Содержание к диссертации
Введение
1. Краткая биологическая характеристика нутрий 12
1.2.Половая и физиологическая зрелость- 18
1.3.Половой цикл, его регуляция. особенности проявления половой функции у нутрий 20
1.4.Влияние различных факторов
1.5. Подготовка и использование самцов-пробников 34
2. Собственные исследования 46
2.1.Материалы и методы исследований 4 6
2.2. Разработка способа подготовки самца-пробника у нут рий 51
2.2.1.Анатомо-морфологическая характеристика воспроизводительной системы самцов нутрий 51
2.2.2 .Техника проведения эпидидимитомии 61
2.2.3.Влияние эпидидимитомии на морфологические показатели половых органов самцов нутрий .66
2.2.4.Гематологические показатели эпидидимитомированных самцов 74
2.2.5.Половые рефлексы эпидидимитомированных самцов- 76
2.3. Использование оперированных самцов ' с целью изучения стадии возбуздения полового цикла у самок . 80
2.3.1.Формирование феноменов стадии возбуждения полового цикла нутрий в присутствии эпидидимитомированных самцов 80
2.3.2.Половое поведение самок в присутствии эпидидимитомированного самца при дозированном контакте
2.3.3.Половое поведение самок в присутствии эпидидимитомированного самца при совместном содержании
2.4. Использование оперированных самцов с целью стимуляции репродуктивной функции самок .
2.4.1.Макро-микроморфологические показатели репродуктивных органов самок под влиянием
2.4.2. Гематологические показатели самок, содержавшихся с эпидидимитомированным самцом
2.4.3.Влияние самца пробника на показатели воспроизводства и молочность самок.
2.5.Экономическая эффективность использования пробников
2.6.Испытание способа совместного содержания разнополых щенков нутрий до наступления физиологической зрелости.
2.7.Испытание эпидидимитомированных самцов в производственных условиях
Заключение
- Подготовка и использование самцов-пробников
- Разработка способа подготовки самца-пробника у нут рий
- Использование оперированных самцов ' с целью изучения стадии возбуздения полового цикла у самок
- Использование оперированных самцов с целью стимуляции репродуктивной функции самок
Введение к работе
Реализация государственной аграрной политики предполагает создание современных технологий производства продукции на основе принципиально новых теоретических исследований и научно-технических решений, обеспечивающих динамичное развитие разных отраслей животноводства. Наряду с сокращением и деструктуризацией скотоводства, свиноводства, птицеводства получают всё более широкое
V# распространение отрасли нетрадиционного животноводства, к которым относится и нутриеводство.
Нутриеводство - перспективная отрасль звероводства, являющаяся важным резервом роста производства и расширения ассортимента пушнины. Мех нутрии отличается шелковистостью пуха, крепостью остевого волоса, лёгкостью и высоким теплозащитными свойствами. По носкости он не уступает меху серебристо-чёрной лисицы, голубого песца и превосходит кроличий примерно в десять раз. Так, по прочности мех выдры принимается за 100%, соболя натурального - за 80, норки - за 70, нутрии натуральной - за 50 и щипаной - за 25, лисицы натуральной - за 40, щипаной - за 25, песца голубого - за 20, шиншиллы - за 15 и кролика - за 5 (57).
- Шкурки нутрий имеют различные расцветки: серо-коричневые, чёрные, перламутровые, пастелевые, золотистые, серебристые и белые. Из натуральных и щипаных шкурок изготавливают красивые, прочные изделия, которые значительно дешевле аналогичных изделий из шкурок плотоядных зверей.
В отличие от норок, лисиц и других пушных зверей для выращивания нутрии требуются в основном дешёвые растительные корма. Кроме того, от нутрии получают высококачественное мясо, которое по питательности и диетическим свойствам не уступает мясу птицы и кролика. В нём много азотистых экстрактивных веществ и мышечного гемоглобина (0,8-1,2%), что придаёт нутрятине интенсивно-розовую окраску, возбуждает аппетит и секрецию пищеварительных желез у человека (12) .
Нутрия плодовита: за одно-два в год самка приносит 6-10 щенят, которые в том же году могут участвовать в размножении. Однако результаты анализа племенного использования нутрий на фермах показали, что потенциальные способности к размножению этих сезонно-полиэстричных, многоплодных животных используются не полностью.
По данным Л.В. Толстенко(128), Н.А. Цепковой с соавт.(ІЗб), при разведении нутрий Б условиях закрытых помещений на 20-30% снижается оплодотворяемость молодых самок при косячной случке. Одной из причин этого может быть отсутствие эффективного метода, позволяющего определять оптимальный срок покрытия и осеменения самок при широко применяемой гаремной или групповой системе разведения этих зверей(155).
Большое значение в комплексе мероприятий по профилактике бесплодия и малоплодия наряду с организацией полноценного кормления, содержания, подготовкой производителей к спариванию, имеет активизация функции гениталий самок естественными факторами и, прежде всего, контактом с самцом(106,154). Но контакт с самцом может привести к нежелательной ранней беременности. Во избежание этого в животноводстве используют оперированных самцов, так называемых, пробников. Пробники стимулируют физиологически полноценные половые функции у самки и способствуют точному определению времени её половой охоты. Применение самцов-пробников практикуется довольно давно. Разработаны различные способы их подготовки и использования.
Наряду с этим физиологическая стимуляция самцом у является экологически чистым способом по сравнению с гормональным методом стимуляции, так как биологически активные вещества вырабатываются естественным путем в организме, а не вносятся извне, как их синтезированные А аналоги.
Анализ доступной нам литературы свидетельствует о недостаточной изученности физиологии размножения нутрий, в частности, влияния самца на половую функцию самок. Данных о способах подготовки самцов-пробников нутрий и их использовании в литературе отсутствуют.
В связи с этим целью нашей работы было разработать способ подготовки самца-пробника нутрий и найти возможные аспекты применения оперированных самцов для улучшения репродуктивного потенциала самок.
Для достижения поставленной цели мы поставили к разрешению следующие задачи:
1. Изучить анатомо-физиологические особенности
/і репродуктивной системы самцов нутрий.
2. Разработать оперативный способ подготовки самца-пробника нутрий путём резекции хвоста придатка семенника (эпидидимитомии) .
3. Изучить влияние эпидидимитомии на морфологию органов репродуктивной системы, половое поведение и гематологический статус самцов нутрий.
4. Установить влияние оперированного самца на морфологические, гематологические показатели и половое поведение самок.
5. Изучить формирование феноменов стадии возбуждения полового цикла в присутствии оперированного самца и половое поведение самок при дозированном контакте и совместном содержании с эпидидимитомированным самцом.
6. Определить влияние оперированного самца на воспроизводительную функцию и молочность самок. 7. Разработать и внедрить в производство способ совместного содержания разнополых щенков нутрий до наступления физиологической зрелости.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА. На основании изучения анатомических особенностей репродуктивных органов самцов нутрий впервые разработан оперативный способ подготовки самцов-пробников нутрий путём резекции хвоста придатка семенника; изучены макро- и микроморфологические изменения органов Щ репродуктивной системы, гематологические показатели и половые рефлексы эпидидимитомированных самцов. Установлено влияние оперированного самца на макро- и микро морфологические показатели органов репродуктивной системы, гематологические показатели, формирование феноменов стадии возбуждения полового цикла, половое /ж поведение, воспроизводительную функцию, молочность ремонтных самок. Предложен способ совместного содержания разнополых щенков нутрий до достижения физиологической зрелости, на оригинальность способа совместного содержания подана авторская заявка.
ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ РАБОТЫ. Разработан, испытан и внедрён в производство оперативный способ подготовки /ш самца-пробника нутрии - эпидидимитомия; доказан стимулирующий эффект, оказываемый эпидидимитомированными самцами, на воспроизводительную функцию самок и возможность выбора их в охоте с целью эффективного осеменения и формирования семей с учётом близких сроков ще нения. Разработан и внедрён в производство новый способ "9 г совместного содержания разнополых щенков нутрии до наступления физиологической зрелости, позволяющий рационально использовать площади клеток (вольеров) значительно снизить трудозатраты по уходу за животными, _ выращивать качественных ремонтных самок, повысить их плодовитость и молочность. Результаты опытов и выводы могут быть использованы при изучении студентами зооветеринарных специальностей курсов: «Ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных», «Звероводство», «Болезни пушных зверей».
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. f Результаты диссертационной работы изложены и обсуждены на: 1. Международной научной конференции «Актуальные вопросы морфологии и хирургии XXI века», г. Оренбург (2001г.); 2. Молодёжной научной конференции «Актуальные /м проблемы экологии в сельскохозяйственном производстве», п. Персиановский (2001, 2002 г.г.); 3. Научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии, г. Казань (2001г.); 4. Международной научно-производственной конференции по акушерству, гинекологии и биотехнологии репродукции животных, посвященной 100-летию со дня рождения заслуженного деятеля науки РСФСР, доктора ветеринарных наук, профессора И.А. Бочарова, г. Санкт-Петербург (2001); 5. Всероссийской научно-практической конференции молодых учёных «Биотехнология — возрождению сельского хозяйства России в XXI веке», г. Санкт-Петербург (2001); 6. Всероссийской научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии, г. Казань (2002); 7. Международной научно-практической конференции w «Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях», г. Воронеж (2002); 8. кэасширенном заседании кафедры акушерства и хирургии ФГОУ ВПО «ДонГАУ», протокол №5 от 20 марта 2003г. По материалам диссертационной работы был выигран конкурс 2002 г., объявленный Федеральной целевой программой «Интеграция науки и высшего образования России f на 2002-2006 годы». В качестве награды была присуждена оплачиваемая трёхмесячная стажировка в ведущее научно-исследовательское учреждение, занимающееся изучением проблем пушного звероводства - ГНУ «НИИ ПЗК им. В. А. Афанасьева»
РЕАЛИЗАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ. Разработанные / практические предложения реализуются в производстве (акты см. в приложении) . Данные диссертации используются в учебном процессе при проведении занятий по курсам «Ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных», «Болезни пушных зверей» на факультете ветеринарной медицины ДонГАУ, изложены в научно практических рекомендациях «Анатомо-топографическая /ф характеристика воспроизводительной системы самцов нутрий и операции на половых органах», утверждённых и рекомендованных к внедрению Управлением ветеринарии Ростовской области (протокол №51 от 19 октября 2001 г.).
ПУБЛИКАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ. Основные положения диссертационной работы изложены в 13 печатных работах, в том числе, в рекомендациях для/ ветеринарных врачей и студентов факультета ветеринарной медицины «Анатомо-топографическая характеристика It воспроизводительной системы самцов нутрий и операции на половых органах».
ОСНОВНЫЕ ВОПРОСЫ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ 1.Эпидидимитомия - способ оперативной подготовки самца-пробника нутрии и его влияние на организм и половое поведение оперированных животных. 2.Влияние эпидидимитомированного самца на морфологические, гематологические показатели, формирование феноменов стадии возбуждения полового цикла, половое поведение, воспроизводительную функцию и молочность самок. 3. Способ совместного содержания разнополых щенков нутрий до наступления физиологической зрелости.
ОБЪЁМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ. Диссертация изложена на 150 страницах машинописного текста, иллюстрирована 11 таблицами и 35 рисунками, состоит из следующих разделов:" введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов исследований, выводов, практических предложений, списка литературы, включающего 197 источников, из них 4 3 иностранных, приложения.
Подготовка и использование самцов-пробников
С развитием племенного дела и внедрением в практику животноводства метода искусственного осеменения возникла необходимость разработки различных способов подготовки самцов-пробников и их использования в качестве надежного способа выявления половой охоты и стимуляции половой функции. В зависимости от анатомических особенностей половой системы самцов разных видов животных разработан целый ряд способов подготовки самцов-пробников. Все способы можно подразделить на две группы: консервативные и оперативные (22) .
К консервативным способам подготовки пробников относятся: подвязывание самцам фартука, обработка тестостероном или тестостероном всочетании с эстрадиолом (андрогенезированные животные), пробник с метчиком.
Разработана целая группа оперативных способов подготовки самцов-пробников, основным назначением которых является предотвращение способности самца осеменить самку. Оперативные способы подготовки пробников разделяются на две группы. Без сохранения способности к коитусу: пластическое перемещение пениса; подшивание пениса к апоневрозам брюшных мышц; сшивание S-образного изгиба пениса; иссечение мускула ретрактора пениса; пенэктомия; отделение части препуция от стенки живота; создание фистулы препуциального мешка; подшивание к тканям тела полового члена; сужение наружного отверстия препуция или блокирование пениса в препуциальном мешке с помощью устройства Пен-О-Блок;
С сохранением способности к коитусу: вазэктомия; эпидидэктомия; подготовка крипторхидов(73,76). Перечисленные способы подготовки имеют свои достоинства и недостатки, отличаются один от другого по сложности, трудоёмкости и влиянию на половую активность самца.
Из консервативных способов/ по данным зарубежных ученых, наиболее часто используют андрогенезированных самок (165,191).
Самками - выявительницами могут быть выбракованные нелактирующие коровы или овариоэктомированные тёлки и тёлки-фримартины, обработанные андрогенными и эстрогенными препаратами. При многократном введении андрогенных и эстрогенных гормонов у самок формируется половое поведение/ характерное другому полу. Они активно обнюхивают наружные половые органы коров и тёлок с признаками течки, полового возбуждения и охоты, прыгают на них. Эти признаки начинают проявляться у самок со второй-третьей недели от начала гормональной обработки(179,190). Нагрузка на выявительницу с метчиком составляет 30-40 коров или тёлок.
Данные литературы об эффективности такого способа выбора времени осеменения у коров и тёлок неоднозначны. По материалам одних авторов, его эффективность составляет 84-95 %, других - только 23-51,5% (26).
Имели место попытки использования в качестве пробников самцов-кастратов. С этой целью проводили обработку быков-кастратов андрогенными и эстрогенными гормонами, вызывая у них половое влечение и даже проявление совокупительного рефлекса на коров и тёлок с признаками охоты. Причём замечено, что возраст кастрированных животных не влияет на эффективность гормональной обработки (156).
По данным Е.А. Караваевой с соавт.(49), В.Е. Соколова(119), у быков-кастратов, обработанных половыми гормонами, не регистрируется агрессивное поведение, и они безопасны в обращении. Вместе с тем они менее эффективно определяют охоту у коров и тёлок, чем некастрированные быки-пробники. Эффективность метода составляет 79,0%.
Как отмечает А.Я. Краснитскии{63), оперативные способы подготовки пробников более эффективны.
Из всех многочисленных способов подготовки пробников вазэктомия является самой простой и быстро выполнимой операцией, доступной в условиях любого хозяйства. Самец сохраняет способность к половому акту, но оплодотворения не наступает, так как эякулят содержит только секреты придаточных желез. В физиологическом отношении вазэктомированные самцы - лучшие пробники, так как сохраняют способность к коитусу. При их использовании у самок нормально проявляются все процессы, связанные с актом спаривания, благодаря чему укорачивается половая охота, ускоряется процесс овуляции, усиливаются моторика матки и другие функции, что и обусловливает повышение оплодотворяемости самок (146). Впервые эту операцию описал А.Я. Краснитскии (63), предложивший делать два разреза на задней стороне шейки мошонки.
Половая активность вазэктомированных быков сохраняется довольно долго, а роль их как активных стимуляторов половой функции у коров и тёлок огромна(82,98,141, 86, 39,138,83,110,11,36).
В 1955 г. В. Я. Андреевский и Розенберг разработали способ, заключающийся в удалении хвоста придатка семенника. Такие быки успешно выполняли функцию пробников-стимуляторов до четырёх лет (7). В качестве пробников, способных к половому акту, можно использовать также самцов-крипторхидов. Оплодотворения после такого полового акта не происходит, так как в половые органы самок попадают только секреты придаточных половых желез(154).
По сообщению Р.А. Васильева, Т.Р. Лещенко(24), быки-крипторхиды имели хорошую половую активность, ярко проявляли половые рефлексы. При исследовании эякулятов, полученных от крипторхидов на искусственную вагину, установили аспермию.
Разработка способа подготовки самца-пробника у нут рий
Для рациональной организации воспроизводства животных необходимы детальные знания морфологических и функциональных особенностей половой системы. В существующих руководствах строение и топография органов размножения нутрий изложены недостаточно полно
К органам размножения самцов нутрий относятся: семенники,придатки семенников, спермиопроводы, мочеполовой канал, придаточные половые железы (предстательная, пузырьковидные, луковичные и уретральные), половой член, препуций (рис. 1).
Мошонка (Scrotum) отсутствует. Общая влагалищная оболочка представляет собой мощное мешковидное образование с хорошо развитым мышечным слоем. В области наружного пахового кольца она прикреплена к брюшной стенке и имеет свойство вворачиваться в брюшную полость через широкие паховые кольца и короткий паховой канал вместе с семенником и его придатком. В месте перехода в специальную оболочку семенник с придатком тесно соединены переходной связкой с общей влагалищной оболочкой в области её мешковидно выпяченной верхушки. В крайнем каудальном положении семенник в полости общей влагалищной оболочки располагается под кожей в области наружного пахового кольца и легко прощупывается. Терморегулирующую функцию выполняет находящийся между кожей и общей влагалищной оболочкой мощно развитый слой подкожный жировой клетчатки. Семенник (Testis) - парный паренхиматозный орган, выполняющий гормональную и генеративную функции. Семенники имеют яйцевидную форму, расположены почти горизонтально, длиной 3,1+0,9 см, шириной 2,4+0,7 см. Масса колеблется от 4,3 до 7,0 г. На поверхности семенников отчётливо видны мелкие кровеносные сосуды. Семенник - это сложно ветвящаяся трубчатая железа. Снаружи он покрыт собственной влагалищной оболочкой, под ней располагается белочная оболочка, которая, внедряясь внутрь, образует средостение семенника - Гайморово тело. От средостения радиально расходятся трабекулы, разделяющие семенник на множество долек. В каждой из этих долек слепо начинается от 3 до 5 семенных канальцев. Между канальцами расположены интерстициальные или клетки Лейдига, богатые цитоплазмой.
В этих клетках образуются мужские половые гормоны андрогены. Стенка извитых канальцев состоит из соединительнотканного и эпителиального отделов (рис.2). Последний представлен сертолиевым синцитием (клетками Сертоли), в выростах цитоплазмы которого происходит развитие спермиев (рис.3) В функционирующем извитом канальце спермиогенный эпителий располагается 3-7 рядами. Каждый последующий ряд по направлению от мембраны к просвету канальца соответствует определённой стадии деления спермиогенного эпителия. Извитые канальцы по направлению к средостению семенника суживаются, переходят в прямые канальцы и образуют сеть семенника. Прямые канальцы служат выводными протоками и выстланы однослойным кубическим эпителием.
Придаток семенника (Epididimis testis) прикрепляется к латеральной поверхности семенника.
Придаток семенника состоит из головки, тела и хвоста. Чётких анатомических границ между этими частями нет.
Головка придатка семенника располагается у переднего полюса семенника, образована 13-14 семявыносящими канальцами, которые сливаются в один канал придатка семенника. Канал придатка семенника, сильно извиваясь, формирует тело и хвост придатка. Наибольший диаметр канала придатка семенника (1 мм) в области хвостовой части. Видовой особенностью является то, что головка и тело придатка располагаются на достаточно большом расстоянии от семенника (7-10 мм), соединяясь с семенником специальной связкой. В брыжейке семенника находится значительное отложение жира, выполняющее терморегулирующую функцию.
Тесное прилегание компактно расположенных многочисленных петель хвоста придатка семенника к общей влагалищной оболочке обеспечивает постоянное нахождение его за пределами брюшной полости независимо от расположения семенников которые мигрируют в брюшную полость и в полость общей влагалищной оболочки с выходом последней под кожу.
Канал придатка имеет извилистый ход, поэтому на срезе он представлен большим числом канальцев поперечного и косого сечения. Эпителий придатка состоит из клеток двух видов. Однослойные двурядные железистые (псевдомногослойные), представляющие собой столбчатые секреторные клетки. У этих клеток овальные ядра, расположенные на одном уровне от базальной мембраны. Клетки другого типа - кубические. Их ядра находятся рядом с базальной мембраной, они круглые и образуют свой ряд ядер. Эти клетки называются базальными. Снаружи от базальной мембраны лежит соединительнотканный слой. Гладкомышечные клетки и соединительная ткань формируют единый слой. Семенной канатик (Funiculus spermaticus) отсутствует.
Спермиопровод (Ductus deferens) начинается от хвоста придатка и направляется к дорсальной поверхности мочевого пузыря. Параллельно спермиопроводам проходят на расстоянии 1,5 см кровеносные сосуды и нервы в составе брыжейки семенника. Длина спермиопровода 12,3±0,2 см, диаметр 1-2 мм. Спермиопроводы сливаются в один эякуляторный проток и объединяются с протоками пузырьковидных желез, в дальнейшем при слиянии с мочевым каналом формируется уретра, которая проходит в вентральном жёлобе тела полового члена. Снаружи спермиопровод покрыт серозной оболочкой, под которой располагаются продольный и кольцевой слои гладкой мускулатуры. Слизистая оболочка спермиопровода покрыта в начальной части двурядным мерцательным, а затем однорядным призматическим эпителием (рис.4). Полотой член (Penis) - орган совокупления длиной 14,5±0,5 см, диаметром 7-8 мм, состоит из корня, тела и головки. Корень (Radix) полового члена состоит из двух прикрепляющихся к седалищным буграм мышечных ножек, внутри которых находятся мощные кавернозные тела. Тело (Corpus) образует U-образный изгиб, из-за чего головка полового члена направлена каудально в сторону анального отверстия. Во время эрекции U-образный изгиб расправляется, головка пениса выходит за пределы препуция, и отклоняется в сторону головы самца под острым углом к сагиттальной линии. На поперечном разрезе тела полового члена отчетливо видны белочная оболочка, пещеристое тело полулунной формы, в вентральном желобе расположена уретра, которая имеет собственное кавернозное тело.
Использование оперированных самцов ' с целью изучения стадии возбуздения полового цикла у самок
Знание полового цикла необходимо для организации и ведения контролируемого и регулируемого воспроизводства стада. В литературе имеются данные о выявлении стадий полового цикла у нутрий при помощи лабораторных методов. Так, О.Щелещук(155) установила взаимосвязь стадий полового цикла и цитограммы влагалищного эпителия. Мы в своем опыте поставили задачу выявить закономерность между цитограммои влагалищного эпителия (слизи) и реакции самки на самца в разные периоды стадии возбуждения полового цикла, а также изучить время овуляции.
Для опыта сформировали группу из 10 самок стандартной породы в возрасте восьми месяцев. Ежедневно самки имели контакт с самцом-пробником по 2 часа утром и вечером.
За животными вели ежедневные клинические наблюдения. При первых признаках течки и далее с суточным интервалом до конца стадии возбуждения, затем на 13-й день полового цикла у самок брали влагалищную слизь, из которой делали мазки-отпечатки, фиксировали, и окрашивали по Паппенгейму. Цитограмму рассчитывали, исходя из 100 клеток, принимая во внимание базальные, парабазальные, суперфициальные неороговевшие и ороговевшие клетки. Кроме того, изучали морфологию нейтрофильных лейкоцитов и подсчитывали их количество, приходящееся на 100 клеток цитограммы. Обращали внимание на характер расположения прожилок слизи относительно друг друга.
В стадию торможения и уравновешивания животные большую часть дня спокойно бодрствовали или находились в полудремотном состоянии. Увеличение активности наблюдалось только во время кормления. В присутствии самца-пробника самки издавали угрожающие звуки, при приближении самца, огрызались, старались убежать.
Цитограмма влагалищного эпителия в стадию покоя (уравновешивания) была следующей; клетки глубоких слоев -базальные (рис.20), имеющие округлую форму, крупное, богатое хроматином ядро, и равномерно , окрашенную цитоплазму в виде узкой полоски между ядром и оболочкой клетки - 25,2%; клетки средних слоев - парабазальные, крылатые (рис.21) , имеющие овальную форму, несколько меньшее по сравнению с базальными клетками ядро и более широкую полоску равномерно окрашенной цитоплазмы с выростами - 51,4%; клетки поверхностных слоев, обладающие способностью к адсорбции - суперфициальные неороговевшие (рис.22) - 22,0%; ороговевшие клетки поверхностных слоев -чешуйки (рис.23), не имеющие ядер, окрашивающиеся в неравномерный розовый цвет - 1/4%.
Первые признаки стадии возбуждения у самок были мало заметны. Можно отметить незначительное увеличение двигательной активности некоторых самок, cлабое беспокойство. Некоторые самки старались уединиться. При наружном осмотре таких самок отмечалось клиническое проявление начала течки: слабый, зачастую едва заметный А отёк половых губ (незначительное увеличение петли), небольшое выделение прозрачной слизи, вульва становилась увлажненной, однако гиперемия половых губ и слизистой оболочки преддверия влагалища при этом отсутствовала. Эти признаки появлялись в среднем за 2-3 суток до начала охоты.
Цитограмма влагалищного эпителия была следующей: клетки глубоких слоев (базальные) - 12,2%; клетки средних слоев (парабазальные, крылатые) - 15,8%; клетки поверхностных слоев (суперфициальные неороговевшие) -46,4%; суперфициальные ороговевшие клетки (чешуйки) -25,6%. На 100 эпителиальных клеток приходилось несколько (3-7) сегментоядерных нейтрофильных лейкоцита (рис.24). Тяжи слизи окрашивались в бледнорозовый цвет и располагались беспорядочно относительно друг друга (рис.25).
В этот период самец-пробник становился активнее, обнюхивал воздух вокруг самок, их половые органы, настойчивые ухаживания самца проявлялись характерными прикосновениями и призывными звуками. Самка, к которой .— самец проявлял настойчивый интерес, вела себя беспокойно, издавала характерные громкие звуки, старалась убежать от самца.
На следующие сутки (через 24 часа) наряду с незначительным увеличением отёка половых губ отмечалась слабая гиперемия преддверия влагалища. Вульва была увлажненной, выделение прозрачной слизи наружу.
Самец-пробник при этом настойчиво ухаживал за самкой. Самка благосклонно реагировала на прикосновения самца, издавала громкие протяжные звуки, но коитус не допускала, отбегала от самца. Такие признаки наблюдались за 24-30 часов до начала охоты. Цитограмма влагалищного эпителия: клетки глубоких слоев (базальные) - 6,2%; клетки средних слоев (парабазальные, крылатые) - 10,0%; клетки поверхностных слоев (суперфициальные неороговевшие} - 47,4%; суперфициальные ороговевшие клетки (чешуйки) - 36,4% (рис.26). На 100 эпителиальных клеток насчитывали 25-30 сегментоядерных нейтрофильных лейкоцитов с чётко выраженными ядрами и равномерно окрашенной цитоплазмой.
Тяжи слизи окрашивались в более интенсивный розовый цвет и располагались более упорядоченно относительно друг друга.
Спустя сутки у самки отмечался небольшой отёк вульвы, обильное увлажнение прозрачной (у некоторых самок слегка мутноватой) слизью. В области преддверия влагалища в небольшом количестве скапливается слизь в виде небольшого слизистого тяжа. Слизистая оболочка преддверия влагалища гиперемирована (розового, у некоторых самок ярко-розового цвета).
Цитограмма: клетки глубоких слоев (базальные) -2,0%; клетки средних слоев (парабазальные, крылатые) 4,4%; клетки поверхностных слоев (суперфициальные неороговевшие) - 45,2%; ороговевшие клетки поверхностных слоев (чешуйки) - 48,4%. На 100 эпителиальных клеток в этот период насчитывали 55-60 нейтрофильных лейкоцитов, в отдельных из них ядра фрагментированы, распавшиеся; в других имеются включения. Слизистые тяжи окрашиваются в интенсивно-розовый цвет, располагаются параллельно друг ДРУГУ (рис.27}. При приближении самца-пробника самка благосклонно относилась к ухаживаниям/ позволяла обнюхивать и вылизывать наружные половые органы; стоя на четырех конечностях, она приподнималась на задних лапах, отводила в сторону хвост, принимая характерную позу, допускала коитус. Таким образом, охота характеризовалась, как правило, интересом к самцу-пробнику готовность к коитусу.
Цитограмма влагалищного эпителия спустя сутки после коитуса: ядра и цитоплазма парабазальных и суперфициальных неороговевших клеток вакуолизированы, неравномерно и слабо окрашены, границы их нечётко выражены (рис.28); ядра большинства нейтрофильных лейкоцитов распались на глыбки, слабо окрашены, базальные клетки не встречаются (рис.29). Слизь в мазке располагается в виде компактной массы (отдельные тяжи неразличимы) интенсивно-розового окрашивания.
Овуляцию изучали путем убоя самок через 8, 10, 12, 15, 18, 20, 24, 26 часов после коитуса; совокуплений, как правило, было 3-4 с 10-15-минутным интервалом. Через 8 и 10 часов после коитуса в обоих яичниках овулировавших фолликулов не обнаружено.
Через 12 часов после коитуса отмечено: в правом яичнике один овулировавший фолликул (геморрагический фолликул), в левом - не обнаружено
Использование оперированных самцов с целью стимуляции репродуктивной функции самок
Одной из причин бесплодия животных, особенно ремонтных самок, является недоразвитие половых органов, низкая их физиологическая активность вследствие отсутствия естественных раздражителей, одним из которых является самец (31).
Всё это указывает на необходимость совместного содержания ремонтных самок с самцами, а во избежание ранней, нежелательной беременности с оперированными самцами (пробниками).
Для изучения влияния на органы репродуктивной системы ремонтных самок самца-пробника, подготовленного способом эпидидимитомии, провели опыт. Сформировали две группы животных стандартной породы: опытную и контрольную. В опытную группу включили 6 самок четырёхмесячного возраста живой массой 2,300-2,500 кг и оперированного самца в возрасте 6 месяцев (через месяц после операции). В контрольную группу - шесть самок такого же возраста без самца-пробника. Обе группы содержались в одинаковых условиях. Спустя четыре месяца всех самок опытной и контрольной групп убили для макроморфологических исследований органов воспроизводительной системы, обобщённые результаты которых приведены в таблице 5.
Анализируя материалы таблицы, установили, что общая масса .половых органов опытных самок по сравнению с контролем бьша на 2,1 г больше (Р 0,001). Длина преддверия влагалища самок опытной группы больше по сравнению с контрольной группой в среднем на 1,0 см (Р 0,05), длина влагалища больше на 1,25 см (р 0,05), длина шейки матки -на 0,44 см (р 0,001), длина рогов матки - на 1,27-2,25 см (р 0,05), общая длина матки -на 1-1,16 см (р 0,05).
Во время убоя были отобраны правый и левый яичники, кусочки тканей для гистологического исследования из средней части правого и левого рогов матки и средней части влагалища.
Согласно данным таблицы 6, большинство морфометрических показателей у подопытных самок были достоверно большими (Р 0,05) по сравнению с аналогичными показателями у контрольных животных: число первичных фолликулов в одном поле зрения микроскопа в 1,38 раза, как в правом, так и в левом яичнике; высота эпителия рогов mматки в 1,4 , диаметр и высота эпителия маточных желез в 1,2-1,36 (рис.32-35). Это увязывается с результатами макроморфологического исследования репродуктивных органов подопытных и контрольных самок и свидетельствует о том, что совместное выращивание ремонтных самок с самцом- пробником положительно влияет на развитие их репродуктивной системы. 2.4.2. Гематологические показатели самок, содержавшихся с эпидидимитомированным самцом
Наряду с морфологическими исследованиями половых органов ремонтных самок ставили задачу изучить показатели морфологического и биохимического состава крови, уровня резистентности организма самок нутрий, содержавшихся с эпидидимитомированным самцом в течение четырёх месяцев. Для опыта подобрали 12 самок стандартной породы четырёхмесячного возраста аналогичных по массе тела и развитию, из которых сформировали две группы: опытную и контрольную по шесть голов в каждой. К самкам опытной группы посадили эпидидимитомированного самца семимесячного возраста. Самки контрольной группы содержались в аналогичных условиях без самца.
Через четыре месяца убили самок опытной и контрольной групп, во время убоя отобрали пробы крови, в которой определили число эритроцитов и лейкоцитов, лейкограмму, содержание гемоглобина; в сыворотке крови - уровни фосфора, кальция, резервную щелочность, щелочную фосфатазу, содержание общего белка и его фракций (табл. 7,8).
Из материалов, представленных в таблице 7, следует, что у самок, содержавшихся совместно с самцом-пробником, достоверно выше чем у животных контрольной группы содержание эритроцитов (р 0,001), уровень гемоглобина (р 0,001). Структура лейкограммы подопытных и контрольных животных не имела существенных различий (р 0,05). Уровни кальция, щелочной фосфатазы, а-глобулинов у подопытных и контрольных самок близки (р 0,05).
Согласно данным таблицы 8, показатели резервной щёлочности (р 0,05), общего белка (р 0,05), кальция (р 0,001), р- (р 0,001) и у глбулинов (р 0,001) в крови подопытных самок достоверно выше по сравнению с таковыми в контроле. Уровни фосфора, щелочной фосфатазы, альбуминов и а-глобулинов в крови подопытных и контрольных самок близки (Р 0,05).
