Введение к работе
1. Актуальность проблемы. Рак молочной железы является одним из наиболее распространенных онкологических заболеваний, и у женщин его частота составляет около 30% среди диагностируемых опухолей. Данная проблема является весьма актуальной в двух аспектах. Во-первых, сложившаяся в последнее время ситуация, связанная с высокой частотой заболеваемости и "омоложением" РМЖ, требует создания более точных и простых методов своевременного выявления среди населения групп риска этого заболевания, ранней диагностики, а іакже в целях мониторинга больных и дальнейшего успешного лечения. Во-вгорых, возможное участие регровирусов в канцерогенезе молочной железы человека требует более глубоких фундаментальных исследований.
В современной литературе имеется большое количество публикаций, посвященных эндогенным ретровирусам человека родственным MMTV, и связанных с развитием некоторых патологических процессов у человека и, в частное! и. с некоторыми онкологическими заболеваниями. В работах, как правило, указывается на акшвность^оЕ; npol - генов как в тканях, так и в лимфоцитах периферической крови человека. При этом, работ, посвященных гену env, а также указывающих на ассоциацию РМЖ с экспрессией последовательностей, родственных гену env MMTV в современной литературе (но отношению к вышеуказанным) имеется значительно меньше. Такие транскрибирующиеся последовательности обнаруживались авторами в ткани рака молочной железы, однако, о наличии их в лимфоцитах периферической крови ранее не сообщалось. Вместе с тем, накоплено много данных по обнаружению как в ткани РМЖ. сыворотках крови, так и в лимфоцитах периферической крови аігііпепов. иммунологически родственных продуктам и gag, и env генов MMTV. Таким образом, последовательное! и генома человека.
гомологичные гену env MMTV изучены неполно. Поскольку ранее в лаборатории иммунологии оикогенных вирусов было показано, что антиген, иммунологически родственный продукту гена env MMTV - gp52, специфически экспрессируется в Т-лимфоцитах больных РМЖ, исследование таких последовательностей и их экспрессии в лимфоцитах периферической крови человека в настоящее время является актуальным как для фундаментальной науки, так и в целях прикладного характера.
2. Цели и задачи исследования. Целью настоящей работы было исследование последовательностей ДНК человека, гомологичных гену env MMTV и их экспрессии в лимфоцитах периферической крови человека, как в норме, так и в ассоциации с развитием РМЖ у человека.
В связи с этим были поставлены следующие задачи:
-
Исследование образцов ДНК лимфоцитов периферической крови человека на наличие последовательностей, гомологичных гену env MMTV методом гибридизации по Саузерну.
-
Сравнение частоты выявления последовательностей, гомологичных гену env MMTV, при использовании разных зондов.
-
Исследование образцов тотальной РНК лимфоцитов периферической крови человека на наличие транскриптов, гомологичных гену env MMTV.
-
Определение особенностей экспрессии последовательностей, гомологичных гену env MMTV, в группах больных РМЖ, и в ряде контрольных групп.
Исследовались: группа больных РМЖ, группа больных гинекологическими опухолями (данная группа использовалась в качестве
контрольной группы гормонозависимых опухолей) и группа здоровых допоров.
Научная новизна. Новизна научною подхода состоит в поиске последоваїельностеіі. близкородственных гену env MMTV и их транскриптов в лимфоцитах периферической крови исследуемых лиц. В лимфоцитах периферической крови исследуемых групп были обнаружены транскрипциопно-активные последовательности ДНК, высокоюмологичные гену env MMTV, при лом эти последовательности не являюіся рода псиными последователь носіям ієна env I1HRV-K10. Впервые была показана корреляция экспрессии таких последовательностей в лимфоцитах периферической крови с обнаружением в этих лимфоцитах антигена, иммуиолопічсски родственною продукту гена env MMTV - gp52. Методом нозерн-гибридизацин показаны различия в уровнях экспрессии последовательностей, высокогомологичных гену env MMTV среди исследуемых групп.
3. Научно-практическая значимость работы. У 75% больных РМЖ, по сравнению с 27,4% больных опухолями гинекологической сферы и 25% здоровых доноров в лимфоцитах периферической крови выявлены транскрипциопно-активные последовательности, имеющие высокую степень гомологии с областью ієна env MMTV. кодирующей gp52. которые также выявляются методом по.тпмеразной цепной реакции (ІІЦР).
В насіояіцее время метод ПЦР широко используется в клинической практике для диагностики различных заболевании. Таким образом, насюяшпе исследования несут теоретическую основу для разработки диагностических тестов на РМЖ, а также для дальнейшей отработки
метода ИЦР, позволяющего проводить более широкий скрининг различных групп населения.
4. Апробация работы. Апробация диссертационной работы была
проведена 23 ноября 2000г. па совместной научной конференции
лабораюрнй иммунологии онкогенных вирусов, молекулярной биологии
вирусов, вирусного канцерогенеза и регуляции вирусных и клеточных
онкогенов 11ИИ канцерогенеза РОНЦ РАМ! I.
Основные материалы диссертационной работы были представлены па международных конференциях "СПИД, рак и родственные проблемы" (Россия. Санкт-Петербург, 1997, 1998 и 2000гг.),
-
Публикации. 11о материалам работы опубликовано 9 работ.
-
Структура и объем диссертации. Материал диссертации изложен на 110 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов собственных исследований, обсуждения и выводов. Работа проиллюстрирована 16 рисунками, 3 диаграммами и 3 таблицами. Библиографический материал включает в себя ссылки на 103 источников зарубежной и отечественной литературы.
Похожие диссертации на Изучение последовательностей ДНК человека, гомологичных гену env MMTV, и их экспрессии при раке молочных желез
![Экспрессия HER-2/neu и применение герцептина при раке молочной железы [Электронный ресурс]](/i/i/4306/201570.png "Экспрессия HER-2/neu и применение герцептина при раке молочной железы [Электронный ресурс] Ганьшина Инна Петровна")