Введение к работе
Актуальность проблещи. Актуальность работы обусловлена нерешенностью проблемы противорецидивной терапии трехдневной малярии, что является одной из основных причин недостаточной эффективности противоэпидемических мероприятий в борьбе с ЭТОЙ инфекцией. До сих пор одним из наименее изученных вопросов современной маляриологии продолжает оставаться изучение тканевой фазы развития возбудителей малярии, хотя расшифровка закономерностей развития именно этих стадий лежит в основе рационализации радикального лечения и профилактики рецидивов.
Стабильность и прогностическая ценность являются основными гребованиями к "экспериментальным моделям. Они могут быть обеспечены только использованием моделей полного жизненного цикла, зключающего передачу возбудителя через переносчика. Имеющиеся читературные данные свидетельствуют, что адекватные экспериментальные модели полных жизненных циклов возбудителей малярии ?руппы "vivax" не разработаны (Wery,I968 ;К.іШе&-КепсііЧе& et a?.J975 ; Landau с соапт.,1979 ; Алексеев,1985,1986 ; Лысенко, [986,1988 ; Mors с соавт.,1988 ;Meij с соавт. ,1981,1985 и др.). известные ограничения моделирования инфекции на обезьянах обус-іавливают необходимость разработки экспериментальных моделей малярии грызунов.
Исследование многообразия взаимоотношений малярийных паразитов грызунов с позвоночными хозяевами и переносчиками продвигается сравнительно медленно ввиду трудности применения сравнительного анализа данных, полученных, как правило, на разных ;таммах каждого вида возбудителей, разных позвоночных хозяев и ітаммах комаров. Это привело к обильному накоплению очень разно-ючивых фактов, которые трудно сравнивать из-за отсутствия стандартизации моде-чей и методов исследования. Требуют регасния
- 2 -вопроси подбора оптимальных позвоночных хозяев, адаптированных к разним штаммам возбудителя и переносчика. Практически очень мало известно о влиянии хозяина на гаметогенез и на процесс постспорозоитного развития в печени. Наиболее разноречивы сведения в отношении сроков образования гаметоцитов, продолжительности их циркуляции в крови позвоночного хозяина, их морфофункционального созревания и гибели. Не-известна также динамика заражаемости комаров возбудителями малярии млекопитающих в связи с хронобиологией полового и бесполого развития возбудителя в позвоночном хозяине. Остаются неизвестными ведущие параметры и их взаимосвязи у позвоночного хозяина, определяющие не только эффективность заражения переносчика, но и его готовность к передаче возбудителя.
Весьма перспективным видом возбудителя для решения указанных вопросов является возбудитель малярии млекопитающих группы "vivax"-PlaSmocfiuYvv -уоьііі уоеіі , вызывающий в естественных условиях ocr рое и хроническое течение инфекции, воспроизводимое в эксперименте, массивную продукцию шизонтов в печени при острой инфекции, а также характеризующийся менее длительной спорогонией по сравнению d широко используемой моделью малярии, вызываемой P.&e>gftei . '
Цель и задачи исследования. Основной целью работы является разработка оптимальной технологии моделирования полного жизненного ЦИКЛІ возбудителя малярии грызунов (P.y.yoetii штамм 265ВУ) для создания моделей острой и хронической малярийной' инфекции in vivo И ІК VlthO
В соответствии с основной целью в работе решались следующие задачи:
- провести направленный поиск и осуществить сравнительную оценк;
разных позвоночных хозяев для подбора оптимального донора для эараже ния комаров в зависимости от хронобиологии бесполого и полового развития возбудителя;
- подобрать оптимальную взаимоадаптированную пару позвоночный
холлин - переносчик, тестируемую не только по заражаемости комаров,
- о -
но я по их готовности к передаче возбудителя;
определить роль ведущих параметров позвоночного хозяина в ін'.хиіь-взаимодействия з системе возбудитель - позвоночный хозяин - переноси:'.
расширить криобанк возбудителей малярии млекопитающих за счет криостоков Р.у.уоеЕіі с различными функциональными характеристиками и наработать стандартные партии криостоков для моделирования полного жизненного цикла этого возбудителя.
Научная новизна. Разработаны новые модели полного цикла возбуди теля малярии группы "viv&x "(P.y.yoetii) с использованием маловирулентного штамма, являвшиеся базовыми для проведения исследований но разработке подходов к расшифровке механизмов латенции при малярии.
Впервые предложена и апробирована модель полного цикла P.y.yoetii. с использованием в качестве позвоночного хозяина африканского гри зуна Mastomys nataten.sis - близкого к естественному хозяту. Доказана возможность использования этой модели для исследования разных типов постспорозоитного развития возбудителя в клетках печени.
На основании разработанного метода многофакторюго анализа взаимосвязей параметров позвоночного хозяина и переносчика осуществлена стабилизация н определена прогностическая ценность наиболее вэаимо-адаптироаанной модели P.y.yoeEii - AYi.$tef>tUn.si ВА$ЕЬ - аутбредные мыши МБК-3 для воспроизведения полного цикла.
Выявлено, что критерием оптимальной взаимоадаптации в системе ль-ляется' прямая коррелятивная взаимосвязь гаметоцитемии (на оптимуме заражавшего кормления комаров) со спорозоитным, но не ооцистным индексом.
Практическая значимость. В результате проведенных исследований разработаны методические рекомендации по созданию референе-криобанка возбудителей малярии, технология моделировяния полного жизненного ЦИК ла возбудителя малярии группы "тітау: " и обеспечены исследования постспорозоитного развития m -vitro P.y.yoetii 265ВУ - наиболее ьлг. кватной модели для исследований параяитокозниннмх взаимоотношений
- 4 -при острой и хронической инфекции. Работа выполнена в соответствии с заданиями 01.04.10 (осуществить поиск и разработку моделей развития тканевых стадий малярийных паразитов) и 01.04.II (создать крио-банк возбудителей малярии) отраслевой научно-технической программы C-I6, договором о научно-техническом сотрудничестве с Ч0ФР по теме 7-5 "Усовершенствование методов лечения малярии" и программой сотрудничающего с ВОЗ центра по трехдневной малярии.
Разработанные модели полного цикла возбудителя внедрены в практику отдела эпидемиологии и экологии трансмиссивных паразитарных болезней ИМПиТМ им.Е.И.Марциновского МЗ СССР и в лаборатории малярии и оппортунистических паразитозов Института здравоохранения тропиков
(Прага).
Положения диссертации, выносимые на зашиту:
инициация инфекции с помощью стабильных криостоков от гомологичного позвоночного хозяина со спорозоитной инфекцией является основой стабилизации и воспроизводимости моделей полного цикла возбудителя;
оценка прогностической ценности модели малярии позвоночного хозяина дпя воспроизведения полного цикла развития паразита осуществляется не по заражаемости переносчика, а по его готовности к передаче возбудителя;
отсутствие выраженных взаимосвязей в бесполом и половом развитии возбудителя в позвоночном хозяине, равно как и их строгая синхронизация, являются существенными ограничениями при выборе инфицированных позвоночных хозяев в качестве оптимальных доноров для заражения переносчика.
Апробация работы. Результаты работы доложены и обсуждены на ІУ— конференции молодых ученых Туркменского мединститута (1988), на Ученом Совете ИМПиТМ (1988), коллоквиумах отделения биологии па-раїитов, методов диагностики и культивирования ИМПиТМ (1987-1989), Научной конференции молодых ученых ТНИИПиКМ Ю ТССР (1990), на засе-!V'in'.t;i СІпг'ЦИ.тги.'іировянноЯ комиссии по предварительной экспертизе
~ 5 -диссертации ЙШЬТМ им.Е.й.Марцаяовского (Ї990).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 работ.
Структура диссертации и объем. Диссертация изложена на страницах иашиногшсиого текста, состоит из введения, обзора литературы, G глав собственных исследований, заключений по главам, выво-доа. Текст иллюстрирован 22 таблицами, 21 рисунком и 3 ыикрофотогра-фиямя. Список литературы содеряит 135 наименований, в тон числе 116
работ зарубежных авторов.
