Содержание к диссертации
Введение
ГЛАВА 1. Литературный обзор «Окисление лупановых тритсрпсноидов» 5
1.1. Окисление реагентами Cr(VI) 5
1.2. Окисление реагентами RUO4, Hg(OAc)2, Se02, Pb(0Ac)2 8
1.3. Окисление озоном и кислородом воздуха 19
1.4. Окисление перекисью водорода и надкислотами 22
1.4.1. Стереоспецифичность окисления изопропенильной группы 28
1.5. Микробиологическое окисление 30
ГЛАВА 2. Обсуждение результатов 33
2.1. Озонирование ацетатов бетулина в жидкой фазе и на поверхности БіОг 34
2.2. Взаимодействие диметилдиоксирана с производными,тритерпеноидов ряда 20,29-лупена
2.2.1. Кинетические закономерности окисления 33,28-ди-0-ацетилбетулина, аллобетулина; 3 р-0-ацетил-2О,29-дигидробетулина диметилдиоксираном
2.2.2. Стереоспецифичность эпоксидирования двойной связи и хемоселективность окисления гидроксигрупп тритерпеноидов ряда 20,29-лупена диметилдиоксираном
2.3. Тушение люминесценции синглетного кислорода тритерденоидами ряда 20.29-лупена 55
2.4. Окисление бетулина и моноацетатов бетулина «активированным» диметилсульфоксидом
2.5. Хемоселективное окисление тритерпеновых спиртов гипохлоритом натрия 66
ГЛАВА 3. Экспериментальная часть 69
Выводы 95
Список литературы 96
- Окисление перекисью водорода и надкислотами
- Микробиологическое окисление
- Кинетические закономерности окисления 33,28-ди-0-ацетилбетулина, аллобетулина; 3 р-0-ацетил-2О,29-дигидробетулина диметилдиоксираном
- Окисление бетулина и моноацетатов бетулина «активированным» диметилсульфоксидом
Введение к работе
Актуальность развития методов селективного окисления тритерпеноидов обусловлена, прежде всего, их высокой биологической активностью и возможностью использования в медицине. Применение таких широко известных реагентов, как перекиси, соединения, содержащие Cr, Hg, Se, Ru, как правило, не позволяет проводить окисление тритерпеноидов с высокими конверсией, выходом и селективностью. В то же время, перспективным подходом оксифункционализации тритерпеноидов является использование ряда других реагентов - диметилдиоксирана, озона, гипохлорита натрия. Знание количественных закономерностей реакций окисления в ряде случаев позволит проводить целенаправленный синтез практически важных тритерпеновых производных,
Перспективным объектом ^ для проведения оксифункционализации является тритерпеноид лупановой группы - бетулин, имеющий надежную сырьевую базу в России. Так, содержание бетулина в бересте березы, в зависимости от условий, достигает 35%. Ряд производных бетулина образовали группу соединений с новым механизмом анти-ВИЧ действия. Бетулиновая кислота проходит предклинические испытания в качестве антимеланомного агента. Обнаружено, что бетулоновый альдегид обладает выраженной антилейкемийной активностью, а продукты микробиологического окисления бетулина являются активными ингибиторами репродукции вируса Эпштейна-Барра. Поэтому разработка методов селективного окисления бетулина и его производных, а также синтез новых оксифункционализированных тритерпеноидов актуальны.
Целью данной работы является изучение кинетических закономерностей реакций окисления бетулина и его производных, разработка методов стерео- и хемоселективного окисления тритерпеноидов.
Окисление перекисью водорода и надкислотами
Более подробно рассмотрим вопрос образования стереоизомеров в; результате окисления изопропенильной; группы. В ранних работах по окислению двойной связи лупанов надкислотами сообщалось об образовании смеси эпоксидов, альдегидов и спиртов в положении С(20)29 [1, 2], но смесь продуктов авторам разделить не удавалось.
Окислением лупенилацетата (48) т-СРВА в хлороформе при ОС получен 20,29-эпоксид (162) с количественным выходом, об образовании эпоксигруппы судили по наличию сигнала при S 2.62 м.д. в спектре ЯМР Н, при этом не обсуждалась возможность образования (20/?)- и (205)-эпимеров [54]. Клинот и др. [42], фактически не приводя доказательств, сообщали о получении (20/?5 смеси эпоксидов. В ряде работ [39], [46], [55] описывалось получение возможных стереоизомеров, стереохимия которых также не рассматривалась.
Позднее в работах [20, 56, 58, 59] изучалась проблема стереоспецифичности окисления изопропенильной группы надкислотами. Так, в работе [20] окислением бетулиновой кислоты (6) m-СРВ А в хлористом метилене были получены Зр-гидрокси-29-оксо-лупан-28-овая кислота (163) (50%) и ЗР,20,29-тригидрокси-лугшн-28-овая кислота (164) (40%), эпокси группа в этом случае не была обнаружена.
Предполагалась (205)-конфигурация соединения (163) и (20R)-конфшурация соединения (164) [20]. Значение химического сдвига сигнала альдегидного протона для (205)- на 0.18 м.д. меньше (5 9.7, Ш, д, V 3.0 Гц), чем для соединений (20Я)-конфигурации (5 9.88), поскольку альдегидная группа находится ниже плоскости боковой цепи и свободна от экранирующего эффекта кольца (в отличие от С12). Ацетокси-20,29-эпоксилупан-29-аль (164) был выделен Хуи др. [54] из стеблей Lithocarpus polystachya и синтезирован несколькими путями. Авторам работы [57] также удалось синтезировать (165) перегруппировкой эпоксида лупеола. Следует отметить, что в этих двух работах приводятся разные значения углов вращения (+14.4) [57] и (+10.8) [54], что также говорит о том, что фактически авторы получали смесь альдегидов (165а, 1656). Следует учитывать, что идентификация продуктов затруднительна: вследствие легкости их окисления на воздухе..
Однако позднее удалось не только разделить (20/?5)-смеси альдегидов и спиртов, но и выделить 5-эпимер в индивидуальном состоянии из растений [58]. В работе [59] был получен Зр-ацетокси-20,29-эпоксилупан (162) в качестве единственного эпимера, что подтверждается данными спектра .ЯМР !Н, в котором 17р-метил- и 20-метильные группы проявлялись как синглеты, и спектром ЯМР 3С, содержащим 32 атома углерода. Конфигурация при С20 не могла быть установлена, поскольку химический сдвиг пр-метильной группы указывал на (20Я)-конфигурацию, в то время как угол вращения соответствовал (205)-конфигурации.
Если авторами [14] указывается на невозможность разделения (20RS) смеси ввиду окисления и изомеризации, то в работе [59] такое разделение было проведено, при этом значительного окисления и изомеризации не наблюдалось. Корбет и др. [59] указывают, что значение химического сдвига сигнала СЗО в снектре ЯМР С приблизительно на 7 м.д. больше для (207?) эпимеров, чем для (205)-эпимеров. Это объясняется тем, что СЗО метальная группа в (20Я)-эпимерах экваториально наклонена, что присуще лентациклической системе [60]. Абсолютную конфигурацию СЗО метальной группы в С29 замещенных лупанах можно определить и по сигналам спектров ЯМР 1Н. Если сигналы 17р-метильной группы для (207?)-эпимеров обнаруживаются в более сильномполе ( 0.73-0.75), то для (205)-эпимеров— в более слабом (S 0.77-0.79). Сапонин лупанового типа (аканкореозид Е), выделенный-из листьев Acanthopanax koreanит [58], имеет структуру (205) За-гидрокси-30-оксолупан-23,28-диовой кислоты 28-0-[a-L рамнопиранозил-(1— 4)-р-0-глюкопиранозил-(1— 6)-р-В-глюкопиранозил] эфира (166); Абсолютная 5-конфигурация С20 определена путем; сравнения химических сдвигов С20, С29 и СЗО сапонина с литературными значениями [59] для (205)-3р-ацетоксилупан-29-аля (1656) и (20Я)-3р-ацетоксилулан-29 аля(165а). Позднее строение (20/?)-эпимера (165а) было подтверждено рентгено-структурным анализом [59]. Было обнаружено, что гидроксильная (С29) и метальнаяF (СЗО) группы ориентированны аксиально и экваториально, соответственно, по отношению к пентациклическому кольцу Е. Как известно из, химии стероидов [61] и высших терпеноидов [62], микробиологическое окисление часто приводит к соединениям, которые трудно получить стандартными синтетическими методами. Высокая противораковая активность бетулиновой кислоты явилась стимулом для исследования ее микробиологической трансформации. Согласно [63], культура Bacillus megaterium ATCG 14581 позволяет получить из бетулиновой кислоты (6) известную бетул он овую (7) с выходом 0.44%, 7р-гидроксибетулиновую (167) (0.085%) и ба,7Р-дигидроксибетулиновую (168) (0.45%) кислоты.
Микробиологическое окисление
В спектрах ЯМР эпоксида (37) имеются сигналы эпоксигруппы С(20)-0-С(29) при 5 61.0 м.д. и 57.8 м.д., а в спектре 3-оксо-луп-20Я,29-эпоксида (38) наряду с сигналами эпоксигруппы обнаруживаются сигналы карбонильной группы (5 217.3 м.д.).
Обнаруженная последовательность окисления полностью соблюдается в случае бетулина (1). Так, применение 1 эквивалента ДМД дало эпоксид (39) с выходом 92%. Два эквивалента окислителя позволяют довести реакцию до 3-оксо-эпоксида (40), Как и в случае окисления моноацетата (10), использование трех эквивалентов ДМД приводит к смеси 3-оксо-альдегида (в чистом виде не выделен) и 3-оксо-кислоты (41) (схема 2.13).
Если для окисления использовать четыре эквивалента ДМД, то кислоту (41) можно получить, с выходом 86%. Как и в предыдущих случаях, эпоксидирование двойной связи С20(29) стереоспецифично, о чем можно судить по данным спектров ЯМР: Сигналы эпоксигруппы обнаруживаются при 5 57.7 и 60.3 м.д. (ЯМР 13С), дублеты протонов Н29 проявлялись при 8 2.60 и 2.65 м.д. (ЯМР ЛН); Сигналы спиртовых групп СЗ и С28 в спектрах эпоксида (39) сохраняются (5 78.8 и 8 60.0 м.д.), в спектре 3-оксо-эпоксида (40) видны сигналы 3-оксо-группы при 5 217.1 м.д. и сохраняется сигнал спиртовой группы С28 при 5 60.0 м.д. В спектре 3-оксо-кислоты (41) наряду с сигналами эпоксигруппы обнаруживаются сигналы карбонильной С3 (6 217.8 м.д.) и карбоксильной С28 (8 181.6 м.д.) групп. Структура продукта окисления аллобетулина (27), использованного в качестве объекта при изучении кинетических закономерностей окисления тритерпеноидов ряда 20,29-лупена диметилдиоксираном, определена как 193,28-эпокси-18а-олеан-3-он (42) (схема 2,14); О наличии кетогруппы при СЗ свидетельствует появление сигнала при 8 217.9 м.д. в спектре ЯМР
При окислении- 3[3-0-ацетил-2О,29-дигидробетулина (28) 2 эквивалентами ДМД получена 33-0-ацетил-2О,29-д,игидробетулиновая кислота (43) (схема 2.15), что подтверждалось сигналами карбоксильной группы (5 180.4 м.д.) в спектре ЯМР 13С.
Таким образом, диметилдиоксиран проявил себя как реагент стереоспецифичного эпоксидирования двойной связи С20(29) и хемоселективногО: окисления гидроксигрупп тритерпеноидов ряда 20,29-лупена. Установлено, что при окислении бетулина и его производных диметилдиоксираном в первую очередь реагирует двойная связь, затем последовательно вторичная гидроксильная группа С(3)-ОН и первичная С(28)-ОН. Впервые охарактеризованы девять новых тритерпенових 20R-эпоксидов (33-41),
Несомненными преимуществами использования данного окислителя тритерпеноидов по сравнению с другими известными, в том числе перекисного строения, являются простота проведения эксперимента, мягкие условия (нейтральная среда, комнатная температура), высокие выходы конечных продуктов и отсутствие побочных реакций, С учетом высокой биологической активности, которую проявляют лулановые тритерпены [ЮО-102], окисление производных бетулина с помощью ДМД является весьма перспективным подходом, Отметим, что это первый пример стереоспецифичного окисления двойной связи тритерпеноидов ряда 20(29)-лупена реагентами перекисного строения.
Известно, что синглетный; кислород может образовываться как в химических, так и; в биохимических процессах [103]. В биохимических системах синглетный;кислород образуется при рекомбинации: перекисных радикалов, по реакции п ероксида водор ода с хлорид и онами под действи ем энзимов, а также в присутствии сенсибилизаторов при облучении светом. Как правило, роль синглетного кислорода негативна. Наряду с перекисными радикалами он является основным клеточным токсикантом. Поэтому понятен особый интерес исследователей к изучению реакции синглетного кислород а с биологически активными и природными соединениями. Все большее значение приобретают знания о механизме и скоростях взаимодействия 1С 2 с этими соединениями [77, 104, 105]. Исследование реакции лупановых тритерпеноидов с синглетным кислородом важно как для защиты лекарственных препаратов от фотоокисления, так и с точки зрения синтеза биологически активных пероксидов.
Кинетические закономерности окисления 33,28-ди-0-ацетилбетулина, аллобетулина; 3 р-0-ацетил-2О,29-дигидробетулина диметилдиоксираном
Определение концентрации NaOCl проводили иодометрическим методом, основанном на окислении иодид-ионов гипохлорит-ионами, которое сопровождается выделением свободного иода в количестве эквивалентном содержанию гипохлорита натрия: В коническую колбу для титрования помещали 5 мл концентрированной уксусной кислоты, 1 мл насыщенного раствора KI,. раствор продували аргоном; Затем помещали в нее аликвоту объемом 0.5 мл и добавляли 25 мл дистиллированной воды. Смесь выдерживали в темноте в течение 5 мин. Выделившийся иод титровали Na Cb. Холостой опыт готовили также, но вместо пробы добавляли 0.5 мл воды. Концентрацию NaOCl рассчитывали по формуле
CNa0Ci = NNa2S203 (VT - VTO)/(0.5 2) Скаосі - концентрация раствора, моль-л"1; NNa2S203 - нормальность раствора;.
VT - объем ЫагЗгОз, пошедшего на титрование раствора, мл; VT0 - объем ИагЗгОз, пошедшего на титрование холостой пробы, мл; 0.5 - объем пробы, мл; 2 - стехиометрический коэффициент Использовались 0.01 и 0,05 н растворы Na2S203.
Озонирование проводили в цилиндрическом реакторе (рис. 3.4), который для достижения заданной температуры помещали в соответствующую баню (ацетон/углекислота). Предварительно охлажденную озон-кислородную смесь барботировали через раствор 1 ммоль 3(3,28-ди- 9-ацетилбетулина (9), Зр-0-ацетилбетулина (10) или 28-С-ацетилбетулина (11) в 20-25 мл CH2CI2 определенное время, после чего избыток озона удаляли потоком кислорода. Количество поглощенного озона определяли спектрофотометрически согласно разделу 3.2.2. Реакционную массу переносили из реактора, нагревали до комнатной температуры и восстанавливали 4-х кратным избытком Na2S03 в МеОН при интенсивном перемешивании. Растворитель упаривали в вакууме, остаток: кристаллизовали из спирта или хроматографировали на колонке с А1203 (элюент—бензол).
Зр,28-Ди-0-ацетил-29-норлуп-2О-он (12). Раствор 1 ммоль (0.53 г) Зр;28-ди-С?-ацетилбетулина(9) окисляли Гэкв. 03 в СН2СІ2 при -80С. Выход 0.49 г (94%). R/0.67. Т.пл. 192С (МеОН). Лит. [39]: Т.пл. 190-191С. Найдено (%): G, 75.01; Н, 9.22. С33Н5205 (Мг 528.769). Вычислено (%): С, 74.69; Н, 9.91. Спектр ЯМР ]Н (300 МГц, CDC13) 5, м.д.: 0.81, 0.82, 0.94, 0.96, 1.00 (5с, 15Н, 5СН3); 1.00-2.00 (м, 24Н, СН2, СН); 1.99 и 2.03 (2с, 6Н; 20Ас); 2Л1 (с, ЗН, Н30); 2.57-2.64 (м, Ш, Н19); 3.77 и 4.23 (оба д, 2Н, Н28, J 11 Гц); 4.43 ( дд, Ш, НЗ, 7 5 Гц, 9 Гц). Спектр ЯМР 13С (300 МГц, CDG13) 4м.д.:Л4.4, 15.8, 16.0, 16.3, 18.0, 20.6, 20.8, 21.1 (СН3СО), 23.6, 26.8, 27.0, 27.4, 27.8,.292, 29.5, 33.9, 34.3, 36.3, 36.9, 37.6, 38.2, 40.7, 42.5, 46.2, 49.2, 49.9, 51.5, 55:2, 62.4 (С28), 80.6 (СЗ), 170.7 и 171.2 (СН3СО), 211.2 (С20). Зр-0-Ацетил-29-норлуп-2О-он (13). Раствор Г ммоль Зр-0-ацетилбетулина (10) окисляли 1 экв. 03 в СН2С1г при -80 С. Выход 0.44 г (90%). % 0.57. Т.пл. 197-199С (ЕЮН). Найдено (%): С, 75.99; Н, 10.84. C3iH50O4 (Мг 486.732). Вычислено (%): С, 76.50; Н, 10.35. Спектр ЯМР Н (300 МГц, CDC13) 5, мл.: 0.82, 0.84, 0.96, 1.01; 1.02 (5с, 15Н, 5СН3); 1.00-2.00. (м, 24Н, СН, СН2); 2.04 (с, ЗН, ОАс); 2.11 (с, ЗН, Н30); 2.35-2.42 (м, Ш, Н19); 3.31 и 3.78 (оба д, 2Н; /10.8 Гц, Н28); 4.52 (дд, 1Н, J 5.0 Гц, Л 1.0 Гц, НЗ). Спектр ЯМР 13С (300 МГц, CDC13) 3 м:д.: 14.7, 15.9, 16.1, 16.4, 18.1, 19.0, 20.9, 23.6, 25.0, 25.1, 27.9, 29.1, 29.7, 30.0, 33.9, 34.1, 37,0, 37.2, 37.7, 38.3, 40.6,42.6, 46.7, 47.7,48.7,50.1, 55.3, 60.4 (С28), 80.9,171.1, 212.4 (С20). 28-0-Ацетил-29-норлуп-2О-он (14). Раствор 1 ммоль (0.48 г) 28-0-ацетилбетулина: (11) окисляли 1 экв. Оз в СЩСЬ при -80С. Выход 0.44 г (91%). R/ 0.70. Т.пл. 189-19ГС (МеОН), Найдено (%): С, 76.39; Н, 10.50. C3iH50O4 (Мг 486.732). Вычислено (%): С, 76.49; Н, 10.35. Спектр ЯМР Н (300 МГц, CDC13) S, м.д.: 0.79, 0.83; 0.95, 0.99, 1.00 (5с, 15Н, 5СН3), 1.00-2.00 (м, 24Н, СН и СН2), 1.34 (с, ЗН, Н30),.2:12 (с, ЗН, ОАс), 2.68 (дт, Ш, / 10.2, 5.5 Гц, HI9), 3.78 и 4.25 (оба д, 2Н, Л 1.1 Гц, Н28); 4.41-4.45 (м, Ш, НЗ). Спектр ЯМР 13С (300 МГц, CDC13) 8, м.д.: 14.8, 15.0, 15.7, 16.0, 17.9, 19.3 (СЗО), 20.4, 21.0, 26.5, 26.8, 27.5, 27.8, 29.4, 31.6, 32.8, 33.7, 365, 36.7, 36.9, 39.5, 40.8, 42.1, 45.8, 46.7, 49.0,49.3, 55.0, 62.2 (С28), 78.4 (СЗ), 171.3, 212.3 (С20). 3.3.2. Методика озонирования на поверхности сорбента Зр,28-дн-0-ацетилбетулина (9), Зр-0-ацетилбетулина (10) и 28-0-ацетнлбетулина (И) Навеску 1 ммоль 3(3,28-ди-0-ацетилбетулина (9), Зр-О-ацетилбетулина (10) или 28-О-ацетилбетулина (11) растворяли в 50 мл СНгСІг, раствор приливали к свежепрокаленному силикагелю (22 г) при интенсивном перемешивании. Растворитель упаривали в вакууме водоструйного насоса на роторном испарителе при комнатной температуре. Реакцию с озоном проводили в реакторе с пористой перегородкой (рис. 3.5). Конструкция реактора позволяет последовательно проводить реакцию и элюирование продуктов, избегая нагрева системы. Непрореагировавший озон перед элюированием продуктов выдували током кислорода. Реакционную массу переносили из реактора, доводили до комнатной температуры и восстанавливали 4-х кратным избытком Na2S03 в охлажденном МеОН при интенсивном перемешивании. Отфильтровывали на: воронке Шота, упарили в вакууме. Остаток кристаллизовали из EtOH или хроматографировали на колонке с А120з (элюент — бензол). Зр,28-Ди-0-ацетил-29-норлуп-2О-оі[(12) . а). 1 Ммоль (0.53 г) Зр,28-ди-0-ацетилбетулина (9), нанесенного на БЮг, окисляли 1 экв. 03 при -40С. Выход 0.37 г (71%) (12) и 0.11 г. (20%) 3(3,28-ди-О-ацетилбетулина (9). б) 1 Ммоль (0.53 г) Зр,28-ди-0-ацетилбетулина (9), нанесенного на S1O2, окисляли 1 экв. 03 при -10С. Выход 0.43 г (82%). Зр-0-Ацетил-29-норлуп-2О-он (13) . а). 1.Ммоль.(0.48 г) ЗР-0-ацетилбетулина (10), нанесенного на Si02, окисляли 1 экв. 03 при -40С. Выход 0.39 г (81%) (13) и 0.07 г (14%) Зр-О-ацетилбетулина (9). б) 1 Ммоль (0.48 г) Зр-0-ацетилбетулина (10), нанесенного на ЗіОг, окисляли 1 экв. 03 при -10 С. Выход 0.38 г (78%) (13) и 0.05 г (10%) Зр-О-ацетилбетулина (10).
Окисление бетулина и моноацетатов бетулина «активированным» диметилсульфоксидом
К раствору 0.44 г (1 ммоль) бетулина (1) в 50 мл СН2С12в токе аргона при 0 С добавляли 0.15 мл ДМСО и 0.29 г Р205 (2 экв: реагента), перемешивали 2 ч. (ТСХ-контроль) при комнатной- температуре или нагревали при 60С с обратным- холодильником в течение 3: ч. Далее прикапывали 0.50 мл Et3N, перемешивали 30 мин, добавили 20 мл 10% раствора НС1, экстрагировали СН2С12 (2x15 мл). Органические слои объединяли, промывали раствором NaCl (25 мл), водой (2x25 мл), сушили над MgS04 и упаривали в вакууме. Реакцию проводили также с 5, 10 и 20 экв. реагента. По физико-химическим свойствам и спектральным данным выделенный продукт,соответствовал исходному бетулину [153, 154].
К раствору 1 ммоль (0.48 г) Зр-Оацети л бетулина (10) в 35 мл этилацетата при тщательном перемешивании постепенно добавляли 4.7 мл (1 экв) 5,96% раствора NaOCl, 0.33 ммоль одного из межфазных катализаторов (бензилтриэти л аммоний хлорид (C -CH CiHsbNCl, триэтилбензиламмоний хлористый (С2Н5)з(СбН5-СН2)МС1, тетраэтиламмоний хлорид Hs NCl, триметилбензиламмоний хлористый (СН3)з(СбН5-СН2)Ка, тетраэтиламмоний бромистый (C2Hg)4NBr или тетрабутиламмоний бромид H NBr), выдерживали от 3 до 48 ч. Оганический слой отделяли, промывали водой (2x10 мл), сушили над MgSOi, упаривали в. вакууме. Реакцию проводили также с 3 и 8 экв. NaOCK По физико-химическим свойствам и спектральным данным выделенный продукт соответствовал исходному Зр-О-ацетилбетулину [155], б) К суспензии 0.02 ммоль; гексадецилтриметиламмоний бромида (п Ci6H33N+Me3Br ) в 10 мл СН2С12 и 10 мл воды при перемешивании добавляли 1 ммоль (0.44 г) аллобетулина (27), метилового эфира глицирретовой кислоты (0.48 г) (64) и 20-оксо-29-нор-бетулина (0.44 г) (65), затем по каплям добавляли 0.60 мл (3 экв.) 1 М раствора NaOCl, выдерживали при комнатной температуре в течение 1-2 ч (ТСХ-контроль), органический слой отделяли, промывали водой (2x10 мл), сушили над MgSO, , упаривали в вакууме. Остаток растворяли:в 10 мл хлороформа и пропускали,через слой А1203 (1 см), упаривали в вакууме, выход 76-81 %. в) К раствору 1 ммоль аллобетулина (27) (0.44 г), метилового эфира глицирретовой кислоты (64) (0.48 г) и 20-оксо-29-нор-бетулина (65) (0.44 г) в 10 мл уксусной:кислоты при перемешивании добавляли по каплям 0.60 мл (3 экв.) 1 М раствора NaOCl, выдерживали при комнатной температуре в течение I ч, выливали в; 50 мл 5% раствора КОН, выпавший осадок фильтровали, промывали водой до нейтральной среды, сушили, выход 90 95%. 19р,28-Эпокси-18а-олеан-3-он (42). Выход 0.42 г (95%) (метод в) и 0.35 г (79%) (метод б) из аллобетулина (27). R/0.82. Т.пл. 230 С. Метиловый эфир ЗД1-диоксо-18Р-олеан-12-ен-20Р-овой кислоты (66). Выход 0.45 г (93%) (метод в) и 0.37 г (76%) (метод б) из метилового эфира глицирретовой кислоты (64). Ry0.85. Т.пл. 248 С. Лит. [156]: Т.пл. 248-249С. Найдено (%): G, 77.10; Н, 10.05. C3iH4604 (Мг 482.700). Вычислено С, 77.14; Н, 9.61. Спектр ЯМР !Н (300 МГц, CDC13) 3 м.д.: 0.80,1.04, 1:08, 1.13, 1.14, 1.25, 1.35 (7с, 21Н, 7СН3), 1.15-2.10 (м, СН, СН2), 2.32 (с, Ш, Н9), 2.80 (д, IH, J 13.5 Гц, HI8), 3.67 (с, ЗН, ОСН3), 5.68 (уш. с, 1н, H12). Спектр ЯМР 13С (300 МГц, CDC13) Д м.д.: 15.6, 18.5, 18.7, 21.3, 21.4, 23.4, 26.4, 26,5,.28.2, 28.5, 31.0, 31.7, 32.0, 34.1, 36.4, 37.6, 39.6, 41.1, 43.2, 44.9, 45.2, 47.7, 48.3, 51.8, 55.3, 61.0 (С9), 128.4 (С12), 169.5 (С13), 176,8 (С30), 199,4 (СИ), 217.1 (СЗ). 3,20-Диоксо-29-нор-луп-28-ол (67). Выход 0.41 г (92%) (метод а) и 0.36 г (81%) (метод б) из 20-оксо-29-норбетулина (65). R/0.52. Т,пл. 125С. Найдено (%): С, 78.60; Н, 10.87. СгэЩбО-}. (Мг 442.679). Вычислено С, 78.68; Н, 10.47. Спектр ЯМР LH (300 МГц, CDC13) S, м.д.: 0.67, 0.74, 0.88, 0.91, 0.92 (5с, 15Н, 5СН3), 1.00-2.00 (м, СН, СН2), 2.16 (с, ЗН, Н30), 2.40-2.45 (м, 1Н, Н19), 3.25 (д, т,Л 1 Гц, Н28), Спектр ЯМР 13С (300 МГц, CDC13) 5, м.д.: 14.5, 15.8, 15.9, 16.3, 17.9, 19.6, 21.3, 26.8, 27.0, 27.3, 27.7, 28.7, 29.5, 33.3, 33.8,.36.1, 36.9, 37.6, 38.1, 40.6, 42.4, 46.1, 49.2, 49.9, 51,5, 55.1, 60.5 (С28), 211.0 (С20), 218.2 (СЗ).
