Введение к работе
Актуальность работу. ЛектиноЕые Ееш«ства находят Широкое применение 10 многих отраслях, особенно е пищевой и кондитерской промышлекностях, как 'гсуднеобразущео вещество. В последнее время интерес к пвотзшоЕШ* веществам нозрос е связи с последствиями аварий на Чернобыльской и Санкт-Петербургской АЗС, благодаря способности пектинов связывать и выводить из организма тяжелые металлы и радионуклида» Однако не удовлетворяются дачсе потребности кондитерской промышленности, j ісмотря на большую доступность сырья для производства пектиновых веществ. Зто связано с отсутствием прогрессивных технологий и технологического оборудования, ішалифщярованнвх кадров и неэффективностью использования имеющегося сырья.
Совершенствование способов получения пектияоЕых веществ является актуальной задали и на сегодняшний день.. Одним из приоритетных направлений исследований в области разработки способов получеши пектиновых веществ и ^-З) -г&чактуроновой кислоты .яя-ляется ферментативный способ и поиск соответствующих культур, необходимых для этих далей,
Цедъ и.задачй.исследования. Целью работы был подбор микроорганизмов, its изучение и исяользовр'-ще для ЬэрмбЕТб.тиЕНОго способа получения пектиновых веществ, йС-ь -галактуроновой кислоты, увеличение экстрактивных веществ кофе из кофейного шлама; перспективы их использоБакия. Исходя аз цели работы, были поставлены следухлщ j задачи:
-
Изучение лектолитическях и целлюлолйтических активностей гриба Geotrichum oandidum ЗС и полученного из него штамма "J~ ( такта Geotrichum cendluum" 3Q-I06, выделение и очистка эндо-по-лигалактуроназы из G. cand. ЗО до гомогенного состояния с последующим использованием для мацерации клеточных стене, нклгча-. вщйх пектиновые вещества,, ' '
-
Разработі^і ферментативного способа получения пектина,
Д- -1>~галактуроновой кислоты с использованием фильтратов . /ль-туралькых жидкостей и ферментных препаратов из мицелдиальных грвбоЕ G. cand. ЗС и мутантного штамма G.Cenu. 3C-I06, а также ісультурн Triohosporon idebahnii.
3. Изучение возможности использования пектиновых.веществ в
качества полисахаридных сорбоитов для разделения алкрчоидов и .
для связывания лекарственных веществ. - '
4. Изучение влияния ферментных систем гриба G. card. ЗС-106 для увеличения экстрактивных веществ кофе из кофейного шла-ма,-
ручная новизна работы состоит е изучении и характеристики пектодитических и целдюлодитических акгиЕнос.-)й гриба G.cand. ЗС и мутантного штамів G. oand. 3C-I06, подбор условий культивирования с целью регулирования ферментативных активностей пра-монительно к целям его. использования.
Разработана схема Еыделения и очистки экдс-полагалакгурока-зк из гриба G. cand. ЗС и изучены ее физико-химические свойства.
Предложен ферментативный способ получения пектиноЕйх веществ. и «і- -р -галактуроноЕой гаасдоты. Определены необходимые количеств венные соотношения ферментов и их участие е получении пектина и ot- -d -галактуроноЕой кислоты на основе модельных ферментных раствороЕ, составленных из гомогенно очищенной полигалактурона-зы, фракций глэканаз и цолигалактуроназ, полученных, аффинной хроматографией на микрокристаллической целлюлозе ферментных растворов гриба G. oand. ЗС. .
Использование яектиноЕых : эщестЕ в качэстне сорбентоЕ для разделения смеси алкалоидов и полимера носителя для сеязнеяния лекаре*генных ьеществ с целью увеличения их пролонгирующего ДРЧ-г стеия.
Практическое значение работы,. Разработаны ферментативные способы получения пектина, & -D -галактуроноЕой кислоты и уве-*-личен . экстракгиЕшас веществ кофе с использованием комплекса ферментов из гриба Geotrichum candidum ЗС и мутантного штамма Geotrichum candidum 3C-IQ6, не требующие сложного оборудования,
Разработана схема выделения и очистки эндо-полигалактурона-зы из гриба f-wtricbum candidum ЗС, позволяющая полутать гомогег-но очищенный белок, который может быть использован при изучении а выделении полисахаридов.
Показана возможность использования сшитой пєіЛоеой кислоты СПК-2 для раздаления смеси алкалоадов, а также использование пе«-
ТИШЕЫХ ЕЗЩЄСТВ В КаЧеСТЕё ПОЛШврОЕ НОСИТелеЙ ДЛЯ СЕЯЗНЕаНИЯ
лекарственных еєщєоте с целью пролонгирования их действия. На защиту выносятся:
результаты исследований пеллюлолитических и пектолитичес-ких активностей ферментов гриба Geotrichum "candidura ЗС и мутантного штамма Geotrlchum candidum ЭС-106;
способ Еыделения и очисткр эндо-полигалактуроназы из Geo-
&
trichuai candldun ЗС до гомогенного состояния, с целью использования их для изучения гидролиза полисахаридов клеточных стенок высших растений;
результаты использования ферментных систем гриба G. caudi-йшп ЗС, мутантного waMMa G.candidum 3C-IQ6 И Trichosporon kle~ ЬеОшіі для получения пектиновых веществ, ^-D-галактурсноноЁ кислоты и увеличения экстрактивных еєщєсте кофе;
возможность использования пектиновых веществ как сорбентов дал разделения алкалоидов и как полимеров носителей для связывания лекарственных веществ с целью пполонгнрйвания их действия.
Апробация работы. Результаты диссертации были представлены на"Юбвлейной конференции, посвященной памяти М.И.ГоряеЕа" (Алма--Ата, 1985 г.), ІУ Всесоюзном .Симпозиум:, по молекулярной аид-костной хроматографии {Алма-Ата, 1987 г.), 1-ом Всесоюзном симпозиуме "Препаративная хроматография физиологически активных веществ на полимерных сорбента" (Ленинград, 1988 г.), Всесоюзной конференции "Методы получения, анализа и применения ферментое (Юрмала, 1990 г.), Всесоюзной научно-пр этической конференции "Ферменты - народному хозяйству" (Черновцы, 1990 г.), III Всесоюзной конференции "Биосинтез целлюлозы и других компонентов клеточной стенки" (Казань, I9S0 г.). У1.-ом Всесоюзном симпозиуме "Инженерная энзкмология" (Москва, 1991 т.), Республиканской конференцій "Химические превращения пищевых полимерОЕ" ''Светлогорск, 1991 г.)
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 12 работ. Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, методической части, 7 глав обсуздеш пол^чея--ных экспериментальных данных, заключения, выводов, списка цитированной литературы, 2 приложения. Работа изложена нг? /Д^сгра-нацах машинописного текста, содержит J 0 рисунков и / іб«*щ. Список литератур*' включает 196 наиметгованкіі, е том числе /У? иностранных авторов.