Содержание к диссертации
Стр.
ВВЕДЕНИЕ 5
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 9
Краткие сведения о биологическом действии ионизирующих излучений на организм 9
Закономерности развития пострадиационного костномозгового синдрома в организме 13
2.3. Средства патогенетической терапии острой лучевой болезни с
преимущественным поражением костномозгового кроветворения 27
3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 41
3.1. Материалы и методы исследований 41
Материалы 41
Методы исследований 42
4. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 45
4.1. Теоретическое обоснование и отбор оптимальных методов оценки
эффективности потенциальных противолучевых лечебных
средств in vitro 45
4.1.1. Оценка цитокининдуцирующей активности ВЗП, ВМП и ВФП
в in vitro тест-системе 53
4.1.2. Оценка противолучевой эффективности цитокинстимулирован-
ных сывороток и индукторов цитокинов в in vitro тест-системе... 58
4.1.3. Изучение радиотерапевтической эффективности
отобранных средств на лабораторных животных 65
4.2. Испытание лечебных свойств гемостимулированной сыворотки
и фитопрепарата «Эра-Н» на летально облученном мелком
рогатом скоте 94
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ ПО
ВЫВОДЫ 127
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ 129
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 130
Введение к работе
Актуальность темы. Глобальное загрязнение радионуклидами биосферы, вредные последствия радиационных воздействий на организм, перспективы дальнейшего усиления радиоэкологического кризиса, все это ставит проблему противолучевой защиты в число важнейших задач современной биологии и медицины (Кудряшов Ю.Б., 1998). Особую актуальность эта проблема приобрела после Чернобыльской радиационной катастрофы, которая сделала ее одной из основных для ветеринарной радиобиологии.
Полувековые исследования в области разработки методов и средств противорадиационной защиты (Владимиров В.Г. с соавт., 1978, 1989, 1997; Васин М.В. с соавт., 1998, 2004; Киршин В.А., 1998; Сургучева Л.М., Бударков В.А., 1998; Конюхов Г.В. и др., 2005; Thougon J.F., 1962; Racq Z.M., 1965, 1975 и др.) привели к созданию лишь нескольких разрешенных медициной и ветеринарией препаратов от острой лучевой болезни из многих тысяч соединений, снижающих радиобиологический эффект живых систем.
В последние годы при изучении различных аспектов механизма противолучевого действия, отечественными исследователями (Клемпарская Н.Н., Киршин В.А., Бударков В.А. 1991; Зенкин А.С., 2003; Низамов Р.Н., Тарасова Н.Б. и др., 2004) наметились новые перспективы в области терапии радиационных поражений - использование иммуномодуляторов - веществ из классов зоогенной и микробной природы, обеспечивающих повышение радиорезистентности организма в условиях летального облучения. Механизм радиозащитного действия этих препаратов до сих пор окончательно не выяснен. Р.С.Будагов, Л.М.Ульянова (2001, 2004, 2005) полагают, что радиозащитное действие таких препаратов связано со способностью индуцировать ими в организме медиаторы гемо- и иммунопоэза (интерлейкины, интерферон и т.д.), оказывающих гемо- и иммунорегулирующий эффект, обеспечивая преодоление панцитопении и миелосупрессии , повышая, тем самым, выживаемость летально облученных
6 в костномозговом диапазоне доз животных. Следовательно, помимо
дефицита стволовых клеток костного мозга (СКК) при остром радиационном
поражении, имеет место дефицит цитокиновой системы, а использовании
самих цитокинов или их индукторов, ведет к существенному повышению
выживаемости летально облученных животных. Однако эти исследования
проведены, в основном, на лабораторных животных., а данные о
радиозащитном действии индукторов цитокинов в литературе отсутствуют.
Поэтому для расширения арсенала радиозащитных средств и в соответствии с заданием МСХ РФ предприняты исследования по изысканию таких средств из класса индукторов цитокинов.
Цель и задачи исследований. Целью настоящих исследований является изыскание противолучевых средств из класса индукторов цитокинов.
В соответствии с целью и государственной темой: «Разработка средств защиты от радиационных поражений животных» (№ Госрегистрации 01990003332), были поставлены следующие задачи:
1. Провести скрининг потенциальных радиозащитных препаратов
зоогенной, микробной и фитогенной природы по критерию
цитокининдуцирующей активности их in vitro тест-системе.
2. Изучить коррелятивную зависимость между цитокининдуцирующей
активностью препаратов и выживаемостью облученных лимфокинов in vitro.
Изучить радиозащитную активность отобранных препаратов на лабораторных животных.
Изучить возможность усиления радиозащитной эффективности препаратов при их сочетанном применении.
5. Испытать радиозащитную эффективность отобранных препаратов и
их комбинаций на с.-х. животных.
Научная новизна. Впервые теоретически обоснована и практически подтверждена возможность использования средств из класса индукторов цитокинов зоогенного, микробного и фитогенного происхождения для
лечения животных при ОЛБ. Для первичной оценки цитокининдуцирующей активности отобрана оптимальная тест-система, обеспечивающая экстренное определение содержание медиаторов иммуногемопоэза в условиях ex vivo. Впервые изучено радиозащитное действие индукторов цитокинов и цитокинстимулированных сывороток. Получены новые данные о механизме радиозащитного действия гемостимулированной сыворотки. Установлена возможность усиления радиозащитной активности гемостимулированной сыворотки и уменьшения её лечебных доз с помощью «Эра-Н» и «Вита-Форце». В опытах на лабораторных и с.-х. животных установлен высокий терапевтический эффект гемостимулированной сыворотки и препарата «Эра-Н», обеспечивающие 60-75%-ную защиту при костномозговой форме ОЛБ.
Практическая ценность. На основе сравнительного изучения эффективности различных индукторов цитокинов предложена лечебно-профилактическая гемостимулированная сыворотка и способ повышения эффективности препарата путем сочетанного применения его с фитоадаптогеном - «Эра-Н». По результатам исследований разработана «Инструкция по применению лечебно-профилактического иммуноглобулина для коррекции неинфекционных и инфекционных иммунодефицитов животных», утв. в установленном порядке.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту.
1.Скрининг потенциальных радиозащитных препаратов по способности их индуцировать гемо- и иммунорегуляторы - цитокины in vitro.
Эффективность цитокинстимулированных сывороток при острой лучевой болезни.
Способ повышения эффективности радиозащитных препаратов при их сочетанном применении.
Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и одобрены на научных сессиях ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» по итогам НИР за 2004-2006 гг., на Всероссийских научно-производственных и практических конференциях (г. Казань, 2004-2006 гг., Воронеж, 2000.), на Международном
симпозиуме по обеспечению защиты животных от экотоксикантов и радионуклидов (Казань, 2005). Результаты основных этапов разработок подтверждены внутри-лабораторными комиссионными испытаниями с положительной оценкой.
Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 9 научных работ, в том числе рекомендованных ВАК РФ «Ученых записках КГАВМ им. Н.Э. Баумана» и в журнале «Ветеринарный врач».
Объем и структура диссертации. Материалы диссертации изложены на 150 страницах компьютерного текста, включающие введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы и практические предложения. Список использованной литературы включает 269 работ, в том числе 36 зарубежных авторов. Диссертация иллюстрирована 19 таблицами и 3 рисунками.
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
