Содержание к диссертации
Введение
Глава 1. Обзор литературы 10
Глава 2. Материалы и методы исследования 28
Глава 3. Гигиеническая оценка условий труда работниц современного свиноводческого комплекса 37
3.1. Гигиеническая оценка основных производственных факторов 37
3.2. Бактериологическое исследование воздуха производственных помещений 43
Глава 4. Влияние условий труда на показатели состояния здоровья женщин-работниц современного свиноводческого комплекса 46
4.1. Особенности микробиоценоза организма у работниц свиноводческого комплекса 50
4.2. Обоснование лечебно-реабилитационных мероприятий для коррекции показателей неспецифической резистентности 65
Глава 5. Биологические свойства бактерий Staphylococcus aureus и дрожжеподобных грибов рода Candida, выделенных в виде монокультур и ассоциаций, у работниц свиноводческого комплекса 67
5.1. Биохимическая характеристика штаммов бактерий Staphylococcus aureus и дрожжеподобных грибов рода Candida 67
5.2. Адгезивная активность штаммов бактерий Staphylococcus aureus и грибов рода Candida 71
5.3. Персистентные свойства у штаммов бактерий Staphylococcus aureus и грибов рода Candida 75
Глава 6. Мероприятия по профилактике неблагоприятного воздействия условий труда на работников животноводческих комплек сов 85
Заключение 87
Выводы 103
Список использованной литературы 105
Приложения 126
- Бактериологическое исследование воздуха производственных помещений
- Обоснование лечебно-реабилитационных мероприятий для коррекции показателей неспецифической резистентности
- Адгезивная активность штаммов бактерий Staphylococcus aureus и грибов рода Candida
- Персистентные свойства у штаммов бактерий Staphylococcus aureus и грибов рода Candida
Введение к работе
Актуальность исследования. Уровень социально-экономического развития любого общества определяется не только мощностью производительных сил и характером производственных отношений, технической вооруженностью и профессиональной подготовкой работающих, но и во многом зависит от состояния здоровья населения [4, 40, 81, 122].
Здоровье женщин является объективным показателем уровня здоровья населения и индикатором оценки социальных и экологических проблем [122]. Оценка состояния здоровья женщин-работниц является одной из важных проблем медицины труда [27, 108]. Эти проблемы наиболее характерны для агропромышленного комплекса [95,100].
В агропромышленном комплексе (АПК) Республики Башкортостан около 100 тысяч женщин занято в животноводстве, птицеводстве, полеводстве, тепличных хозяйствах, что составляет одну треть из числа работающих в этой отрасли.
В АПК сочетанное воздействие производственных факторов на работающих, в том числе микробиологических, обуславливает повышенный уровень распространенности общих соматических, а также производственно обусловленных и профессиональных заболеваний, в формировании которых существенная роль принадлежит показателям неспецифической резистентности организма, в том числе, состоянию нормофлоры и системы иммунитета [20,51, 104].
Однако в научной литературе имеются лишь единичные работы, как по изучению состояния микробиоценоза организма работающих женщин в животноводстве, так и по подтверждению этиологической значимости патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, в частности культур выделенных в микробных ассоциациях в возникновении заболеваний, снижении защитных сил организма работников [17, 59, 72].
Актуальность настоящей работы определяется проблемой сохранения здоровья женщин-животноводов и недостаточной изученностью многофакторного воздействия условий труда современного животноводческого комплекса на их здоровье, в частности, на микроэкологию организма и на биологические свойства микробных ассоциаций, которые могут способствовать изменению защитных сил организма и привести к заболеваниям.
Цель исследования. Выявление особенностей формирования микробиоценоза организма женщин-работниц животноводческого комплекса и научное обоснование профилактических мероприятий по оптимизации микроэкологических систем макроорганизма в условиях техногенного воздействия.
Задачи исследования:
Провести комплексную санитарно-гигиеническую оценку условий труда женщин- работниц современного свиноводческого комплекса и оценить состав микрофлоры воздушной среды производственных помещений для выявления причинно-следственных связей, определяющих формирование микроэкологического статуса макроорганизма.
Оценить состояние здоровья женщин-животноводов и роль микрофлоры в адаптации организма к воздействию неблагоприятных факторов производственной среды.
Выявить роль Staphylococcus aureus и грибов рода Candida в структуре микробиоценоза организма у работниц-животноводов.
Изучить частоту проявления адгезивной, антилизоцимной, антикомплементарной активностей у штаммов S.aureus и грибов рода Candida, выделенных в виде монокультур и ассоциаций, у женщин-животноводов.
Научно обосновать профилактические мероприятия по улучшению состояния здоровья и оптимизации микроэкологических систем макроорганизма в условиях техногенного воздействия факторов рабочей среды животноводческого комплекса.
Научная новизна. Впервые на основе комплексных гигиенических, клинических и микробиологических исследований показано влияние производст-
венных факторов современного животноводческого комплекса на формирование микробиоценоза организма женщин-работниц и адаптации макроорганизма в условиях техногенного воздействия.
Проведено сравнительное изучение факторов патогенности (адгезивной, антилизоцимной, антикомплементарной активностей) у штаммов Staphylococcus aureus и дрожжеподобных грибов рода Candida, выделенных в виде монокультур и ассоциаций при исследовании микробиоценоза организма у работниц свиноводческого комплекса.
Показано, что высокая биологическая пластичность микроорганизмов, колонизирующих слизистые оболочки, и высокая чувствительность слизистых к воздействию неблагоприятных факторов позволяют использовать изменения в их состоянии как критерий оценки профессионального риска при воздействии неблагоприятных факторов крупных животноводческих комплексов.
Практическая значимость работы. Результаты исследований позволили обосновать необходимость лабораторных исследований микрофлоры для выявления ранних нарушений микробиоценоза организма в условиях техногенного воздействия.
Изучение биологических свойств микробных ассоциаций можно использовать для обнаружения ранних признаков изменения защитных сил организма, оценки степени тяжести поражения и коррекции выявленных нарушений у работающих в животноводстве.
Получена дополнительная информация об этиологической роли факторов патогенности (адгезивная, антилизоцимная, антикомплементарная активности) штаммов Staphylococcus aureus и дрожжеподобных грибов рода Candida как критериев развития дисбиотических нарушений микрофлоры организма работниц.
Обосновано использование пробиотиков «Нормофлорин - Л» и «Нор-мофлорин - Б» для коррекции микробиоценоза у работниц-животноводов.
В ходе выполнения диссертационной работы разработаны и внедрены:
Профессиональные заболевания от воздействия биологических факторов: учебно-методическое пособие для врачей. Утверждено Минздравом Республики Башкортостан 24 апреля 2005 г.
Алгоритм управления рисками нарушений здоровья женщин-работниц животноводческих комплексов: методические рекомендации. Утверждены Минздравом Республики Башкортостан 10 февраля 2007. Они внедрены в практическую деятельность ряда животноводческих комплексов Республики Башкортостан. Справка о внедрении от 23 марта 2008 года Рескома профсоюзов Работников АПК.
Микробиоценоз организма работниц в условиях воздействия факторов рабочей среды животноводческого комплекса, методы профилактики нарушений: методические рекомендации. Утверждены Минздравом Республики Башкортостан 18 сентября 2008 г.
Результаты диссертационной работы используются в лекционных курсах и практических занятиях кафедры гигиены труда и профессиональных болезней Башкирского государственного медицинского университета и кафедры «Безопасность жизнедеятельности и охрана окружающей среды» Башкирского государственного университета. Акты внедрения от 8 и 15 октября 2008 г.
Основные положения, выносимые на защиту: 1. Гигиенические условия труда женщин, работающих на свиноводческом комплексе, характеризуются сочетанным воздействием биологического, химического, физического факторов и влияют на состояние здоровья женщин-работниц. Бактериальное и грибковое загрязнение воздуха производственных помещений в сочетании с пылью и повышенной влажностью воздуха может привести к высокой частоте нарушения микробиоценоза, в повышении популяционного уровня патогенных, условно-патогенных микроорганизмов.
Ассоциации штаммов Staphylococcus aureus и дрожжеподобных грибов рода Candida у женщин-работниц свиноводческого комплекса, проявляют высокую степень адгезивной, антилизоцимной, антикомплементарной активностей по сравнению с монокультурами.
Прием пробиотиков «Нормофлорин - Л» и «Нормофлорин - Б» способствует восстановлению видового состава кишечной нормофлоры работниц, что позволяет рекомендовать его в качестве неспецифического средства профилактики микроэкологических нарушений.
Апробация работы. Материалы исследований доложены на Всероссийской конференции с международным участием "Медицинские иммунобиологические препараты в XXI веке: разработка, производство и применение".- Уфа, 2005; на Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Современные проблемы медицины труда».- Уфа, 2005; на IV Международной научной конференции «Гомеостаз и эндоэколо-гия».- Хургада (Египет), 2006; на Всероссийской научно-практической конференции «Гуманитарные и естественнонаучные аспекты современной экологии».- Уфа, 2006.
Личный, вклад автора. Материалы, использованные в диссертации, получены в результате исследований, в которых автор являлся исполнителем тема № 1.5.9 «Особенности формирования микрофлоры и роль его в адаптации макроорганизма в условиях техногенного воздействия» совместно с Академией наук Республики Башкортостан в рамках Государственной программы Республики Башкортостан «Государственные приоритеты здоровья населения РБ: профилактика заболеваний и здоровый образ жизни» (2003-2005 г.г.); тема №1 «Исследование условий и охраны труда, состояния здоровья женщин-работниц агропромышленного комплекса Республики Башкортостан. Разработка мероприятий по сохранению здоровья работниц агропромышленного комплекса» по заданию Министерства труда и социальной защиты Республики Башкортостан (2006-2008 г.г.).
Автором осуществлено планирование, организация и проведение исследований, сформулированы цель и задачи, определены объем и методы исследований, осуществлен анализ и обобщение полученных данных, подготовлены публикации. В составе авторского коллектива принимала участие в разработке методических документов. Доля участия в накоплении материала составляет 85%, в обобщении материала - до 100%.
По результатам исследований опубликовано 15 научных работ.
Структура и объем диссертации.
Диссертация изложена на 126 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, главы методов исследования, трех глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и приложений. Работа иллюстрирована 12 таблицами и 15 рисунками. Список литературы содержит 177 источников, из которых 123 отечественных и 54 иностранных авторов.
Бактериологическое исследование воздуха производственных помещений
На предприятиях животноводства важную роль приобретает биологический фактор. Это связано с высокой концентрацией поголовья скота, использование кормов, высокой влажности воздуха, благоприятствующей размножению и накоплению микроорганизмов в помещениях [53, 84, 117].
При оценке воздействия производственных факторов свиноводческого комплекса на состояние здоровья работающих большое значение имеет не только физико-химические, но и микробиологические показатели воздушной среды. Численность и состав микрофлоры воздуха, являясь важным показателем санитарного состояния хозяйства, в определенной степени зависят от условий содержания, состояния и поголовья скота [84].
Критерием оценки бактериальной загрязненности воздуха животноводческих комплексов служил ГОСТ 12.1.005-88: в помещениях для содержания свиней. Допустимое количество микроорганизмов колеблется от 50 до 100 тыс. колониеобразующих единиц - КОЕ/м3 в зависимости от возраста поголовья, санитарного состояния помещений.
На свиноводческом комплексе отбор проб воздуха проводили в производственной и племенной зонах (участки содержания свиноматок, опороса, доращивания молодняка), в некоторых административно-хозяйственных и бытовых помещениях. Отмечены высокие показатели уровня микробного загрязнения воздуха производственных помещений, где содержались животные - до 1,4x105 КОЕ/м3, по сравнению с помещениями племенной зоны - до 7,2х104 КОЕ/м3 и до 6,4х103 КОЕ/м3 в административных помещениях.
Общая численность микроорганизмов в воздухе составляла в среднем 2,97±0,3х104 КОЕ/м3, из них грамположительные кокки обнаруживались в количестве l,0±0,13xl0f КОЕ/м3, в том числе количество Staphylococcus aureus составляло 2,8 ± 0,3x10 КОЕ/м3 (8,4 % положительных проб), Strepto-coccus haemolyticus 3,3 ± 0,5x10" КОЕ/м3 (14,7% положительных проб).
При относительном постоянстве качественного и количественного состава микроорганизмов воздушной среды, их общее количество, а также содержание стафилококков в племенной зоне соответственно была в 3,3 и 2,5 раза выше, чем в производственной зоне. Содержание дрожжепо-добных грибов рода Candida наоборот было в 2,4 раза выше в производственной зоне. Общая численность сапрофитных микроорганизмов в 1 м3 воздуха колебалась в пределах нормы.
Численность кокковых форм бактерий колебалась в среднем на уровне 6,2 ± 0,6x103 КОЕ/м3 в производственной зоне, а в племенной зоне 1,56 ± 0,13 х 104 КОЕ/м3 (в 2,5 раза выше), что составило, соответственно 29,1-65,4% и 20,0-58,3% от общей численности микроорганизмов. Результаты исследования микрофлоры воздушной среды свинокомплекса представлены в табл.4.
Показателем неудовлетворительного состояния производственных помещений служит и высокое содержание в воздухе дрожжеподобных грибов, которые могут оказывать сенсибилизирующее действие на рабочих свиноводческого комплекса. Дрожжеподобные грибы рода Candida выделялись в 28,2% проб воздуха и в среднем в количестве 2,4 ± 0,3x10 КОЕ/м3.
Из приведенных данных следует, что для свиноводческого комплекса характерна не только высокая общая бактериальная загрязненность воздуха производственной зоны, но и обнаружение в нем значительного числа дрож-жеподобных грибов и Staphylococcus aureus, что может играть заметную роль в формировании специфических микробиоценозов слизистых верхних дыхательных путей, кожи, влагалища у женщин-работниц свиноводческого комплекса.
Таким образом, можно рассматривать микробное загрязнение воздуха свиноводческого комплекса бактериями рода Staphylococcus, в т.ч. и S.aureus, а также дрожжеподобными грибами рода Candida как вредный производственный фактор, оказывающий влияние на развитие у работниц инфекционно-аллергических заболеваний органов дыхания, кожи и мочеполовой системы.
Здоровье населения - показатель национального престижа, стабилизирующий фактор доверия ко всем ветвям власти, органам управления, политической и экономической системе в целом. Здоровье работающего населения - необходимое условие высокого трудового потенциала, показатель уровня культуры, наиболее важный критерий эффективности государственного управления. Здоровье женщин является объективным показателем уровня здоровья населения и индикатором оценки социальных и экологических проблем [27, 108, 122].
При медицинском обследовании у работниц свиноводческого комплекса заболевания ЛОР-органов выявлены в 66,7±4,6% в 1 группе (класс условий труда 3.1) и 50,7±5,8% случаев во 2 группе (класс условий труда 2.0), р 0,01. Распространенность ЛОР-заболеваний у работников представлена на рис.1. Наиболее распространенными оказались заболевания верхних дыхательных путей (35,2% и 35,6 % в 1 и 2 группе соответственно).
При этом 20,9% работниц предъявляли жалобы на частые насморки с водянистыми выделениями, сопровождающиеся приступами чихания, зудом, затрудненным носовым дыханием, понижением обоняния, охриплостью голоса и расценивались как различные проявления аллергического характера.
На распространенность заболеваний, вероятнее всего, оказывают влияние неблагоприятные условия труда, пыль и раздражающие вещества, а также микроорганизмы, присутствующие в воздухе рабочей зоны.
В структуре заболеваний ЛОР-органов у женщин-работниц 1 группы аллергоз дыхательных путей составляет 20,9±4,0%, тогда как во 2 группе он равен 9,6±3,6%, р 0,05, заболевания органов слуха- 10,5±3,6 и 4,2±2,3% соответственно (р 0,05).
Обоснование лечебно-реабилитационных мероприятий для коррекции показателей неспецифической резистентности
Среди большого разнообразия биологических препаратов, рекомендуемых для улучшения функционирования пищеварительного тракта и коррекции дисбиотических нарушений микроэкологии организма, широкое распространение получают лекарственные средства биологического происхождения (пробиотики, пребиотики и синбиотики). Пробиотики - это живые микроорганизмы, оказывающие позитивные эффекты на физиологические, биохимические и иммунные реакции организма хозяина через оптимизацию и стабилизацию его микробиоты [43, 135].
Для коррекции дисбиотических состояний у работниц, использованы комплексные биопрепараты - пробиотики «Нормофлорин-Б» и «Нормофло-рин-Л» (ООО «Биофлора»), которые представляют собой живые бифидо- и лактобактерии, содержащие в 1 мл не менее 109-1010 микробных клеток, аминокислоты (включая незаменимые), органические кислоты, витамины С, Е, РР,Н и группы В, микроэлементы К, Na, Са, Fe, Mg, Си, Zn, Se, ЛИЗОЦИМ, лактат (пребиотик) и оценена их эффективность. Прием препаратов осуществлялся по 15 мл внутрь 2 раза в день в течение 10 дней.
Эти биопрепараты обладают мощным антимикробным действием, подавляют гнилостную и газообразующую микрофлору, выводят токсические вещества, активно участвуют в процессах пищеварения и всасывания кальция, железа, в синтезе витаминов, улучшают перистальтику кишечника, снижают уровень холестерина и оксалатов, создает защитную биопленку на всех слизистых, улучшая выживаемость и приживляемость в кишечнике живых представителей резидентной микрофлоры, при этом избирательно стимулируя рост и активацию метаболизма индигенных лактобактерий и бифидобак-терий [44,248].
В результате приема препарата у них наблюдается улучшение качественного состава эшерихий на фоне незначительного уменьшения их общего содержания, увеличение численности бифидо- и лактобактерий., а также элиминация условно-патогенных энтеробактерий, уменьшение частоты выявляемое золотистого стафилококка, дрожжеподобных грибов и анаэробной споровой флоры.
Результаты лабораторных исследований позволили установить, что регулярный прием препаратов, содержащих живые культуры бифидобактерий и лактобацилл, способствовали нормализации кишечного микробиоценоза у 69,2% пациентов с дисбиозом кишечника. В исследуемой группе отмечается по сравнению с исходными данными увеличение численности бифидо- и лактобактерий, а также элиминация условно-патогенных микроорганизмов у 53,8% лиц, снижение количества дрожжеподобных грибов и анаэробных кло-стридий у 42,8% и 28,6%о соответственно.
Благотворное влияние пробиотиков на организм проявляется в коррекции микробиоценоза кишечника, нормализации метаболической и функциональной активности желудочно-кишечного тракта. Полученные результаты свидетельствуют о целесообразности применения биокомплексов для лечения лиц с ослабленной иммунной системой, при влиянии неблагоприятных производственно-профессиональных факторов, при дисбактериозе и его профилактике.
С учетом полученного клинического эффекта это позволяет рекомендовать биокомплексы «Нормофлорин - Б» и «Нормофлорин - Л» в качестве функционального профилактического средства, способствующего существенному уменьшению признаков дисбиотических нарушений.
Стафилококки относятся к роду Staphylococcus сем.Місгососсасеае. Стафилококки - это грамположительные, неподвижные, неспорообразующие сферические клетки. Факультативные анаэробы. Типовой вид: Staphylococcus aureus [ЗО].
Дрожжеподобные грибы рода Candida — это одноклеточные микроорганизмы относительно большой величины; овальной, округлой, иногда овально-вытянутой формы. Они образуют псевдомицелий (нити из удлиненных клеток), бластоспоры (клетки-почки, сидящие на перетяжках псевдомицелия) и некоторые — хламидоспоры- споры с плотной двойной оболочкой, выращиваются при температуре 30-37 С.
Дрожжеподобные грибы рода Candida относятся к несовершенным грибам - дейтеромицетам и составляют род, который включает более 80 видов, однако существенное значение имеют следующие виды: С.albicans, C.tropicalis, C.pseudotropicalis, C.crusei, C.guilliermondii, С. parapsilosis. Наиболее распространенный вид: С.albicans [93, 97]. Проведена идентификация 293 штаммов Staphylococcus aureus и 85 штаммов Candida.
При определении родовой и видовой принадлежности представителей рода Staphylococcus, выделенных из различных биотопов организма женщин, учитывали 20 признаков: образование лецитиназы на среде Чистовича, реакцию плазмокоагуляции, утилизацию глюкозы, фруктозы, маннозы, мальтозы, лактозы, трегалозы, маннита, ксилозы, сахарозы, арабинозы, галактозы, салицина. Выявляли наличие фосфатазы, нитратредуктазы, уреазы, образование ацетилметилкарбинола, образование пигмента и гемолизина.
По биохимическим свойствам из 293 штаммов Staphylococcus 234 (79,8%) были отнесены к S. aureus, 31 (10,6%) - S.epidermidis, 16 (5,5%) - S. saprophyticus, 5 (1,7%) - S. xylosus, 7 (2,4%) - S.intermedius (табл. 9).
Следует отметить, что у женщин - работниц Staphylococcus aureus были изолированы как в виде монокультур - 47 (20,08%) штаммов, так и ассоциаций с другими условно-патогенными микроорганизмами - 86 (36,75%) штаммов, в том числе со дрожжеподобными грибами рода Candida - 42 (17,9%) штамма.
Адгезивная активность штаммов бактерий Staphylococcus aureus и грибов рода Candida
Начальным и необходимым этапом развития инфекционного процесса является адгезия микроорганизмов - способность прикрепляться к слизистой эпителия с помощью специальных адгезинов, входящих в состав фимбрий или структур клеточной стенки бактерий [14, 123].
Факторы адгезии Staphylococcus aureus — это гемагглютинин, рецептором для которого является фибронектин.
Адгезия Candida на эпителиальных клетках является первым и обязательным этапом развития кандидоза. При этом на реализацию адгезивного потенциала в системе «кандиды-эпителиоциты» могут оказывать влияние различные факторы, в том числе производственные, действующие как на микроорганизмы, так и на клетки хозяина [63, 163]. Показано, что в адгезии кандид на эпителиоцитах участвуют неспецифические (прежде всего, гидрофобные) взаимодействия и специфические (лиганд-рецепторные) контакты
Важными факторами агрессии, обеспечивающими адгезию Candida к эпителию слизистых оболочек, признают ферменты агрессии: протеиназы, фосфолипазы, коагулазы, которые обеспечивают колонизацию возбудителями тканей хозяина, а также защиту гриба от иммунологических факторов.
В биотопах тела человека, где микроорганизмы находятся преимущественно в ассоциациях, адгезия может изменяться в условиях межмикробных взаимодействий.
Исходя из этого, в первой серии исследований по выявлению характера клеточных структур, обеспечивающих адгезивную активность штаммов кандид и стафилококков, была изучена их гемагглютинирующая способность. Количественную оценку адгезивной активности в реакции гемагглютинации (РГА) проводили в соответствии с методом, описанным В.И.Брилисом с соавторами [14]. Известно, что рецепторы эпителиальных клеток аналогичны структурам, которые определяют группы крови, поэтому метод гемагглюти нации с эритроцитами различных видов животных, человека и птиц широко используется для выделения адгезинов микроорганизмов.
Установили, что адгезивная активность штаммов Candida, выделенных из различных биотопов у работниц свиноводческого комплекса, проявлялась в 65,0% случаев у монокультур и в 75,0 % случаев у ассоциаций, а штаммов Staphylococcus aureus - 40,0% случаев у монокультур и 70,0% у ассоциаций.
Для оценки степени адгезивной активности используют средний показатель адгезии (СПА) - среднее количество микроорганизмов прикрепившихся к одному эритроциту, который у всех исследованных штаммов кандид колебался в пределах 2,1-2,3, а у S. aureus - 2,01-2,2 и характеризовал средний уровень (2,01-4,0) общей адгезивной активности.
Изучение степени адгезии штаммов грибов рода Candida и стафилококков на фиксированных и окрашенных азурэозином препаратах показало, что высокой и средней степенью адгезивности характеризовались 18 (45,0%) штаммов Candida в виде монокультур и 24 (60,0%) штамма в виде ассоциаций, 11 (27,5%) штаммов в виде монокультур Staphylococcus aureus и 20 (50,0%) штаммов - ассоциаций, выделенных со слизистой оболочки зева, носа и влагалища у женщин - работниц свиноводческого комплекса (табл. 11).
Количество неадгезивных штаммов Candida, выделенных от женщин — работниц, составляло 14 (35,0%) штаммов в виде монокультур и 10 (25,0%) штаммов в виде ассоциаций. Среди штаммов S. aureus неактивными были 24 (60,0%) штамма в виде монокультур, 12 (30,0%) штаммов в виде ассоциаций. Обращает на себя внимание тот факт, что у штаммов Candida и S. aureus, обнаруженных в ассоциациях друг с другом, наблюдается сдвиг в сторону усиления адгезивных свойств по сравнению со штаммами, выделенными в виде монокультур.
Для оценки степени адгезивности более адекватным показателем является индекс адгезивности микроорганизмов (ИАМ) - среднее количество микробных клеток на одном участвующем в адгезивном процессе эритроците. Для штаммов Candida, изолированных со слизистых верхних дыхательных путей и урогенитального тракта в виде монокультур и ассоциаций со стафилококком он равен соответственно 2,7 и 2,9, в связи, с чем они были отнесены к среднеадгезивным штаммам. Штаммы стафилококков были отнесены также к среднеадгезивным на основании индекса их адгезивности 2,6 и 2,9 соответственно.
Во второй серии исследований проводилась оценка адгезивной активности штаммов кандид к буккальным эпителиоцитам в соответствии с методом, описанным Маянским А.Н. и соавторами [63].
Результаты адгезивной активности штаммов Candida, выделенных в виде монокультур и ассоциаций в реакции агглютинации с буккальными эпи-телиоцитами отражены в таблице 12.
Для 65,0% штаммов Candida, выделенных виде монокультур характерна высокая степень адгезивности, у 25,0% штаммов наблюдалась средняя степень адгезивности и у 10,0% - низкая степень адгезивной активности, а у штаммов Candida, выделенных в ассоциации со стафилококком высокая степень наблюдалась у 75,0% штаммов, средняя степень адгезивной активности наблюдалась у 17,5% штаммов, у 7,5% штаммов наблюдалась низкая степень адгезивности. Нулевая степень активности не наблюдалась в обеих группах.
При изучении адгезивной активности грибов рода Candida к эпителиоци-там было выявлено, что наблюдается сдвиг в сторону усиления адгезивных свойств у 75% грибов, выделенных в ассоциации со Staphylococcus aureus, что связано с коадгезией этих микроорганизмов. В монокультуре адгезивная активность отмечена у 65% штаммов грибов рода Candida, осуществленная непосредственно к рецепторам эпителиоцитов.
Персистентные свойства у штаммов бактерий Staphylococcus aureus и грибов рода Candida
Способность бактерий преодолевать защиту организма хозяина от инфекционных агентов характеризует адаптационные возможности микробных клеток и обеспечивает их персистенцию. Для выявления факторов, способствующих сохранению жизнеспособности бактерий в организме, проводили изучение свойств персистенции: антилизоцимную (АЛА), антикомплементарную (АКА) активности. Исходя из этого, в задачу наших исследований входило изучение факторов персистенции у штаммов Candida и Staphylococcus aureus, выделенных в виде монокультур и ассоциаций.
Исследования показали, что способность к инактивации факторов про-тивоинфекционной резистентности макроорганизма, в частности АЛА, АКА, довольно широко представлена у всех исследованных штаммов кандид и стафилококков, выделенных у работниц из различных биотопов организма (рис. 10).
Установили, что в среднем АЛА, АКА обладали 100% штаммов кан-дид, а у золотистого стафилококка выделенного на среде Чистовича АЛА проявлялась у 95,6% штаммов, АКА у 97,1% штаммов.
Для оценки диагностической значимости и информативности признаков персистенции микроорганизмов представлялось необходимым изучить эти свойства в сравнительном аспекте, т.е. у культур Candida и Staphylococcus aureus, выделенных в виде монокультур и ассоциаций. Тем более, что в литературе мы не нашли данных о проявлении персистентных свойств у Candida и S. aureus при выделении их из различных биотопов организма работниц агропромышленного комплекса в ассоциации друг с другом.
Роль лизоцима в защите макрорганизма от инфекции общеизвестна. Некоторые авторы полагают, что антилизоцимная активность способствует длительной выживаемости бактерий в макроорганизме и может быть использована в условиях баклабораторий для оценки этиологической роли выделенных культур [82]. Свойство бактерий инактивировать лизоцим хозяина, которое определяется как антилизоцимная активность, широко встречается у стафилококков. У кандид лизоцим препятствует их жизнедеятельности, нейтрализуют их вирулентность, дестабилизируют мембраны [97].
Изучение проявления данного признака у стафилококков и кандид, выделенных у женщин-работниц в виде монокультур (1 группа) и ассоциаций (2 группа), показало следующее. Антилизоцимной активностью обладали все изученные штаммы Candida 1,2 групп и соответственно 95,0%, 97,5% штаммов Staphylococcus aureus.
Диапазон концентраций лизоцима в серии опытов составил 0-10 мкг/мл. При концентрации лизоцима 0-2 мкг/мл антилизоцимная активность проявлялась у 100% штаммов Candida 1 и 2 группы, при концентрации 2-3 мкг/мл 30 (75,0%) - 1 группы, 36 (90,0%) - 2 группы. АЛА штаммов кандид, выделенных из различных биотопов, 1 и 2 группы при концентрации лизоцима 10 мкг/мл проявлялась соответственно в 8 (20,0%), 9 (22,5%) случаев (р 0,05). Штаммы золотистого стафилококка, выделенные у женщин- работниц в виде монокультур и ассоциаций с Candida на среде Чистовича соответственно в 5,0% и 2,5 % случаев АЛА не проявляли. У штаммов Staphylococcus aureus 1 и 2 групп, обладающих АЛА, по мере увеличения концентрации лизоцима от 0-2 мкг/мл до 10 мкг/мл наблюдали снижение частоты проявления этого признака соответственно до 7 (17,5%) и 13 (32,5%). Обращает на себя внимание тот факт, что культуры, изолированные в виде ассоциаций проявляют антилизоцимную активность при высоких концентрациях лизоцима, чем изоляты, выделенные в виде монокультур (рис. 11). Следует отметить, что в зависимости от способности Staphylococcus aureus и грибов рода Candida инактивировать лизоцим в той или иной концентрации, все исследуемые штаммы можно разделить на высоко-, средне-, низкоактивные и неактивные. На рисунках 12 и 13 показано процентное соотношение штаммов S. aureus и Candida, выделенных в виде монокультур и ассоциаций, проявляющих различную степень антилизоцимной активности. Установили, что 10 (25%) штаммов Candida в виде монокультур и 8 (20%) ассоциаций обладали низкой (0-2 мкг/мл) антилизоцимной активностью, 12 (30%о) и 9 (22,5%) - средней (3-4 мкг/мл) антилизоцимной активностью и 18 (45%) штаммов в виде монокультур, 23 (57,5% ) штаммов в виде ассоциаций обладали высокой (10 мкг/мл) антилизоцимной активностью (рис. 14). Среди штаммов Staphylococcus aureus средней активностью обладали 18 (45,0%) штаммов из 1 группы, 16 (40%) из 2 группы, высокой активностью - 7 (17,5%) и 13 (32,5%) соответственно. Количество штаммов, не обладающих АЛА составляло 5,0% и 2,5% (рис. 15). Таким образом, клинические штаммы грибов рода Candida и S. aureus, выделенные в виде ассоциаций у женщин-работниц свиноводческого комплекса, обладают более высокой степенью АЛА, чем штаммы, изолированные в виде монокультур (р 0,05), что необходимо учитывать при оценке этиологической роли данных микроорганизмов в возникновении дисбиоти-ческих состояний. Комплемент, как естественный фактор резистентности организма, обеспечивает выраженность проявления защитных сил против патогенных и потенциально-патогенных микроорганизмов. Но он может подвергаться бактериальной деградации и, таким образом, антикомплементарная активность (АКА) бактерий способствует их длительному персистированию в организме [16]. АКА активность выявлена у многих условно-патогенных энтеробакте-рий и стафилококков. У дрожжеподобных грибов рода Candida АКА проявляется в динамической структуре клеточной стенки и наличии протеиназ, которые способны расщеплять факторы комплемента [97]. Мы нашли необходимым изучить частоту встречаемости АКА среди штаммов Candida и Staphylococcus aureus, выделенных в виде монокультур и ассоциаций, у женщин-работниц агропромышленного комплекса. Проведенные исследования показали, что все изученные штаммы Candida и 38 (95%) штаммов S. aureus в виде монокультур и 39 (97,5%) в виде ассоциаций обладали антикомплементарной активностью. На рис. 14 показано, что при низкой концентрации комплемента - (5,0 анти - СН5о) АКА проявляли 40 (100%) штаммов Candida 1 и 2 групп, штаммы S. aureus соответственно 38 (95%), 39 (97,5%). АКА при средней концентрации комплемента (5,1-15 анти - СН5о) среди штаммов Candida, выделенных в виде монокультур и ассоциаций со стафилококком, регистрировались у 30-24 (75,0-60,0%) и 35-29 (87,5-72,5%) штаммов, среди штаммов S. aureus -29-21 (72,5-52,5%) и 31-25 (77,5-62,5%).
![Условия труда и социальные факторы в формировании здоровья женщин-работниц современного животноводческого комплекса [Электронный ресурс]](/i/i/4245/175358.png "Условия труда и социальные факторы в формировании здоровья женщин-работниц современного животноводческого комплекса [Электронный ресурс] Сафин Винер Флюрович")
