Содержание к диссертации
1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ 4
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2.1. Современное состояние проблемы пробиотиков и механизм их действия 8
2.2. Применение бактериальных препаратов в качестве радиозащитных средств 28
3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 40
3.1 Материалы и методы исследований 40
3.1.1. Материалы 40
3.1.2. Методы исследований 41
4. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 43
4.1. Скрининг иммунопробиотических препаратов по способности индуцировать ими интерферон 43
4.2. Выбор оптимального метода применения пробиотиков для изучения их радиозащитных свойств на животных 55
4.2.1 Оценка радиозащитной активности отобранных пробиотиков на белых мышах 59
4.3. Оценка радиозащитной активности отобранных пробиотиков на белых крысах 61
4.3.1. Оценка радиозащитной активности отобранных пробиотиков на морских свинках и кроликах 64
4.3.2. Изучение продолжительности радиорезистентности у животных на фоне применения бифидумбактерина 70
4.3.3. Изучение формирования радиорезистентности у сельскохозяйственных животных на фоне применения бифидумбактерина
5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ 96
6. ВЫВОДЫ 108
7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ 109
8. СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ ПО
Введение к работе
Актуальность темы. Полувековые исследования в области разработки радиозащитных средств (Владимиров В.Г. и др., 1978,1989,1997; Васин М.В. и др., 1998, 2004; Киршин В.А., 1998; Сургучева Л.М., Бударков В.А., 1998; Зенкин А.С., 2003 и др.) привели к созданию лишь нескольких разрешенных медицинских и ветеринарных препаратов от острой лучевой болезни.
Ведя целенаправленный поиск радиопротекторов в классе веществ микробного происхождения, сотрудниками ФГУ «ФЦТРБ - ВНИВИ» был разработан биорадиопротектор - микробный полиантиген, обеспечивающий пролонгированную (до 90 сут) защиту животных от летального облучения (Конюхов Г.В., Низамов Р.Н., 2001). Однако, достаточный уровень защиты (70%) у иммунизированных указанным препаратом животных формируется не раньше, чем через 13-14 сут, что не удовлетворяет требованиям ветеринарной науки и практики. Одним из перспективных направлений поиска новых средств для экстренной профилактики лучевой болезни является использование пробиотических бактерий, обладающих широким спектром действия, включая цитокининдуцирующую, антирадикальную и антиинфекционную защиту, гемо- и иммунорегулирующую активность (Зинченко Е.В., Панин А.Н., 2000). По литератрным данным некоторые пробиотические бактерии (бификол, биоспорин), а также убитые культуры лактобацилл, введенные однократно подкожно за несколько часов и суток до облучения, повышали выживаемость мышей на 60-80% (Бижанов Б.Р., 1991; Степанов А.В. и др., 1997; Жолус Р.Б. и др., 1997; Будагов Р.С. и др., 1997), проявляя тем самым эффект «ранней (экстренной) иммунизации». При этом механизм радиозащитного эффекта пробиотиков авторы связывают с индукцией ими цитокинов, осуществляющих регуляцию гемо-и иммунопоэза, однако эти исследования проведены только на лабораторных животных и при поражениях организма в дозах ЛД70/30. Учитывая изложенное, поиск биопротекторов среди веществ микробного происхождения, представляется актуальной проблемой ветеринарной радиобиологии.
1.2. Цель и задачи исследований.
Целью настоящих исследований явилось изыскание радиозащитных средств среди веществ микробного происхождения (ВМП). В соответствии с целью и государственной темой «Разработка высокоэффективных лечебно -профилактических средств при радиационных поражениях с.-х. животных», были поставлены следующие задачи:
1. Провести скрининг радиозащитных препаратов в модельных опытах.
2. Изучить радиозащитную активность отобранных пробиотиков на лабораторных животных.
3. Оценить радиозащитную активность отобранных пробиотиков на сельскохозяйственных животных.
Работа выполнена в соответствии с тематическим планом федерального центра «Разработка высокоэффективных лечебно -профилактических средств при радиационных поражениях с.-х. животных», № госрегистрации 01990005332.
1.3. Научная новизна. Впервые теоретически обоснована и практически подтверждена возможность повышения радиорезистентности организма путём применения облученного бифидумбактерина. Впервые изучено радиозащитное действие бифидумбактерина на лабораторных и с.-х. животных и показана возможность применения его с профилактической целью при острой лучевой болезни путём подкожного однократного введения препарата за 1-10 сут до летального облучения. Для первичной экстренной оценки интерфероногенной активности индукторов синтеза медиатора отобрана оптимальная тест-система, обеспечивающая экстренное определение концентрации интерферона без использования вирусов.
1.4. Теоретическая ценность работы. Полученные данные указывают на фундаментальное значение состояния цитокиновой системы, участвующей в регуляции процессов гемопоэза и иммуногенеза, претерпевающих значительный дисбаланс при радиационном поражении и возможность защиты системы иммуногемопоэза при ОЛБ с помощью индукторов геморегуляторных цитокинов и интерферона. Выбранная модель оценки индукторов интерферона может быть использована для направленного поиска радиозащитных средств из различных классов.
1.5. Практическая значимость работы определяется тем, что на основании проведённых исследований предложен для внедрения в ветеринарную практику биологический радиопротектор - бифидумбактерин для профилактики острой лучевой болезни. По результатам исследований разработаны «Методические рекомендации по получению и применению облученного бифидумбактерина для экстренной профилактики острой лучевой болезни животных».
1.6. Основные положения, выносимые на защиту:
корреляция между интерфероногенной и радиозащитной активностью;
бифидумбактерин - индуктор медиатора межклеточного взаимодействия - интерферона;
- радиопротекторная эффективность бифидумбактерина при острой лучевой болезни животных.
1.7. Апробация работы. Основные положения диссертации доложены, обсуждены и одобрены на ежегодных научных сессиях учёного совета ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» по итогам НИР за 2003-2006 гг., на Всероссийских научно-производственных и практических конференциях (г. Казань, 2004 2005 гг., Воронеж, 2005г.), а также опубликованы в научно производственном журнале «Ветеринарный врач» (г. Казань, 2005 г.).
Результаты основных этапов работы подтверждены внутрилабораторными комиссионными испытаниями с положительной оценкой. 1.8. Публикация результатов исследований. Основные положения диссертации изложены в 6 научных работах, которые отражают содержание диссертации, в т.ч. в рекомендованных ВАК РФ «Учёных записках КГАВМ им. Н.Э. Баумана», а также опубликованы в научно-производственном журнале «Ветеринарный врач» (г. Казань, 2005 г.).
1.9. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 132 страницах компьютерного текста, содержит 22 таблицы и включает общую характеристику работы, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение полученных результатов, выводы и практические предложения. Список литературы включает 224 библиографических источников, в т.ч. 67 -зарубежных авторов.
