Введение к работе
Актуальность проблемы. Заболевания печени и желчевыводящих путей являются весьма распространенными во всем мире и занимают одно из ведущих мест в структуре заболеваемости и смертности населения нашей страны. Опасность для здоровья и социальная значимость патологии печени различной этиологии определяют необходимость постоянной разработки новых эффективных патогенетически обоснованных методов фармакологической терапии и профилактики данных заболеваний [Подымова С.Д., 1998; Саратиков А.С., Венгеровский А.И., 2000].
Так, хорошо известно, что хронический гепатит различной этиологии может длиться многие годы, при этом его часто диагностируют на поздних стадиях развития болезни, когда резко возрастает вероятность развития цирроза печени и хронической печеночной недостаточности [Хазанов А.И., 2002]. В связи с вышесказанным, разработка методов, способных эффективно стимулировать регенерацию печени, остается весьма актуальной.
Полученные в последние годы сведения о свойствах и закономерностях жизнедеятельности мультипотентных клеток-предшественников открыли возможность развития нового направления в медицине - клеточной терапии [Сухих Г.Т., Малайцев В.В. и др., 2002; Owen М., Friedenstein A.J., 1988; In't Anker P.S., Noort W.A., Scherjon S.A. et al., 2003]. Клеточная терапия представляет собой совокупность методических подходов, направленных на стимуляцию восстановления функционально активной здоровой ткани на месте повреждения, преимущественно, за счет активации и использования регенераторного потенциала различных типов стволовых клеток организма.
К настоящему времени получены данные о наличии во многих тканях организма мезенхимальных стволовых клеток (МСК) [Сухих Г.Т., Малайцев В.В. и др., 2002; Orlic D., Kajstura J.,Chimenti S. et al., 2001; In't Anker P.S., Noort W.A., Scherjon S.A. et al., 2003].
В недавних исследованиях была доказана способность стволовых клегок костного мозга мигрировать в область поврежденной печени [Alison M.R., Poulsom R., Jeffery R. et al., 2000; Theise N.D., Nimmakayalu M., Gardner R. et al., 2000; K6rbling M., Katz R.L., Khanna A. et al, 2002].
Поскольку в литературе описаны положительные результаты при
трансплантации собственных стволовых клеток костного мозга больным с
цир'розом печени, можно предположить, что мезенхимальные стволовые
клетки в определенных условиях способны дифференцироваться в
печеночные клетки [Miyazaki М., Akiyama I., Sakaguchi М. et al., 2002;
Newsome P. N., 2003; Ishikawa F., 2003; Kakinuma S., Tanaka Y., Chinzei R.,
Watanabe M. et al., 2003; Hong S.H., Gang E.J., Jeong J.A. et al., 2005]. Одним
из наиболее перспективных направлений развития метода клеточной терапии
представляется мобилизация эндогенных стволовых клеток и их
последующий хоминг в пораженные ткани с помощью фармакологических
агентов. По данным литературы, наиболее мощным стимулятором
мобилизации регенераторно-компетентных клеток считается
гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (Г-КСФ) [Козлов В.А.,
Сенников СВ., 2004; Theocharis S.E., Margeli А.Р., Kittas C.N., 1999; Di Campli C, Piscaglia A.C., Pierelli L. et al., 2004; Yannaki E., Athanasiou E., XagorariA. etal.,2005].
В то же время известно, что сверхмалые дозы антител к эндогенным регуляторам физиологических функций способны оказывать эффект, аналогичный тому, который осуществляют данные биологически активные вещества in vivo [Эпштейн О.И., Штарк М.Б., Дыгай A.M. и др., 2005].
С указанных позиций несомненный теоретический и практический интерес представляет изучение возможности модуляции функций различных классов эндогенных стволовых клеток с помощью препаратов на основе Г-КСФ и сверхмалых доз антител к Г-КСФ (анти-Г-КСФ). Полученные в этом направлении данные позволили бы разработать принципиально новый патогенетически обоснованный способ стимуляции процессов регенерации в печени, в частности, при хронических гепатитах.
Цель исследования. Изучить состояние различных пулов стволовых клеток на модели СС14-гепатита. Разработать патогенетически обоснованный способ терапии хронического гепатита на основе модуляции функций стволовых клеток препаратами гранулоцитарного колониестимулирующего фактора и сверхмалых доз антител к гранулоцитарному колониестимулирующему фактору.
Задачи исследования:
-
Изучить состояние костномозгового и циркулирующего пулов мезенхимальных клеток-предшественников разной степени зрелости, а также регионарных стволовых клеток печени при экспериментальном хроническом гепатите.
-
Исследовать гепатопротекторную активность препарата гранулоцитарного колониестимулирующего фактора на модели хронического гепатита.
-
Исследовать гепатопротекторную активность препарата сверхмалых доз антител к гранулоцитарному колониестимулирующему фактору на модели хронического гепатита.
-
Изучить механизмы гепатопротекторного действия препаратов сверхмалых доз антител к гранулоцитарному колониестимулирующему фактору и гранулоцитарного колониестимулирующего фактора.
Научная новизна. В работе впервые всесторонне изучено состояние различных пулов мезенхимальных клеток-предшественников в костном мозге и периферической крови, а также динамика содержания регионарных клеток-предшественников в печени при экспериментальном хроническом гепатите. Выявлено участие мезенхимальных стволовых клеток костного мозга в процессах регенерации печени при ее хроническом поражении. Полученные результаты свидетельствуют о недостаточности либо несостоятельности указанных механизмов для восстановления печеночной ткани.
В эксперименте на модели ССЦ-гепатита изучены гепатопротекторные свойства препаратов Г-КСФ и сверхмалых доз антител к Г-КСФ. Показана
высокая противосклеротическая эффективность данных средств, а также противовоспалительная активность препарата анти-Г-КСФ. Установлено, что гепатопротекторное действие обоих препаратов связано со стимуляцией, мобилизацией, миграцией и детерминированным хомингом в пораженную печень мезенхимальных стволовых клеток.
Практическая значимость. Выполненные исследования позволили разработать патогенетически обоснованные методы терапии хронического гепатита и восстановления функционально активной ткани печени, основанные на модуляции функций эндогенных пулов стволовых клеток гранулоцитарным колониестимулирующим фактором и препаратом сверхмалых доз антител к Г-КСФ. По материалам работы подготовлены отчеты о специфической активности указанных препаратов для получения разрешения на клинические исследования. Получен патент (RU) №2295971 от 27 марта 2007 г. «Способ терапии экспериментального хронического токсического гепатита».
Апробация работы. Материалы диссертации докладывались и обсуждались на конференции молодых ученых «Актуальные проблемы экспериментальной и клинической фармакологии» (Томск, 2005), на конференции «Фармакологическая регуляция стволовой клетки» (Томск, 2005), на ежегодной Всероссийской и международной конференции «Стволовые клетки и перспектива их использования в здравоохранении» (Москва, 2006) и на пленуме патофизиологов Сибири, приуроченном к 50-летяю кафедры патофизиологии Алтайского государственного медицинского института (Барнаул, 2006).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 4 работы, в том числе 3 - в реферируемых журналах, рекомендуемых перечнем ВАК.
Объем и структура работы. Диссертация изложена на 121 страницах машинописного текста и состоит из введения, 4-х глав, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 7 рисунками и 15 таблицами. Библиографический указатель включает 146 источников, в том числе 54 отечественных и 92 иностранных.
![Дифференциальная диагностика синдрома боли в грудной клетке при гастроэзофагеальной рефлюксной болезни и нарушениях моторной функции пищевода [Электронный ресурс]](/i/i/4442/185364.png "Дифференциальная диагностика синдрома боли в грудной клетке при гастроэзофагеальной рефлюксной болезни и нарушениях моторной функции пищевода [Электронный ресурс] Позднякова Оксана Юрьевна")
