Введение к работе
"' Актуальность исследования. Вирус Лаоса является высоко-пат.рфнным представителем семейства Arenaviridae. Геморрагическая лихорадка, вызываемая вирусом Лаоса, представляет собой острое инфекционное заболевание, эндемичное для стран Западной и Центральной Африки. В настоящее время в эндемичных районах ежегодно регистрируется около 300000 случаев инфицирования вирусом Лаоса, из них БОСО случаев с летальным исходом (Дроздов С. Г. , Сергиев В. П., 1984 ). Заболевание, вызываемое вирусом Лаоса, варьирует в своих проявлениях от стертых субклинических форм до тяжелых, с выраженными геморрагическими проявлениями. С инфиц рованием вирусом Лаоса связывают до 15% всех случаев заболеваний, сопровождающихся лихорадочным состоянием. Несмотря на ограниченное распросаранение вируса Лаоса , он мотет представлять серьезную опасность и для неэндемичных территорий. Подтверждением этому служат сведения о заражении сотрудников вирусологических лабораторий США при работе с вирусом Лаоса, а также о завозе лихорадки Лаоса в США, Канаду, Австралию, Англию и ФРГ (Kfonath Т. Р.. 1987: MoCormick J. , 1990).
Аренавирусы обладают лимфотропностью, что. накладывает особый отпечаток на характер и формирование противовирусного иммунного ответа. Какие субпопуляции яимфоидных клеток повреадаютя аренавирусамиг и какие иммунные реакции играют ведущую роль в формировании ответа на вирусный антиген -неизвестно. Иммунное реагирование при инфицировании арена-вирусами оказывает, по-видимому, существенную роль в патогенезе, поэтому выяснение взаимодействия вирусного антигена с иммунной системой хозяина имеет значение для поиска наиболее '>ф$ективных средств профилактики и лечения заболев-ния, вызываемого данными вирусами.
Следует подчеркнуть, что малая изученность роли иммунологических механизмов в развитии заболеваний, вызываемых аренавирусами, во многом связана *, отсутствием адекватне экспериментальной модели для изучения таких заболеваний. Первон-чальные исследования выявили значительное сходство заболеваний, вызываемых у беспородных мышей вирусом Ласса и б лінкоре дот венным ему вирусом лимфоцитаркого х риоменингкта (ЛХЮ. Однако в дальнейшем оказалось, что воспроизведение
-4-эксприментального заболевания, вызываемого вирусом Лаоса, в популяции аутбредных животных значительно варьирует и воспроизводимость таких результатов невысокая (Peters С. J. st al., 1987 ). Использование дорогостоящих нечеловекообразных приматов в широкомасштабных исследованиях затруднительно, а инбредные морские свинки (штамм 1,3), которые обладают высокой чувствительностью к вирусу Лаоса, в ССС^ отсутствуют. К этому следует добавить, что исследования с вирусом Лаоса должны производиться в условиях лабораторий, оснащенных рабочими местами с максимальной биологической зашитой (Р-4).
В связи с вышесказанным чрезвычайно важным является подбор высокочувствительных к вирусу Лаоса инбредных линий мышей и изучение роли иммунных мех^-'измов в патогенезе экспериментального заболевания, вызываемого данным вирусом.
Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследований явилось изучение роли клеточного и гуморального звена иммунитета в развитии и исходе заболевания; вызываемого вирусом Ласса у инбредных мышей. Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:
1. Определить возможность использования линейных мышей
для изучения экспериментального заболевания, вызываемого
вирусом Лаоса,
-
На чувствительных к вирусу Ласса линейных мышах изучить влияние иммугіосупреесии и иммуностимуляции на развитие и исход летального заболевания.
-
Исследовать природу и закономерности формирования зф-фекторных клеток в организме инбредных мышей, чувствительных к вирусу Ласса .
4. Изучить возможные подходы к иммунотерапии эксперимен-
тапьного заболевания, вызываемого вирусом Ласса у мышей.
Научная новизна результатов исоледования. Научная новизна представленной работы заключается в том, что впервые подобраны и использованы для изучения экспериментального заболевания, вызываемого вирусом Ласса, инбредные мыши, обладающие максимально высокой чувотвительностью к данному вирусу. Ими оказались мыши линии СВА. Летальность мышей. СБА, инфицированных в мозг вирусом Ласса в дозе около 26 Щ0, неизменно составляет 100%.
-Б-
Покаэано, что в патогенезе экспериментального заболевания клеточное звено иммунитета играет ведущую роль по сравнению с гуморальным иммунным ответом.
Впервые установлено, что при внутрибрюшнном введении вируса Лаоса у мышей СВА развивается полноценный иммунный отйєт и формируется иммунологическая память, в поддержании которой участвуют эффекторные Т-лимфоциты, чувст ггельные К циклоспорину А. Летальный исход, наблюдаемый при внутримоэ-говом инфицировании животных, также связан с участием клеточного звена иммунитета.
Впервые показана возможность защиты летально инфицированных вирусом Лаоса мышей СВА трансплантацией клеток селезенки от сенсибилизированных животных, а также с помощью иммуносупрессии, индуцированной рентгеновским облучением или цик- офосфаном.
Научно-практическая значимость работы. Данные, полученные в работе, показывают существенную роль клеточного звена иммунитета в развитии и исходе заболевания, вызываемого вирусом Ласса у мышей СВА. Гуморальный иммунитет имеет менее существенную роль в развитии и исходе летального экспериментального заболевания. Выявлены ранее неизвестные иммунологические механизмы развития летальной вирусной инфекции и оп-оеделены подходы к разработке новых способов лечения к профилактики данного заболевания.
Результаты настоящей работы используются в БелНЙИ эпидемиологии и микробиологии МЗ БССР при изучении антигенных и иммуногенных свойств вируса Ласса с применением олигопеп-тидов, синтезированных на основе его структурных компонентов. Акт внедрения NI880T 03.1987 г.
Настоящая работа выполнена в рамках задания МЗ СССР "Изучение молекулярно-генетических свойств и механизмов репродукции патогенных аренавирусов с целью создания эффективных химиотерапевтических и медицинских средств профилактики и лечения", N гос. регистрации Б1048870.
Основные подозрения, выносимые на защиту.
1 Участие иммунной системы в развитии и исходе экспериментального заболевания, вызываемого вирусом Ласса у мышек линии СВА различно з зависимости от сяссоба введения вируса: при внутрибрюшишюй инокуляции вируса развивается
пол,гоценный иммунный ответ, при внутримозговом способе введения - иммунная система участвует в определении летального исхода.
-
При внутрибрюшикном введении вируса Лаоса мышам СВА благоприятный исход экспериментального заболевания.обусловлен действием вирусспецифических Т-лимфоцитов, формирующихся в селезенке животных. Гуморальное звено иммуитета играет, очевидно, менее существенную роль в патогенезе данного экспериментального заболевания.
-
Эффективными способами защиты мышей, летально инфицированных вирусом Лаоса, являюгся трансплантация клеток селезенки от иммунизированных животных, и иммунссупрессия.
Публикация результатов исследования и апробация работы.
Основные результаты работы излечены в 5 печатных работах. Материалы диссертации были доложены и обсуждались: на заседании проблемной комиссии сошного значения "Химиотерапия и химиопрофилактика вирусных инфекций, особо опасные и медленные (вирусные)'инфекции" (Минск, 1986). на симпозиуме "Мэлекулярно-бшлогические аспекты взаимодействия паразит-хозяин" (Ленинград, 1987), на заседании городского общества иммунологов (Минск, 1988). на секции N1 Ученого Совета Института иммунологии (Москва, 1989).
Структура и объем диссертации.
