Содержание к диссертации
Введение
ГЛАВА 1. Кобальт и его роль в организме. физиологические эффекты энтеросорбентов (обзор литературы) 11
1.1 . Поступление, распределение и выведение кобальта из организма 11
1.2. Патогенные эффекты кобальта и его соединений на организм. Влияние кобальта на почку 15
1.3.Виды сорбентов. Применение в медицине 20
1.3.1 .Природные сорбенты 23
1.4. Цеолитоподобные глины РСО-Алании. Их эффекты в организме 30
ГЛАВА 2. Материал и методы исследования 35
2.1. Методические приемы, варианты опытов, объём исследований 35
2.2.Общие методы исследования 39
2.3.Методики определения концентрации исследуемых веществ и
функциональных показателей 40
ГЛАВА 3. Влияние ир лита-1 и ирлита-7 на основные процессы мочеобразования, на содержание электролитов в крови, их почечную обработку у интактных крыс 42
Выводы 54
ГЛАВА 4. Влияние сорбентов ирлит-1 и ирлит-7 на основные процессы мочеобразования и почечную обработку катионов у крыс на фоне интрагастрального введения хлорида кобальта в дозе 0,2мг/кг 55
4.1. Результаты исследований в условиях спонтанного диуреза 55
4.1.1. Влияние введения хлорида кобальта в дозе 0,2мг/кг 55
4.1.2. Влияние Ирлита-1 на фоне введения хлорида кобальта 58
4.1.3. Влияние Ирлита-7 на фоне введения хлорида кобальта 61
4.1.4. Влияние смеси Ирлит 1+7 на фоне введения хлорида кобальта 65
ВЫВОДЫ 71
4.2. Результаты исследований в условиях водной нагрузки 73
4.2.1. Влияние введения хлорида кобальта в дозе 0,2мг/кг 73
4.2.2. Влияние Ирлита-1 на фоне введения хлорида кобальта 77
4.2.3. Влияние Ирлита-7 на фоне введения хлорида кобальта 82
4.2.4. Влияние смеси Ирлит 1+7 на фоне введения хлорида кобальта 86
ВЫВОДЫ 91
ГЛАВА 5. Влияние сорбентов ирлит-1 и ирлит-7 на основные процессы мочеобразования и почечную обработку катионов у крыс на фоне интрагастрального введения хлорида кобальта в дозе 2,0МГ/КГ 93
5.1. Результаты исследований в условиях спонтанного диуреза 93
5.1.1.Влияние введения хлорида кобальта в дозе 2,0мг/кг 93
5.1.2. Влияние Ирлита-1 на фоне введения хлорида кобальта 97
5.1.3. Влияние Ирлита-7 на фоне введения хлорида кобальта 101
5.1.4. Влияние смеси Ирлит 1+7 на фоне введения хлорида кобальта 105
ВЫВОДЫ 112
5.2. Результаты исследований в условиях водной нагрузки ' 114
5.2.1. Влияние введения хлорида кобальта в дозе 2,0мг/кг 114
5.2.2. Влияние Ирлита-1 на фоне введения хлорида кобальта 118
5.2.3. Влияние Ирлита-7 на фоне введения хлорида кобальта 122
5.2.4. Влияние смеси Ирлит 1+7 на фоне введения хлорида кобальта 126
ВЫВОДЫ 131
ГЛАВА 6. Влияние сорбентов ирлит-1 и ирлит-7 на накопление кобальта в плазме крови, тканях (печень, почки) и экскрецию с мочой и калом у крыс. гистологическое исследование тканей. исследование содержания белка в моче 133
6.1 .Исследование содержания кобальта 133
6.2 Гистологические исследования тканей 139
6.3. Исследования содержания белка в моче 145
ВЫВОДЫ 147
ГЛАВА 7. Заключение и обсуждение полученных результатов 148
Общие выводы 162
Библиографический список использованной литературы 164
Приложения 187
- Поступление, распределение и выведение кобальта из организма
- Патогенные эффекты кобальта и его соединений на организм. Влияние кобальта на почку
- Влияние введения хлорида кобальта в дозе 0,2мг/кг
- Влияние Ирлита-7 на фоне введения хлорида кобальта
Введение к работе
Кобальт жизненно важный микроэлемент, воздействующий на многие процессы жизнедеятельности в организме. Он оказывает влияние на активность большинства ферментов, синтез витаминов и гормонов, воздействует на белковый, жировой, углеводный и минеральный обмен, стимулирует эритропоэз. В организме взрослого человека содержится примерно 1,2мг кобальта (Ю.А. Ершов., Т.В. Плетенева., 1989), поступающего в основном с пищей, в составе витамина В]2 и других кобальтсодержащих веществ. Однако, при экзогенных воздействиях кобальт обладает высокой повреждающей способностью (E.Szakmary et all., 2001) и его относят к веществам 1 класса опасности (Э.К. Орджоникидзе., А.В. Рощин., 1991). Токсические эффекты кобальта проявляются полиморфным поражением кроветворной, сердечнососудистой, дыхательной, иммунной систем, а также поражением почек, поскольку почки, вследствие морфологических и функциональных особенностей, являются одним из главных органов-мишеней для ксенобиотиков (A. Goyer. 1990; D. Czock, U. Hausler, С. Aymanns et all., 2005). Накопление кобальта в тканях почек приводит к дистрофическим и некробиотическим изменениям почечного эпителия (E.Szakmary et al., 2001), изменяются трансмембранный транспорт воды и электролитов (О.А. Гончаревская и соавт., 1985; Ю.В. Наточин, 1985; MX. Schwartzman et al., 1986; A.Jungwirt et al., 1990; Y.B. Zhang et al.,1998).
Рост загрязнения окружающей среды такими токсичными, легко накапливающимися в организме веществами, как тяжелые металлы обусловливает насущную необходимость создания, разработки и внедрения новых способов профилактики поступления и усиления выведения их избытка из организма. Широко известные детоксиканты, такие как тиоловые соединения, комплексоны и др. (Г.И. Музя и соавт., 1989; М.Д. Машковский, 2005) при длительном их использовании вызывают различные побочные
эффекты, в том числе выводят из организма микроэлементы и жизненно важные ионы (железо, кальций и др.), нарушают обменные процессы, что затрудняет их профилактическое применение. С этой целью экспериментальному и научному изучению подвергается широкий спектр природных минералов - цеолитов и цеолитоподобных глин, которые, благодаря своей структуре и разнообразию вещественного состава, обладают сорбционными, ионообменными и каталитическими свойствами (Н.И. Петункин и соавт., 1990). Они как энтеросорбенты могут способствовать выведению из организма различных веществ (А.Ф. Кузнецов и др., 1992; М.Я. Тремасов и соавт., 1996; А.С. Дуварова и соавт.,1992; A.M. Шадрин, 1994;. А.Д. Герасев и соавт., 2001, 2005), в том числе тяжелых металлов и радионуклидов (В.И. Бгатов и др., 1987; Л.Е. Панин и соавт., 1992; В.В. Устенко и др., В.Г. Селятинская и соавт., 1994). Отсутствие токсических, свойств, легкодоступность и малые затраты при добыче природных минералов, найденных на территории РСО-Алании, названных Ирлитами (В.Б. Цогоев и соавт., 1998, 2001; Т.К. Тезиев и соавт., 2000; И.Д. Тменов и соавт., 2000) определили цель и задачи нашего исследования.
Целью работы явилось изучение эффектов и патофизиологических механизмов влияния разновидностей природных минералов Ирлитов (Ирлита-1 и Ирлита-7) на электролито-водовыделительную функцию почек при интрагастральном введении низких дозировок хлорида кобальта в организм крыс, а также на содержание, распределение и выведение кобальта из организма.
Для достижения указанной цели решались следующие конкретные задачи исследования:
1. Изучить эффекты Ирлита-1, Ирлита-7 и их смеси Ирлит1+7 (1:1) на водовыделительную функцию почек, баланс катионов в крови и их почечную обработку у крыс линии Вистар в условиях спонтанного диуреза и функциональной водной нагрузки.
Изучить влияние профилактического применения Ирлита-1, Ирлита-7 и их смеси на диурез, и основные процессы мочеобразования, внутрипочечный метаболизм электролитов и их баланс в крови, а также степень протеинурии у крыс в условиях спонтанного и водного диуреза на фоне внутрижелудочного введения низких дозировок хлорида кобальта.
Исследовать влияние Ирлита-1, Ирлита-7 и смеси Ирлит1+7 на накопление кобальта в тканях (печень, почки), содержание в плазме крови, кале и моче, экскрецию с мочой у крыс при интаргастральном введении низких доз хлорида кобальта.
Изучить влияние Ирлита-1, Ирлита-7 и их смеси на структурные изменения в тканях печени и почек после интрагастрального введения низких доз хлорида кобальта.
Научная новизна. Впервые выявлено влияние разновидностей природных минералов Северной Осетии Ирлита-1, Ирлита-7 и их смеси Ирлит1+7 на водовыделительную функцию почек, баланс катионов в крови и их почечную обработку.
Выявлен слабый динамизм патологических структурных проявлений интоксикации низкими дозами хлорида кобальта и их малая дозозависимость.
В условиях спонтанного и водного диуреза показано положительное влияние Ирлита-1, Ирлита-7 и их смеси на изменения водовыделительной функции почек, электролитный баланс в крови и внутрипочечный метаболизм катионов, вызванные длительным введением хлорида кобальта.
Впервые установлено, что профилактическое применение разновидностей Ирлитов- Ирлита-1, Ирлита-7 и их смеси Ирлит1+7 при введении низких доз хлорида кобальта повышает экскрецию металла с калом, снижает степень его повреждающего действия на ткани почек и печени.
По теме диссертационной работы, на основании полученных данных подана заявка на изобретение в Российское агентство по патентам и товарным знакам, на которую получен патент №2312666 от 20.12.2007г. «Способ профилактики токсического действия и накопления кобальта в тканях у экспериментальных животных при моделировании хронического отравления».
Научно-практическая значимость работы. Исследование носит экспериментальный характер и полученные результаты, демонстрирующие эффекты внутрижелудочного введения низких дозировок хлорида кобальта на диурез и основные процессы мочеобразования, баланс катионов в крови и их почечную обработку относятся к области фундаментальных знаний, так как расширяют представления о действии избытка кобальта в организме. Установленные эффекты разновидностей Ирлитов демонстрируют закономерности влияния энтеросорбентов с ионообменной активностью на электролито- и водовыделительную функцию почек и токсические эффекты избытка кобальта. Материалы исследования могут найти применение при разработке способа практического применения Ирлитов и их клинической апробации для профилактики токсического действия избыточных концентраций кобальта на организм.
Полученные результаты могут использоваться при преподавании физиологических основ энтеросорбции, при исследовании механизмов действия низких дозировок кобальта на органы и системы организма, при разработке способов профилактики и терапии токсических эффектов избыточного поступления в организм тяжелых и цветных металлов, например свинца, никеля, цинка и др.
Материалы диссертации внедрены в учебный процесс на кафедре нормальной физиологии и курсе профпатологии СОГМА.
9 Основные положения, выносимые на защиту:
Двухнедельное энтеральное введение разновидностей Ирлитов- Ирлита-1, Ирлита-7 и их смеси (1:1) в условиях спонтанного диуреза уменьшает скорость клубочковой фильтрации и канальцевую реабсорбцию воды, а в условиях водной нагрузки уменьшает объём суммарного (3-х часового) диуреза, вследствие увеличения канальцевой реабсорбции воды и снижает в неодинаковой степени экскрецию ионов кальция, натрия и калия.
Низкие дозировки хлорида кобальта, не оказывая влияния на уровень спонтанного диуреза, при гипергидратации снижают суммарный трехчасовой диурез, что связано с увеличением канальцевой реабсорбции воды. Уменьшение экскреции натрия при спонтанном диурезе связано с падением фильтрационного заряда, а при гипергидратации - возрастанием кнальцевой реабсорбции этого катиона. Хлорид кобальта приводит к увеличению содержания калия и понижению натрия в плазме крови.
Профилактическое применение разновидностей Ирлитов стабилизирует водовыделительную функцию почек в условиях кобальтовой интоксикации, способствует в разной степени восстановлению экскреции электролитов и нормализует концентрацию калия в плазме крови.
Применение разновидностей Ирлитов при внутрижелудочном введении хлорида кобальта повышает выведение кобальта с калом.
Профилактическое применение Ирлитов при хронической кобальтовой интоксикации снижает степень его повреждающего действия на ткани почек и печени.
Апробация диссертационной работы. Материалы исследований доложены и обсуждались на: Всероссийской научной конференции «Актуальные проблемы экологии и сохранения биоразнообразия России» (Владикавказ, 2005); V конференции молодых ученых СОГМА «Молодые ученые — медицине» (Владикавказ, 2006); Научно-практической конференции Южного федерального округа с международным участием «Экстремальная
10 медицина. Проблемы экстремальных состояний» (Владикавказ., 2006); VI конференции молодых ученых СОГМА и ИБМИ ВНЦ РАН (Владикавказ, 2007); VI международной конференции «Инновационные технологии для устойчивого развития горных территорий» (Владикавказ, 2007); VI региональной научно-практической конференции «Новые технологии в рекреации здоровья населения» (Владикавказ, 2007).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 14 работ.
Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на 230 страницах, включая библиографию и приложения. Работа состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, четырех глав изложения результатов исследования, заключения, общих выводов, списка использованной литературы и приложения. Библиографический указатель включает 185 источников, из них 34 иностранных авторов. Работа иллюстрирована 76 рисунками и 44 таблицами.
Поступление, распределение и выведение кобальта из организма
Кобальт - твердый, тягучий, похожий на железо блестящий металл. Обладает магнитными свойствами. Относится к группе так называемых тяжелых металлов, т.к. атомный вес его составляет 58,93. В природе кобальт в «чистом» виде мало распространен: содержание его в земной коре составляет около 0,004%. Однако, обладая большой способностью к-комплексообразованию, имеет широкое распространение в виде двух- и трехвалентных соединений. Известно, что микроэлементы это элементы-содержание которых в организме находится в пределах от 10"3 до 10"5 %. Кобальта в организме взрослого человека содержится примерно 1,2 мг, из этого количества 14% находится в костях, 43% - в мышцах, остальная часть - в мягких тканях (Ю.А. Ершов, Т.В. Плетенева, 1989). Однако он обладает исключительной биологической активностью и поэтому входит в число наиболее важных (незаменимых) микроэлементов (И.М. Суворов и соавт., 1982). Самым важным комплексом трехвалентного кобальта является витамин В12, в молекуле которого кобальт занимает центральное место.
В организм человека кобальт попадает в составе витамина Bi2 и других кобальтсодержащих веществ, а также с пищей. Суточная потребность в кобальте по В.А. Леонову, составляет до 0,01мг, по А.И. Котову и И.А. Маресину - до 0,03мг, по Р.Д. Габовичу, О.А. Кульской - от 0,06 до 0,12мг (цит. по М.Г. Коломийцевой, Р.Д. Габовичу, 1970). Потребление кобальта с пищей составляет 170- 440мкг/кг (Ю.И. Москалев, 1985). Содержание кобальта в крови колеблется от 4 до 10мкг% (Р.И. Рудакова, И.И. Бусыгина, 1970; С.Н. Бабаджанов, 1973). (цит.по И.М. Суворову и др., 1982). После резорбции транспорт кобальта осуществляется фракциями альбумина, а позже а и —В глобулиновыми фракциями сывороточных белков, часть металла фиксирована в эритроцитах (Э.Н. Левина, 1972). При внутривенной инъекции растворимой соли кобальта металл связывается с у-глобулинами и быстро распространяется по тканям (Ю.А. Ершов., Т.В. Плетенева,1989). Около 95% введенного внутривенно и подкожно кобальта исчезает из крови в течение нескольких минут (М.Г. Коломийцева., Р.Д. Габович,1970; D. W. Rosenberg, 1993).
Накапливается кобальт в наибольшем количестве в печени и почках, сердце и выводится главным образом с желчью и мочой (М.Г. Коломийцева., Р.Д. Габович, 1970; И.М. Суворов и соавт., 1982; Э.К. Орджоникидзе и соавт., 1991; D. Brune et al.,1980; L.L. Southern, D.H. Baker., 1982; L. Jorhem et al., 1989; K. Merritt et al, 1989; J. Edel et al, 1994; F. Ayala-Fierro et al, 1999). В щитовидной, поджелудочной, вилочковои железах и надпочечниках отмечается-избирательное его накопление. Кобальт способен накапливаться также в легких, тонком кишечнике, костном мозге, лимфатических узлах. В слизистой, желудка кобальт накапливается вследствие активного синтеза кобальтсодержащего антианемического фактора - витамина В]2 (Н.Н. Солодушко, 1971).
Исследования распределения и выведения кобальта из организма, проведенные с помощью радиоактивных изотопов этого элемента позволили установить интересные закономерности. Так, в опытах на крысах, получавших радиоактивный кобальт, выявлено, что после введения изотопа per os около 60% введенной дозы выделялось с калом, а 30% - с мочой, а при парентеральном введении около 90% введенной дозы выделялось с мочой и 10% обнаруживается в кале (А.И. Войнар, 1962). По данным F. Ayala-Fierro et al. (1999) 74,5% энтерально введенной дозы крысам - самцам хлорида кобальта (33,3 мг/кг) выделяется с калом, а при внутривенном введении хлорида кобальта (4,16 мг/кг) только 10,1% введенной дозы обнаруживалась в кале. Таким образом, существует зависимость между путем поступления кобальта и путем его преимущественного выделения с калом и мочой (A.V. Roshchin et al., 1989; М. Kirchgessner et al, 1994). Здоровый человек, находящийся на обычном рационе, выделяет с калом от 6 до 70 мкг кобальта, что составляет 12% от количества микроэлементов в суточном рационе. Время эффективного полураспада изотопа 58Со составляет со около 6 часов. Через 24 часа после введения Со в моче определяется 64 - 67%, а через 120 часов - 83% полученной дозы (И.М. Суворов и соавт., 1982). Парентерально введенные небольшие дозы солей кобальта медленно всасываются из места инъекции (Ю.А. Ершов, Т.В. Плетенева, 1989). Независимо от вводимой дозы, максимальная концентрация кобальта в крови обнаруживается в течение 2-х часов после введения (Е. Szakmary et al.,2001).
Являясь биологически активным элементом, кобальт способен воздействовать на большинство обменных процессов. Он влияет на активность многих ферментов, синтез гормонов и витаминов, действует на белковый, жировой, углеводный и минеральный обмен. Наиболее выражено влияние кобальта на углеводный обмен: малые дозы кобальта вызывают гипогликемию, большие - гипергликемию (М.Г. Коломийцева., Р.Д. Габович, 1970). Экспериментально было показано, что кобальт понижает содержание гликогена в печени и сердечной мышце (Э. Н. Левина, 1961; М.П. Чекунова, 1978). Изменения в углеводном обмене связывают с нарушениями в поджелудочной и щитовидной железах. Установлено, что инъекция хлористого кобальта приводит к снижению аир- клетоточного отношения, увеличению общего числа клеток и площади островков, к декомпенсации дифференцировки клеток ацинусов (И.М. Суворов и соавт., 1982). Под влиянием кобальта нарушается синтез тироксина путем ингибиции фермента - тирозин-иодиназы (М.Г. Коломийцева., Р.Д. Габович, 1970). Предполагается, что гипергликемический эффект кобальта является комплексным, так как связан с симпатическим возбуждением надпочечников, с торможением утилизации глюкозы тканями и с повреждением печени (И. М. Суворов и соавт., 1982). Соединения кобальта в малых дозах обладают гипохолестериновым действием и уменьшают атеросклеротические изменения аорты. Ингаляции высоких доз аэрозоля кобальта приводят к увеличению содержания в крови общих липидов, Р- липопротеидов, холестерина и снижению лецитин холестеринового коэффициента (И.М. Суворов и соавт., 1982). Микродозы солей кобальта способствуют синтезу мышечных белков, увеличивают ассимиляцию азота и повышают основной обмен у животных (М.Г. Коломийцева., Р.Д. Габович,1970). Влияние кобальта на обменные процессы проявляется в его свойстве активировать одни ферменты и тормозить другие. Так, под влиянием кобальта активируется щелочная фосфатаза костной ткани и кишечника, аргиназа, пептидазы (И.М. Суворов и соавт., 1982). Независимо-от способа поступления хлорида кобальта в организм он оказывает существенное влияние на метаболизм гема и гемопротеидов в печени, снижая содержание гема и цитохрома Р-450 в микросомах (П.А. Калиман, И.В. Беловецкая, 1986). Высокие концентрации металла тормозят активность некоторых ферментов окислительно - восстановительного ряда: цитохромоксидазы, лактатдегидрогеназы, катал азы и сукциндегидрогеназы (М.Г. Коломийцева., Р.Д. Габович, 1970; А.Д. Фролова, М.П. Чекунова, 1974). Под влиянием кобальта повышается всасывание железа в кишечнике, кобальт катализирует более быстрый переход депонированного железа в состав новых эритроцитов (М.Г. Коломийцева., Р.Д. Габович, 1970). Эритропоэтическое действие кобальта связывают с его гипоксическим действием и активной продукцией эритропоэтина в почках (Л.В. Крохотина, А.Д. Павлов., 1986), и как следствие повышением чувствительности клеток костного мозга к эритропоэтину (H.G. Wolters., 1970).
Патогенные эффекты кобальта и его соединений на организм. Влияние кобальта на почку
В условиях спонтанного диуреза при интрагастральном введении хлорида кобальта в дозе 0,2 мг/кг скорость клубочковой фильтрации через 2 недели и 1 месяц эксперимента понижалась (р 0,01 и р 0,001- и относительно фона и относительно контроля), а диурез в эти сроки исследования имел тенденцию к понижению, но достоверно не отличался от фона и был ниже диуреза в контрольной группе (р 0,01 - через 2 недели и 1 месяц; р 0,05 - через 2" месяца). Канальцевая реабсорбция воды достоверно не менялась (рис. 4.1.1). Через 2 месяца изменений в диурезе, скорости клубочковой фильтрации и канальцевой реабсорбции воды выявлено не было.
Экскреция кальция на протяжении двух месяцев под влиянием хлорида кобальта достоверно не изменилась относительно фона, а относительно контроля несколько снизилась (р 0,05) (рис. 4.2). Почечная обработка кальция через 2 месяца эксперимента достоверно не отличалась от фона (рис.4.9).
Экскреция натрия через 2 недели введения соли кобальта не изменилась (рис. 4.1.2.). Через 1 и 2 месяца отмечалось достоверное снижение этого показателя (р 0,001), причиной чего явилось снижение фильтрационного заряда натрия (р 0,01) при некотором понижении канальцевой реабсорбции этого катиона (р 0,001) (рис.4.1.10).
Под влиянием хлорида кобальта отмечалось возрастание экскреции калия относительно фона ко второму месяцу исследования (р 0,01), а относительно контроля экскреция калия была снижена уже на второй неделе и первом месяце опыта ( 0,001) (рис. 4.1.2). Фильтрационный заряд калия через два месяца эксперимента был увеличен почти в 2,5 раза (р 0,001) (рис. 4.1.11).
Внутрижелудочное введение соли кобальта привело через 2 месяца эксперимента к достоверному снижению концентрации натрия в сыворотке крови (р 0,02) и увеличению (р 0,001) ионов калия. Содержание кальция в крови к этому сроку имело тенденцию к снижению, но достоверно от фона не отличалось (рис.4.1.12).
Таким образом, введение хлорида кобальта в дозе 0,2мг/кг не оказывает влияния на уровень спонтанного диуреза на протяжении всего срока исследования. Соль кобальта в этой дозировке понижает экскрецию натрия через 1 и 2 месяца эксперимента и увеличивает экскрецию калия ко второму месяцу исследования.
Введение хлорида кобальта на фоне профилактического применения Ирлита-1 приводило к увеличению уровня спонтанного диуреза относительно контроля с Ирлитом-1 через 2 недели (р 0,02) и 1 месяц (р 0,05) исследования, вследствие увеличения скорости клубочковой фильтрации в эти сроки (р 0,001), хотя при этом возрастала и КРВ (р 0,01 и р 0,05 - соответственно) (рис. 4.1.3). Относительно группы животных с изолированным введением соли кобальта (далее - опыт) диурез на протяжении первого месяца повышался в результате возрастания СКФ (р 0,01- через 2 недели и р 0,02- через 1 месяц). К концу эксперимента диурез понижался и относительно фона и относительно опыта (р 0,01), так как СКФ к этому времени уменьшилась (р 0,001) (рис. 4.1.3).
Экскреция кальция при использовании Ирлита-1 снижалась через 1 и 2 месяца относительно фона (р 0,05) и относительно опытной группы животных с изолированным введением хлорида кобальта (р 0,01- через 1 месяц; р 0,001 через 2 месяца), причиной чего явилось снижение (р 0,001) фильтрационного заряда кальция при неизменной его канальцевой реабсорбции (рис. 4.1.4).
Дополнительное применение Ирлита-1 приводило к снижению экскреции натрия с мочой (р 0,001 — относительно фона и опыта) вследствие снижения фильтрационного заряда и канальцевой реабсорбции (р 0,001) этого катиона (р 0,01- относительно фона) (рис.4.1.4 и 4.1.10). А относительно контроля с Ирлитом-1 выведение натрия несколько увеличилось ко второму месяцу (р 0,001) исследования, так как увеличился его фильтрационный заряд (рис. 4.1.10).
Экскреция калия при введении хлорида кобальта под влиянием Ирлита-1 достоверно увеличилась относительно фона только через 1 месяц исследования (р 0,01), а относительно контроля с Ирлитом-1 была увеличена во все сроки наблюдения (р 0,001) (рис. 4.1.4). Фильтрационный заряд его увеличился (р 0,001) (рис. 4.1.11). Интрагастральное введение Ирлита-1 на фоне применения хлорида кобальта не изменило уровень концентрации кальция в крови, но понизило концентрацию натрия (р 0,001- относительно фона) и повысило содержание ионов калия (р 0,001- относительно фона и контроля с Ирлитом-1) (рис. 4.1.12).
Таким образом, профилактическое использование Ирлита-1 при интоксикации солью кобальта в дозе 0,2мг/кг способствует увеличению объёма спонтанного диуреза относительно опыта на протяжении первого месяца исследования, повышению экскреции калия через 1 месяц эксперимента и снижению выведения кальция и натрия.
Влияние введения хлорида кобальта в дозе 0,2мг/кг
При интрагастральном введении хлорида кобальта в дозе 0,2 мг/кг на фоне профилактического применения Ирлита-1 в условиях водной нагрузки суммарный (3-х часовой) диурез не отличался от фона, но был значительно выше (р 0,01) контроля с Ирлитом-1, во все сроки исследования (рис. 4.2.4).
Через 2 недели отмечалось увеличение выведения водной нагрузки относительно контроля с Ирлитом-1 на II (р 0,01) и III (р 0,001) часах, так как в эти часы понижалась канальцевая реабсорбция воды (р 0,02 -II час и р 0,01-Шчас).
Через 1 месяц увеличение ( р 0,01) суммарного диуреза по отношению к контролю с Ирлитом-1 было обусловлено снижением канальцевой реабсорбции воды во все часы исследования (р 0,01 -I и III час и р 0,02 - II час) и увеличением (р 0,01) скорости клубочковой фильтрации на II часе.
Через 2 месяца повышение (р 0,001) скорости клубочковой фильтрации на II часе и понижение канальцевой реабсорбции; по часам выведения водной нагрузки (р 0,05- I и II час; р 0,02- III час) также увеличило суммарный диурез относительно контроля с Ирлитом-1 (рис.4.2.4).
Экскреция натрия при дополнительном введении Ирлита-1 была снижена относительно фона как по часам выведения водной нагрузки (р 0,001 -1 час; р 0,01- II и III час), так и суммарно за 3 часа исследования (р 0,001)(рис.4.2.5). Через 2 недели достоверно (р 0,01) было снижено выведение натрия на I часе относительно контроля с Ирлитом-1, а суммарная экскреция не отличалась от фона. Через 1 месяц уменьшение выведения натрия по часам (р 0,001- I и II час; р 0,01- III час) обеспечило снижение (р 0,001) суммарной экскреции этого катиона. Через 2 месяца суммарная экскреция натрия понизилась и относительно фона, и относительно контроля с Ирлитом-1 (р 0,001), за счет I и II часа (р 0,01), так как увеличилась канальцевая реабсорбция натрия на II часе (р 0,001), несмотря на возрастание его фильтрационного заряда на этом же часе (р 0,001) (рис.4.2.5).
Одновременное внутрижелудочное введение Ирлита-1 и хлорида кобальта привело к снижению суммарной экскреции калия по отношению к фоновым значениям (р 0,05- через 2 недели; р 0,01- через 2 месяца) (рис.4.2.6).
Повышение (р 0,05) экскреции калия на 1-м и понижение (р 0,001) на П-м часах обусловило стабилизацию суммарной экскреции этого катиона на уровне контроля с Ирлитом-1 через 2 недели эксперимента.
Через 1 месяц суммарное выведение калия также не отличалось от контроля с Ирлитом-1, так как на I часе наблюдалось понижение (р 0,01), а на II часе увеличение (р 0,001) экскреции.
Не изменился суммарный показатель экскреции калия и ко 2 месяцу исследования, хотя наблюдалось снижение выведения калия на I (р 0,01) и III часах (р 0,05) и увеличение экскреции калия на II часе (р 0,001) при увеличении его фильтрационного заряда на II и III часах (р 0,001) (рис.4.2.6).
Таким образом, дополнительное к соли кобальта в дозе 0,2мг/кг интрагастральное введение Ирлита-1 способствует в условиях гипергидратации поддержанию суммарного (за 3 часа) диуреза на уровне фоновых значений, понижает экскрецию с мочой натрия и калия.
Внутрижелудочное, дополнительное к соли кобальта, введение ирлита-7 в условиях гипергидратации не вызвало достоверных относительно фона изменений суммарного 3-х часового диуреза в течение всего срока исследования. Однако относительно контроля с Ирлитом-7 суммарный диурез через 2 недели оказался выше (р 0,001) за-счет увеличения выведения водной нагрузки на II (р 0,001) и III (р 0,01) часах (рис.4.2.7). Скорость клубочковой фильтрации на II часе повысилась (р 0,001), а канальцевая реабсорбция на I и III часах понизилась (р 0,05).
Через 1 месяц суммарный диурез также был выше (р 0,001) контроля с Ирлитом-7, в основном за счет II часа (р 0,01), так как скорость клубочковой фильтрации в этот час увеличилась (р 0,05). Канальцевая реабсорбция не менялась.
Через 2 месяца рост скорости клубочковой фильтрации (р 0,001) и понижение канальцевой реабсорбции (р 0,05) привели к увеличению диуреза на II часе (р 0,001) исследования, что и обусловило высокий (р 0,001), относительно контроля с Ирлитом-7 суммарный 3-х часовой диурез. Отмечалось понижение (р 0,001) канальцевой реабсорбции воды на I часе исследования (рис.4.2.7).
Экскреция натрия при использовании Ирлита-7 была снижена относительно фона как по часам выведения водной нагрузки (р 0,001), так и суммарно (р 0,001) через 2 недели, 1 и 2 месяца (рис 4.2.8). Через 2 месяца резко понизился фильтрационный заряд натрия (р 0,001) на II часе.
Относительно контроля с Ирлитом-7 через 2 недели суммарная экскреция натрия понизилась (р 0,001) за счет понижения выведения катиона на I и III часах (р 0,001). Через 1 месяц выведение натрия снижалось на I (р 0,001) и III (р 0,05) часах, а на П-м - несколько увеличилось (р 0,02), поэтому суммарная экскреция катиона была снижена (р 0,001).
Влияние Ирлита-7 на фоне введения хлорида кобальта
На протяжении 2-х месяцев исследования дополнительное совместное с хлоридом кобальта использование смеси Ирлит 1+7 не выявило достоверных отличий в уровне спонтанного диуреза, несмотря на то, что через 2 недели понизилась скорость югу бочковой фильтрации (р 0,001), но при этом уменьшилась и канальцевая реабсорбция воды (р 0,05). При сравнении с контролем диурез, скорость клубочковой фильтрации и канальцевая реабсорбция воды достоверно не отличались. Смесь Ирлит 1+7 способствовала повышению диуреза относительно опыта в течение 1 месяца исследования (р 0,01- через 2 недели и р 0,05- через 1 месяц) в результате снижения канальцевой реабсорбции воды (р 0,001 и р 0,01- соответственно) (рис.5.1.7).
Экскреция кальция была ниже фона через 2 недели и 1 месяц (р 0,01) , не отличалась от контрольной группы, а относительно опыта была снижена через 1 месяц (р 0,001) исследования. Фильтрационный заряд кальция через 2 месяца был ниже, чем в опытной и контрольной группе, а канальцевая реабсорбция катиона хоть и имела тенденцию к снижению, но достоверно не отличалась и от фона и от контроля (рис. 5.1.9).
Экскреция натрия на протяжении 2 месяцев была ниже фоновых значений (р 0,001), а относительно контроля увеличивалась через 1 и 2 месяца (р 0,001). Экскреция катиона относительно опыта через 2 недели снижалась (р 0,001), а через 1 и 2 месяца увеличивалась (р 0,05 и р 0,001).Фильтрационный заряд натрия через 2 месяца был выше, чем в контрольной группе (р 0,01) и опыте (р 0,05) (рис.5.1.10). Канальцевая реабсорбция натрия снизилась и относительно фона и контроля (р 0,02). Экскреция калия была ниже фоновых значений только через 2 недели (р 0,05), но значительно выше опыта с изолированным введением хлорида кобальта (р 0,001) (рис.5.1.8).Фильтрационный заряд калия был выше фона и контроля (р 0,01) (рис.5.1.11) и ниже опыта (р 0,001).
В сыворотке крови концентрация кальция не изменилась, содержание натрия понизилось (р 0,001- относительно фона и контроля), а содержание калия — повысилось относительно контроля (р 0,01) и стало ниже, чем в опыте (р 0,001)(рис.5.1.12).
Таким образом, дополнительное применение смеси Ирлитов повышает спонтанный диурез относительно опыта в течение 1-го месяца эксперимента. Смесь Ирлит 1+7 устраняет эффекты хлорида кобальта на ионовыделительную функцию почек и повышает экскрецию натрия через 1 и 2 месяца исследования и способствует восстановлению экскреции калия. 1. Внутрижелудочное введение хлорида кобальта в. дозе 2,0 мг/кг уменьшает объём спонтанного диуреза через 2 недели эксперимента вследствие снижения скорости клубочковой фильтрации при ослаблении канальцевой реабсорбции воды. Через 1 и 2 месяца достижение фонового уровня в скорости клубочковой фильтрации и канальцевой реабсорбции воды привело к восстановлению спонтанного диуреза. 2. Хлорид кобальта в дозе 2,0 мг/кг при интрагастральном введении уменьшает экскрецию кальция на протяжении 1-го месяца исследования, а через 2 месяца, в результате увеличения фильтрационного заряда, выведение кальция с мочой, а также концентрация катиона в сыворотке крови возрастают до фонового уровня. 3. Под влиянием соли кобальта снижение фильтрационного заряда натрия ведет к уменьшению его экскреции с мочой. Содержание натрия в крови было ниже фоновых значений. 4. Содержание калия в сыворотке крови при введении хлорида кобальта увеличилось, а его экскреция понизилась. 5. Использование Ирлита-1 на фоне внутрижелудочного введения соли кобальта в дозе 2,0 мг/кг уменьшая объем спонтанного диуреза через 2 недели и 1 месяц исследования, ко 2 месяцу опыта восстанавливало этот показатель до фона. 6. Применение Ирлита-1 при интоксикации хлоридом кобальта не изменило концентрацию кальция в крови и его экскрецию с мочой. 7. Экскреция натрия при дополнительном к соли кобальта введении Ирлита-1 понижалась. Содержание катиона в крови уменьшилось. 8. Использование Ирлита-1 устраняло эффекты хлорида кобальта на экскрецию калия и увеличивало выведение катиона с мочой. 9. Профилактическое использование Ирлита-7 через 2 недели эксперимента нивелировало влияние соли кобальта на уровень спонтанного 113 диуреза и увеличивало объём выводимой мочи, а через 2 месяца - диурез не отличался от фона. 10. Ирлит-7 при дополнительном к соли кобальта применении понижает экскрецию кальция в течении 2-х месяцев в результате снижения фильтрационного заряда и увеличения канальцевой реабсорции катиона. 11. Профилактическое использование Ирлита-7 на фоне интокискации хлоридом кобальта понижает экскрецию натрия с мочой. Содержание натрия в крови уменьшилось. 12. Ирлит-7 устраняет эффекты хлорида кобальта на экскрецию калия с мочой и способствует увеличению выведения катиона: Концентрация калия в крови оказалась на уровне фона, нониже, чем в опытной группе. 13. Использование смеси Ирлит 1+7 способствует увеличению уровня спонтанного диуреза относительно группы животных с введением только хлорида кобальта на протяжении; 1-го месяца исследования, в1 результате понижения канальцевой реабсорбции воды. 14. Экскреция кальция, а так же содержание, катиона в сыворотке крови под влиянием одновременного введения соли кобальта и смеси Ирлитов к концу опыта не отличалось от фона. 15. Под влиянием одновременного введения взвеси Ирлит 1+7 и хлорида кобальта через 1 и 2 месяца, вследствие увеличения фильтрационного заряда натрия увеличивалась его экскреция, устраняя, таким образом влияние соли кобальта. Содержание натрия в крови понижалось. 16. Дополнительное к хлориду кобальта введение смеси Ирлит 1+7 восстанавливало экскрецию калия до фоновых значений; и понижало концентрацию этого катиона в крови относительно опыта.
