Введение к работе
Актуальность проблемы. Туберкулез крупного рогатого скота во многих странах мира и Российской Федерации остается одной из наиболее сложных проблем инфекционной патологии, наносит значительный экономический ущерб неблагополучным хозяйствам, владельцам животных и представляет большую опасность в заражении людей. Против туберкулеза нет достаточно эффективных средств специфической профилактики и лечения.
Применение вакцины БЦЖ в общем комплексе противотуберкулезных мероприятий позволяет сократить сроки оздоровления ферм с меньшими материальными затратами, однако при этом создаются определенные трудности в оценке постинфекционных и поствакцинальных туберкулиновых реакций на взрослом скоте, что сдерживает оздоровление неблагополучных пунктов ограничивает возможность создания у животных перманентного противотуберкулезного иммунитета. Проблема оздоровления ферм от туберкулеза крупного рогатого скота остается сложной (А.С. Донченко, 1995; М.А. Сафин, 2001; Н.М. Колычев с соавт., 2007, 2010; Н.А. Донченко, 2008; А. Х. Найманов, 2009; Н.П. Овдиенко, А.Х. Найманов, Н.Г. Толстенко с соавт., 2009).
Одно из направлений, которое многие эксперты определяют как наиболее перспективный путь к победе над туберкулезом – это создание эффективных средств специфической профилактики и лечения. Развитие средств иммунологической защиты людей и животных идет по нескольким направлениям: продолжаются поиски в области традиционного вакцинного дела; создание искусственных вакцинных макромолекул, не имеющих аналогов в природе; регуляция иммунологической реактивности с помощью неспецифической стимуляции; другие работы посвящены созданию препаратов иммуностимулирующей, иммуномодулирующей активности и адъювантных свойств синтетических и естественных средств (Р.В Петров, Р.М. Хаитов, В.М. Манько, А.А. Михайлов, 1981; В.А. Кабанов, Р.В. Петров, Р.М. Хаитов, 1982; K. Masini, W. Brehmer, W. Zange et al., 1985 Р.Ю. Романова, 1992; Р.В. Петров, Р.М. Хаитов, В.И. Литвинов с соавт., 2000; М.А. Бажин, В.В. Шамов, В.Г. Ощепков с соавт., 2003; П.Н. Сисягин с соавт., 2007; Ф.П. Петрянкин, 2009).
Известно, что иммунная система является первой мишенью при воздействии на организм вредных факторов физического, химического, биологического генеза. В отличие от этого, патогенные микроорганизмы, условно патогенная микрофлора, обладают уникальной способностью к изменчивости и адаптации, могут повышать свою вирулентность, способность преодоления естественных защитных барьеров. Названные факторы влияют на становление иммунной системы на ранних этапах онтогенеза, обусловливая у плода и новорожденного нарушение в ней, сопровождающиеся снижением иммунного ответа, развитием толерантности, иммунодефицитных состояний (Ю.Н. Федоров, 1996; К.А. Лебедев, И.Д. Понякина, 2003; И.М. Донник, 2001,2003).
В связи с этим проблема регуляции и восстановления защитных функций организма при заболеваниях и воздействии дестабилизирующих факторов окружающей среды на основе специфических иммуномодулирующих средств является одной из актуальных проблем ветеринарной медицины.
Цель исследований – разработать технологию изготовления иммуномодулирующего средства на основе антигенного комплекса БЦЖ и полиэлектролитов.
Для достижения цели поставлены задачи:
- разработать технологию изготовления специфического иммуномодулятора на основе антигенов микобактерий и поливинилпирролидона (ПВП);
- отработать методику оценки способности иммуномодулирующих средств восстанавливать у животных утраченную иммунологическую реактивность;
- изучить иммуномодулирующие и протективные свойства препаратов на морских свинках и молодняке крупного рогатого скота;
Научная новизна. Разработана новая технологическая схема получения специфического иммуномодулятора микробного происхождения (КИМ-М). Оптимизированы условия выделения антигенного комплекса из вакцинного штамма БЦЖ, условия инкубации с раствором формальдегида и конъюгации с неприродным полиэлектролитом (ПВП). Определены иммуномодулирующие и протективные свойства препарата на морских свинках и молодняке крупного рогатого скота и дана оценка КИМ-М на способность восстанавливать у животных иммунологическую реактивность устранять вторичные иммунодефициты, усиливать протективные свойства вакцины БЦЖ.
Разработан новый метод оценки иммуномодулирующих свойств известных и вновь синтезируемых биологических препаратов на толерантных морских свинках, который предпочтительно использовать как более точный и экономически выгодный. Индуцирована иммунологическая толерантность у морских свинок к ППД туберкулину для млекопитающих и разработана методика восстановления реактивности с помощью иммуномодулирующих средств.
Теоретическая и практическая ценность работы. Теоретически обоснованы методы оценки способности иммуномодулирующих свойств препаратов восстанавливать у животных утраченную иммунологическую реактивность.
Разработаны рекомендации «Методы оценки иммуномодулирующих препаратов» (Утв. Ученым советом ГНУ ВНИИБТЖ, протокол № 11 от 28 декабря 2009; секцией «Инфекционная патология» Россельхозакадемии протокол № 2 от 19 апреля 2010).
Получен патент на изобретение № 2366455 Российская Федерация, МПК А61К 39/04, С12N 1/20, C12R 1/32. «Способ получения специфического иммуномодулятора» от 10.09.2009 г. Полученный специфический иммуномодулятор способен восстанавливать у животных утраченную иммунологическую реактивность, устранять вторичные иммунодефициты, усиливать протективные свойства вакцины БЦЖ.
Апробация полученных результатов. Материалы диссертации доложены и обсуждены на заседаниях ученого совета ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии (2007-2010), Всероссийской научно-практической конференции «Современные проблемы диагностики и профилактики хронических зооантропонозных инфекций» (Омск, 2009), X Международной научно-практической конференции «Теоретические и прикладные аспекты диагностики и профилактики болезней животных» (Омск, 2010).
Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 8 научных работ, из них 4 статьи в ведущих научных изданиях, рекомендованных ВАК Минобразования РФ («Ветеринарная патология», «Сибирский вестник сельскохозяйственной науки», «Достижения науки и техники АПК», Научно-практический журнал «Интеллектуальная собственность (перспективные российские разработки)»), методические рекомендации.
Объем и структура диссертации. Работа изложена на 116 страницах компьютерного набора и включает: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждения полученных результатов, заключение, выводы, практические предложения и приложение. Список литературы включает 200 работ, в том числе 160 отечественных и 40 зарубежных авторов. Диссертация иллюстрирована 14 таблицами, 8 рисунками.
