЙ (г«К.-По-дольский, 1989,1990); 1 межвузовской конференции "Новые фармакологические средства в ветеринарии" (г.Ленинград,1989), а также совместном расширенном заседании кафедр фармакологии и патофизиологии, эпизоотологии, микробиологии и вирусологии, биохимии, терапии и клинической диагностики УСХА Iі» июня 1990 года.
Публикации. По теме диссертационной работы опубликовано б научных работ, в которых изложены основные положения диссар -тациИф
Обьеми структур адисоертаци и. Диосерг тация состоит из введения, обзора литературы, собственных иссле -дований, обсуждения результатов, выводов, практических предложв -ний, списка литературы и приложения. Материал изложен на 196 страницах машинописного текста, иллюстрирован 18 рисунками, 35 таблицами. Список литературы включает 307 источников, из них 6? иностранных авторов.
Материалы и мето.ды исследований. Диссертационная работа выполнена на кафедре фармакологии и патофизиологии ГСХА, Киевском НИИ фармакологии и токсикологии МЗ УССР и совхозе "Хотовский" Киевской области.
В своей работе мы использовали следующие препараты:
1. 11одм<зтилаг 3~С .k-бензил) карбачидопиридиний (препарат ЙС-І);
2, Йздлштилат Н~{ Н-бвнзкл) карб&чидапнридигаіі (препарат ЙС-ІСО);
7 3. Мэтилурацил.
_Йодмэтилат 2~L ^.~йЩЩл2 карбшидопиридикий - кристаллическое ЕЭЩ80ТВО светло-желтого цвета, молзкулярная мвооа 354,13, раогво -ряется а воде и низших спиртах. По параметрам ДДед относится к на-лотокоичным соединениям.
Синтезирован в Киевском НИИ фармакологии и токоикологии ИЗ УССР.
Йодмвтилат 4-( N-бензил) карбамидопиридиний, изамбвн - ярко-желтый кристаллический порошок, раотворим в воде, мало растворим в спирте, молекулярная маоса 354,19.
Препарат проявляет жаропонижающее, противовоспалительное, вналь" тезирующее, антиоксидантнов и нормализующее энергетический обмен в очаге воспаления действие, оолаблязт сосудистую реакцию путем взаи" модейотвия с медиаторами воспаления. Не обладает кумулирующим оф » фактом, у него не выявлено канцерогенного, мутагенного, тератогенного, эмбриотокоичеокого и аллергизирующего действия. Малотоксичан. Синтезирован в Киевском НИИ фармакологии и токсикологии МЗ /ССР. .
Мотилур_ацил - белый кристаллический порошок без запаха, мало растворим в воде и спирте, раотворим в раотворе бикарбоната натрия. По Химическому строению относится к производным пиримидина. Препарат обладает анаболической и антикатаболической активность», уо « коряет пропесоы клеточкой регенерации, заживление ран, стимулирует клеточные и гуморальные факторы защиты, оказывает противовоспалительное действие, является стимулятором эритро- и особенно леЯ--копоээа.
Испытание имм»ноиодуляторов проводили но двум схемам: схема Н_- по принципу парных аналогов подбирали две группы новорожденных толят. Жичотным первой группы (опытнач) в течение секи дней- задавали пороряльно ичнуномопулятор g дозз 15 мг/кг' мпооу, ТЧчятп )?торой группу сл.у-'(чли кочтропем. За подопытными яянотчнчч
8 наблюдали о момента рождения до 22-днэвного возраста; охеиа |2_- отельных коров, подобранных по принципу аналогов, иммунизировали поливалентной ГОА формолтиомерсаловой вакциной против эшерихиоза в соответствии о наотаалениэм по её применению» Животным первой группы (опытной) одновременно с вакциной, а также че -рез 48 часов после вакцинации и ревакцинации подкожно вводили пра-і парат ИС-1 или метилурацил. Препарат ИС-10О вводили одновременно о вакциной, а затем через 24 и 48 часов после вакцинации и ревак» цинации. Доза иммуномодуляторов на одну инъекцию 5 г на голову. Животные второй группы служили контролем. За телятами от подопытных коров наблюдали о момента рождения до месячного возраота.
Периодически у всех подопытных животных брали кровь, а у коров и молозиво первого удоя для лабораторных исследований.
Номиосионну» проверку оффективности препарата ИС-1 проводили по обеим охемам.
Всех больных телят подвергали комплексному лечению о назначением полуголодной диеты с заменой 2 раза в день очередной выпойки молозива выпойкой теплого физиологического раствора (0,5 л), 2 раза в день ло 200 мл наотоя ромашки, зверобоя и лиотьев подорожни-. ка, отвара р'иса, внутримыиечно тривит по I мл раз в день. При тяжелом клиническом проявлении болезни или выделении из фекалий патогенных эшерихий после определения чувствительности микрофлоры к антибиотикам, перорально вводили полимиксин в дозе 0,02 г/кг или левомицетин 20 мг/кг три раза в день четыре дня подряд, сульфадимезин 0,04 г/кг три раза в день четыре дня подряд} при сильном обезвоживании подкожно в нескольких точках иньецир-вали на стерильном физиологическом растворе 5#-ный раотвор глюкозы (300 мл).
Клиническое исследование подопытных животных проводили по обще,-і принятой в ветеринарии схеме. Рост и развитие телят контролировали
путем их взвешивания при рождении и по окончании опита. Незави -симо от схемы испытания иммуномодуляторов, по контрольной и опытной группам животных учитывали заболеваемость новорожденных телят, тяжесть и продолжительность болезни, летальность. При вскрытии трупов телят, болевших о признаками диареи, учитывали патологов -натомические изменения и отбирали материал для лабораторных исследований»
Бактериологические исследования включали выделониэ и идентификацию микроорганизмов, определение их патогеннооти и чувствительности к антибиотикам, серотипизацию эшерихий и овльмонелл. Мате -риалом служили фекалии больных животных и патологический Чпкериал от телят, павших о признаками расстройства пищеварения.
Вирусологическому иооледованию подвергали этот жэ материал. Его обрабатывали по методике, разработанной сотрудниками квфэдры, микробиологии и вируоологии УСХА* заключающейся в сорбции вируса на ткани Петрянова о двукратной очисткой хлороформом. Ротавируо вы -делялй на пёрвично-трйпоинизированной культуре клеток почек эмб -рионов коров СПЭК). О наличии ротавируоа а инфицированных клетках судили по цитопатичвскому действию ОВД) и результатам электронной микроскопии (методом негативного контрастирования исследовали ви-руооодержаиую культураяьнув жидкооть или патологический материал), а также при обнаружении ротавируоного антигена в реакции длительного связывания комплемента (РДСК).
Гематологические исследования включали подсчет количества зрк -троцитов и лейкоцитов с помочью счетчика микрочастиц "Пикоокель . Рз -4" (ВНР), выведение лейкогрзммн по общепринятой методике, оп-вдолонио гемоглобина с использованием фотоэлектрического эритро'-эмометра модели 065 и гематокрита путем центрифугирования крови гепариниэирозанпых капиллярах при 6000 об/мин в течет*.'» 15 минут
на центрифуга w к-300.
Иммунологический исследования включали определение фагоцитар -ной активности лейкоцитов и интенсивности фагоцитоза по отношению к si;.aureus 209? по методике, описанной 8»Е. Чумаченко (1975); определение активности лизоцима сиворотки крови по методике, предложенное отделом зоогигионы УНИГОВа (1952); определение комплекецтар-ной активности сыворотки крови методом фэтоэлвктроколоримэтрии* содержания общего белка - в биуратовой реакции, иммуноглобулинов а и М - в реакции радиальной иммунодиффузии (РЯД). Титр специфических по отиошоцию к эшврихиозным антигенам антител в сыворотке крови и молозива первого удоя определяли в классической реакции агг -лятинации. В качество антигена мы использовали суточную культуру S. cola серологических вариантов 08г 0I5S 0119.
Статистическую обработку полученных данных проводили с использованном программируемого микрокалькулятора "Электроника MK-6I" по программе В „А, Какунииа (1975).
Геыатологичаокиэ исследования проводили оовмостио о кандидатом ветеринарних наук доцентом кафедры терапии и клинической диагнос -тики А.Э» Левицким,вирусологические - с кандидатами ветеринарных наук асоистентпми кафздры эпизоотологии H.D. Геротманом и В.П. По-стой.
