Введение к работе
Актуальность проблемы. Вред курения хорошо известен. У курящих повышается вероятность развития рака легких и других злокачественных новообразований, сердечно-сосудистых патологий, хронических респираторных заболеваний (IARC, 2004; ВОЗ, 2008). Особо отмечено комплексное неблагоприятное влияние курения на протекание беременности, развитие плодов и новорожденных. Курение - одна из причин, приводящих к перинатальной смертности, внутриутробной задержке развития плода, дефициту веса и недоношенности, снижению иммунитета, а также патологических изменений в плаценте (Herrmann М., King К., Weitzman М., 2008; Shea К. A., Steiner М., 2007). Принципиально, что продукты сгорания табака негативно воздействуют не только на курящих, но также на лиц, подвергающихся пассивному курению (Wingle D. Т. et al., 2008; Rogers L. M., 2009; Jauniaux E., Burton G J., 2007).
Широкая пропаганда, отрицающая курение, не приводит к желаемому результату, доля курящих практически не уменьшается, а среди женщин детородного возраста увеличивается (ВОЗ, 2009, 2011). От 11 до 36 % женщин не отказываются от пагубной привычки даже во время беременности, что определяет необходимость поиска средств фармакологической коррекции репротоксических эффектов курения (Coleman Т., 2007). Поэтому целесообразны экспериментальные исследования закономерностей и механизмов негативного воздействия курения на пре- и постнатальное развитие потомства. Однако, работы, посвященные экспериментальной оценке репродуктивной токсичности табачного дыма и разработке корректоров патогенных эффектов курения, в рамках решения проблемы антенатальной охраны плода (Володин Н. Н., 2009, Аб-рамченко В. В., 2009), единичны и недостаточно информативны (De Flora S., 2003).
В качестве базовой мишени при поиске фармакологических корректоров эффектов курения возможно рассматривать генотоксические поражения, которые, по мнению многих авторов (de la Chika R. A. et al., 2005; Shulman L. P. et al., 1991; Tsui H.-C. et al., 2008; Lima P. H. et al., 2008; Florek E., Tadrowska M., Szyfter K., 1998), играют ведущую роль в формировании негативных последствий активного и пассивного курения, в том числе, у беременных. Эта гипотеза вытекает из данных о генотоксиче-ских эффектах продуктов сгорания табака в соматических клетках (Husgafvel-Pursiainen К., 2004; De Marini D. M., 2004). Сведения о генотоксическом влиянии ку-
рения непосредственно на эмбриональные ткани крайне ограничены (Jalili Т., Murthy К., Schiestl Н., 1998; Zenzes М. Т. et al., 1999; Zenzes М. Т., 2000). До настоящего времени отсутствуют работы, характеризующие поврежденность ДНК в эмбриональных тканях методом «ДНК-комет», признанным в качестве наиболее значимого для регистрации повреждений ДНК (Valverde М., Rojas Е. 2009).
Индукция генотоксических поражений может быть снижена под влиянием антимутагенов различной природы, их спектр довольно широк (Durnev A. D. et al., 2009). Среди них особое внимание привлекает афобазол, разработанный в НИИ фармакологии им. В.В. Закусова РАМН. Афобазол, помимо основной анксиолитической активности, обладает нейропротекторным, антиоксидантным, цитопротекторным, антимутагенным и антитератогенным эффектами (Середенин С. Б., Воронин М. В., 2009; Дурнев А. Д. и соавт., 2009). Уникальный спектр фармакологической активности определил перспективу исследования влияния афобазола на репродуктивную и генетическую токсичность табачного дыма в эксперименте.
Цель исследования. Комплексное исследование влияния афобазола на поврежденность ДНК в клетках плаценты и эмбрионов, антенатальное и постнатальное развитие потомства крыс, подвергнутых воздействию табачного дыма.
Основные задачи исследования. Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:
-
Исследовать воздействие табачного дыма на поврежденность ДНК в плаценте и эмбриональных тканях, антенатальное и постнатальное развитие потомства крыс, подвергнутых воздействию табачного дыма.
-
Оценить влияние афобазола в дозах 1 и 10 мг/кг при ежедневном пероральном введении с 1-го по 13-й дни беременности на индукцию табачным дымом повреждений ДНК методом «ДНК-комет» в плаценте и эмбрионах крыс.
-
Исследовать влияние афобазола в дозах 1 и 10 мг/кг при ежедневном пероральном введении на протяжении всего периода беременности на проявления репродуктивной токсичности у потомства крыс, подвергнутых воздействию табачного дыма.
-
Оценить действие афобазола на формирование условных рефлексов у потомства крыс, подвергнутых воздействию табачного дыма в период беременности с помощью поведенческого теста «Т-образный лабиринт».
5. Провести сопоставление данных, полученных при исследовании влияния афоба-зола на потомство «курящих» крыс при пероральном пренатальном, постнатальном и сочетающим пре- и постнагальное введение препарата режимах обработки животных.
Научная новизна. Предложена и охарактеризована экспериментальная модель «пассивного курения», выявляющая негативное влияние табачного дыма на антенатальное и постнагальное развитие крысят. Методом «ДНК-комет» впервые охарактеризовано генотоксическое действие табачного дыма в эмбриональных тканях и плаценте, показано увеличение поврежденное ДНК в клетках плаценты и эмбрионов. Впервые установлена принципиальная возможность уменьшения генотоксических и репротоксических эффектов табачного дыма в клетках эмбрионов и плаценте с помощью афобазола в дозах 1 и 10 мг/кг при пренатальном, постнатальном и сочетающим пре- и постнатальное введение режимах обработки животных.
Научно-практическая значимость. Результаты экспериментального исследования, демонстрирующие снижение генотоксических и репротоксических эффектов табачного дыма, а также нормализацию становления условно-рефлекторной деятельности у потомства под влиянием анксиолитика афобазола в дозах, соответствующих терапевтическим, определяют перспективу его клинического изучения в качестве возможного средства профилактики и коррекции нежелательных эффектов табачного дыма при активном и пассивном курении беременных в рамках решения проблемы антенатальной охраны плода.
Апробация работы. Результаты диссертационной работы были доложены и обсуждены на 4-ом Международном конгрессе по репродуктивной медицине (Москва, 2010), 17-ом Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2010), б-ом съезде Российского общества медицинских генетиков (Ростов-на-Дону, 2010), 5-ой Международной конференции «Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам» (Московская область, 2010), 40-м съезде Европейского общества по мутагенам окружающей среды (Oslo, 2010), Пленуме Научного совета по экологии человека и гигиене окружающей среды и Научного совета по медико-экологическим проблемам здоровья работающих «Научно-методические и законодательные основы обеспечения генетической безопасности факторов и объек-
тов окружающей и производственной среды в целях сохранения здоровья человека» (Москва, 2010).
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на ... страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов экспериментов, их обсуждения, выводов и списка литературы. Иллюстрирована ... таблицами и ... рисунками. Библиографический указатель включает ... отечественных и ... иностранных источника.
