Введение к работе
Актуальность гемы Успех борьбы с туберкулезом крупного рогатого скота во многом зависит от степени изученности закономерностей эпизоотического процесса, а также от ранней и надежной его диагностики Особенно важно знать особенности эпизоо шческого процесса в конкретной природно-экономической зоне, гак как это определяет масштабы и эффективность проведения противоэпизоотических мероприятий
В последние десятилетия одним из наиболее актуальных вопросов ветеринарной фтизиатрии является дифференциация аллергических реакций на ППД-туберкулин для млекопитающих Довольно высокая частота обнаружения неспецифических реакций в благополучных по туберкулезу стадах крупного рогат ого скота привела к тому, что внутрикожная туберкулиновая проба потеряла значимость как единственный, достоверный и эффективный метод прижизненной диагностики туберкулеза Внутрикожная туберкулиновая проба стала лишь ориентировочной при первичной постановке диагноза на туберкулез в хозяйствах, считающихся благополучными по этой инфекции (И А Баку лов, 1976, ВП Урбан, 1982, АС Допченко, В Н Донченко, 1972, 1994, НМ Колычев с соавт, 1992, 2004, ВН Кисленко,1998,АН Шаров с соавт ,1980, Ю Я Кассич с соавт , 1990, Н П Овдиенко, 1990, Н А Шкиль,1995, В Г Луницын,1998, В И Околелов, 2001, Р А Нуратинов с соавт ,2001, А X Найманов 2004, и др )
В настоящее время диагноз на туберкулез у крупного рогатого скота считается установленным, если позитивные показатели внутрикожной аллергической пробы подтверждаются патологоанатомическим методом или положительными результатами биологического и бактериологического исследований
Между тем, выделение микобактерий туберкулеза из биологического (патологического) материала связано с определенными трудностями в силу генетических и феношпических особенностей возбудителя Основные из них - медленный росі на искусе і венных питательных средах и способность к L-трансформации и длительной персисгенции возбудителя в организме животных в измененной форме (А С Донченко, Ы П Овдиенко, Н А Донченко, 2004, Н М Колычев с соавт , 2004, В С Федосеев с соавт, 1981, 1991, ЮА Макаров, 1997, МИ Гертман, 1988, Л В Галатова, 1993, 2000) Изменение морфологии микобактерий и понижение метаболизма предполагают и особые требования к условиям культивирования их L- форм, которые на обычных питательных средах, применяемых при лабораторной диагностике, либо вообще не растут, либо растут очень скудно (З Н Кочемасова, 1970, 1975, ИР Дорожкова, 1984, ВС Федосеев, 1975, 1982, НП Овдиенко, МИ Гертман 1988, В Г Ощепков, Л А Таллер, ЕЮ Секин, 2001, 2006 и др ) Для них необходимы щадящие методы обработки биоматериала и элективные питательные среды, в которых обязательно присутствие нативных бел-
ков и веществ, стабилизирующих осмотические свойства среды и стимулирующих рост микобактерий
Следовательно, улучшение имеющихся и создание новых питательных сред, повышающих эффективность бактериологической диагностики туберкулеза, остается актуальным направлением фтизиатрии
Цель и задачи исследований. Целью наших исследований явилось изучение закономерностей особенностей, тенденции и эпизоотического процесса туберкулеза крупного рогатого скота, происходящего в Челябинской области, и усовершенствование бактериологической диагностики Для этого необходимо было решить следующие задачи
Изучить динамику эпизоотического процесса туберкулеза у крупного рогатого скота на территории Челябинской области минимум за 50 лет
Установиі ь критерии эпизоотологической оценки хозяйств (ферм), в которых в течение 2-3 лет и более выявляются живо інше, реагирующие на ППД- туберкулин
Определить видовой состав и основные культуральные свойства микобактерий, выделенных из органов реагирующих на ППД-туберкулин животных и объектов внешней среды
Изучить роль голубей в резервации и распространении патогенных и «атипичных» микобактерий
Выяснить влияние фитодобавок в питательных средах на повышение выделяемости и скорость роста типичных и измененных L-форм микобактерий
Изучить рсверсибельные свойства L-форм патогенных и «атипичных» микобактерий с использованием новых питательных сред и их значимость в бактериологической диагностике туберкулеза
Научная новизна. Результаты проведенных исследований расширяют представление о возможных региональных особенностях эпизоотического процесса туберкулеза крупного рогатого скота, стдийности и периодичности его проявления в конкрешых природно-климатических и социально-экономических условиях Южного Урала, методических подходах к эпизоотологической оценке инфекционного статуса животных, находящихся в стадах (фермах, хозяйствах), счишющихся благополучными по туберкулезу, но проявляющих кожные реакции на диагностический ППД-туберкулин, эпизоотологической роли синантропных птиц (голубей) в резервации и распространении возбудителя туберкулеза крупного рогатого скота, видовом составе типичных и измененных (L-форм) микобактерий, циркулирующих в последнее десятилетие (2002-2007 гг) на территории Челябинской области, в том числе на фермах, где содержится крупный рогатый скот, реагирующий на туберкулин, их культурально-морфологических и реверсирующих свойствах, способах конструирования и определения диагностической значимости питательных сред, предназначенных для выделения патогенных и «атипичных» микобактерий из биологического материала (паренхиматозные органы, лимфатические узлы, молоко) и объектов внешней среды
Составлена новая композиция питательной среды для культивирования микобактерий, находящихся в морфологически типичном и измененном (L-форме) состоянии, подана заявка на ее регистрацию в качестве изобретения (приоритетная справка ФИПС № 2006120646 от 13 06 2006г)
Практическая значимость Аналитические данные по эпизоотическому процессу могут быть использованы при планировании, организации и проведении противоэпизоотических мероприятий на территории Челябинской области
Разработанная композиция питательной среды (2006 г ) позволяет существенно повысить эффективность бактериологической диагностики туберкулеза и микобактериозов (в 1,3-1,8 раза) у крупного рогагого скота и птиц
Результаты исследований использованы при составлении методических рекомендаций по изоляции и идентификации L-форм микобактерий (2005г), а также при подготовке ветеринарных специалистов в Уральской государственной академии ветеринарной медицины
Апробация полученных материалов Материалы диссертации доло
жены и обсуждены на научных конференциях профессорско-
преподавательского сосіава и аспират ов Уральской государственной ака
демии ветеринарной медицины ( 2003, 2004, 2005 і г), на конференциях мо
лодых ученых УГАВМ і Троицк, (2003, 2004гг), координационных сове
щаниях по инфекционной паюлогии сельскохозяйственных животных (г
Москва, ВИЭВ, 2005, 2006,2007 гг ), международных научно-практических
конференциях по акгуальным проблемам ветеринарии (Москва,2004г, Ялта,
2005г)
Публикация материалов исследований. По материалам диссертационной работы опубликовано 10 научных статей в трудах НИУ и сборниках научных конференций, в том числе 1 публикация в изданиях вошедших в Перечень ВАК РФ
Внедрение результатов исследований. Сконструирована новая питательная среда и подана заявка в ФИПС на ее регистрацию в качестве изобретения, составлены методические рекомендации по изоляции L-форм патогенных и «атипичных» микобактерий утвержденные Ученым советом ВНИ-ИБТЖ протокол № 3 от 14 05 2005 г и подсекцией «Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока», отделение ветеринарной медицины СО РАСХН (протокол № 5 о г 21 июня 2005 г ,) меюдической комиссией факультета ветеринарной медицины УГАВМ (протокол № 10 от 29 09 2003 г )
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 152 страницах компьютерного текста и состоит из следующих разделов введение, обзор литературы, результаты собственных исследовании, обсуждения полученных результатов, выводы, практические предложения и список литературы, включающий 218 источников, в том числе 23-иностранных, и приложения