Введение к работе
Меланома сосудистой оболочки глаза является одной из самых частых внутриглазных опухолей и составляет среди них, по данным разных авторов, от 50 до 85% (В. М. Шепкалава, А. А. Хора-санян-Тодэ, О.Н.Дислер, 1965, Э.Ф. Левкоєва, 1973, Э.О.Коте-лянский, 1974. Н. Shammas, 1977, А.И.Пачес, А.Ф.Бровкина, Г.Г.Зиангирова, 1980). Вместе с тем меланома сосудистой оболочки является и одной из самых злокачественных опухолей человека, в первые пять лет после энуклеации летальность достигает 50% (A.B.Reese, 1963, F.Davldorf, J.Lang, 1975).
Диагностика меланомы сосудистой оболочки глаза в настоящее время встречает определенные затруднения. Особенно это касается самых ранних стадий заболевания (ТІ -Т2), а также случаев, когда длительное нахождение опухоли в глазу сопровождается гемофтальмом, помутнением оптических сред, высокой отслойкой сетчатки. Расхождения между клиническим и патологоана-томическим диагнозом достигают 15% (Э.Ф.Левкоєва, 1973)'. Все это обусловливает необходимость использования комплекса диагностических мероприятий, от самых простых и традиционных, как офтальмоскопия, диафаноскопия, до весьма сложных и дорогостоящих, таких как, компьютерная томография и ядерно-магнитный резонанс (J. J.Augsburger et al.,1987, L. Lambrecht et al.,1988, Л.Ф. Линник с соавт., 1990). Вместе с тем постоянно идет поиск и разработка новых методов, которые позволили бы улучшить диагностику меланомы сосудистой оболочки. При этом из инструментально-лабораторных методов диагностики особое значение для клиницистов имеют те, которые сочетают в себе высокую информативность, безопасность и простоту технического исполнения.
В этом плане заслуживает внимание использование иммунологических тестов.
Как известно, в возникновении и развитии злокачественных новообразований большая роль отводится иммунной системе организма. Превращение нормальной клетки в опухолевую всегда сопровождается антигенными изменениями и вызывает в организме специфический иммунный ответ, который можно выявить с помощью определенных иммунологических методов (В. А. Крестовникова, 1965, Л.Н.Косяков, Н.П.Косякова, 1985). С этой целью исследователи применяют различные иммунологические тесты, позволяющие выявить опухолевые маркеры - эмбриональные антигены, опухоле-ассоциированные антигены, сенсибилизированные лимфоциты, иммуноглобулины. Использование иммунологических тестов в офтальмо-онкологии показано в работах ряда авторов (D.H. Char, 1977, A.Chernak, F.Kalafut, 1983, Т.П.Нифонтова, 1986). Применение известных иммунологических тестов, таких как, реакция торможения миграции лейкоцитов, реакция торможения прилипания лейкоцитов, изменение электрофоретической подвижности лейкоцитов, внутрикожные пробы с меланомным антигеном, радиоиммунологичес-кий метод и др., позволило авторам выявить специфические иммунологические сдвиги у больных с меланомой сосудистой оболочки глаза. Однако нельзя не отметить малочисленность таких исследований. Положительные результаты реакций были обнаружены авторами у 70,7 - 74 больных, но и в контрольной группе был высок процент (до 36%) ложноположительных результатов (D.H. Char, 1977, A. Chernak, F.Kalafut, 1983, Т.П.Нифонтова, 1986).
Вместе с тем известно использование иммунологических
тестов и для выявления антител к опухолеспецифическим антигенам у онкологических бальных (B.S.Kelly и др.,1981). В работах Л.А.Чиликина (1979), Е.П.Москаленко и др. (1989, 1990, 1995), В.А.Балязина и др.(1994), показано выявление противоопухолевых антител при онкологических заболеваниях в 70-94% случаев при незначительном уровне ложноположительных реакций в контрольной группе. Вот почему представлялось целесообразным провести исследования по разработке иммунологической'тест-системы на основе реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) при меланоме сосудистой оболочки глаза.
Целью настоящего исследования явилась разработка и внедрение клинико-иммунологического метода диагностики меланомы сосудистой оболочки глаза.
Для достижения поставленной цели мы считали необходимым решить следующие задачи:
-
Изучить сравнительную диагностическую ценность различных клинико-инструментальных методов диагностики меланомы сосудистой оболочки глаза.
-
Разработать методику выделения опухолеассоциированных антигенов меланомы сосудистой оболочки глаза, определить некоторые особенности их химического и антигенного состава.
-
Разработать методику конструирования иммунологической тест-системы на основе опухолеассоциированных антигенов меланомы сосудистой оболочки для выявления противомеланомных антител и характеристики антигенов, выделенных из ткани меланомы сосудистой оболочки.
-
Изучить антигенный состав ткани меланомы .сосудистой оболочки в иммунологических тестах_на основе сорбированных ди-
агностикумов и определить параметры характеристики антигенных препаратов для конструирования иммунологических тест-систем.
5. Разработать методику применения иммунологической тест-системы и оценить эффективность ее использования в комплексе клинико-иммунологических исследований при меланоме сосудистой оболочки глаза.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА состоит в том, что впервые получены новые факты, имеющие существенное значение для характеристики антигенов меланомы сосудистой оболочки, оценки иммунологических сдвигов у больных и экспериментальных животных, оценки современных клинико-инструментальных методов диагностики меланомы сосудистой оболочки глаза.
-
Показано, что антигены, выделенные-из меланомы сосудистой оболочки с помощью В-нафтоловой экстракции, являются липополисахаридопептидными комплексами без свободного липида и неоднородными по антигенному составу. Антигенные комплексы, выделенные из меланомы сосудистой оболочки, отличаются от аналогичных препаратов нормальной ткани сосудистой оболочки по содержанию жирных кислот, моносахаридов, аминокислот. В их составе обнаружены субстанции с молекулярной массой 77 и 80 Кд, которые не обнаружены в ткани нормальной сосудистой оболочки.
-
Получены данные, свидетельствующие о том, что сложный неоднородный антигенный состав меланомной ткани требует использования смеси отдельных индивидуальных препаратов для конструировании иммунологических тест-систем.
-
Разработаны методики приготовления эритроцитарных ди-агностикумов на основе антигенов, выделенных из нормальной и
опухолевой (меланома) ткани сосудистой оболочки.
-
В эксперименте показана способность антигенов сосудистой оболочки вызывать образование антител, которые выявляются в иммунологических реакциях (РПГА, РТПГА).
-
Установлена возможность выявления противоопухолевых (меланомных) антител у больных меланомой сосудистой оболочки глаза, что может быть использовано в качестве дополнительного' теста при диагностике.
-
Показано, что из всех использованных для диагностики меланомы сосудистой оболочки глаза инструментальных методов исследования (офтальмоскопия, диафаноскопия. ультразвуковое А и В - сканирование и др.) наиболее информативными и диагностически ценными оказались иммунологические.
Практическая значимость проведенного исследования заключается в обосновании использования иммунологического метода диагностики меланомы сосудистой оболочки глаза. Метод позволяет повысить эффективность диагностики меланомы сосудистой оболочки, экономичен, безопасен и может быть использован при об-^ следовании амбулаторных и стационарных больных.
Внедрение результатов исследования. Разработанный клини-ко-иммунологический метод диагностики меланомы сосудистой оболочки глаза применяется в глазном отделении Областной клинической больницы.
Результаты проведенных исследований используются в учебном процессе на кафедре глазных болезней N2 РГМУ, на курсах иммунологии ФУВа, кафедре микробиологии и вирусологии N2 РГМУ.
Основные положения диссертации доложены и обсуждены на Всесоюзной конференции по офтальмоонкологии в г.Таллинне (1990 г.), 4 Всероссийском Съезде онкологов в г. Ростове-на-Дону (1995 г.), кафедральных конференциях (1992-1995 гг).
По теме диссертации опубликовано 7 печатных работ. Предложенный метод запатентован. Патент РФ "Способ диагностики меланоми сосудистого тракта глаза" N 1639244 от 10.12.92 г.
СТРУКТУРА И ОБЪЕМ РАБОТЫ