Введение к работе
Актуальность темы исследования.
В последние десятилетия достигнуты несомненные успехи в понимании отдельных звеньев патогенеза и механизмов прогрессирования хронического миелолейкоза (ХМЛ), однако остается неразрешенной проблема излечения от этого заболевания.
Основная задача, поставленная перед современной терапией
ХМЛ - добиться значительного удлинения хронической фазы болезни.
В этой связи, большое значение имеет определение прогноза
заболевания в момент установления диагноза, так как
дифференцированный подход к лечению на ранних этапах развития
лейкозного процесса может обеспечить продление жизни больных и
улучшение ее качества. Поэтому, весьма актуальным является поиск и
выявление новых прогностических критериев, основанных не только
на комплексной оценке клинико-гематолошческих признаков, но и на
современных молекулярно-биологических диагностических методах,
кторые все шире применяются во многих областях медицины.
Разрешающая диагностическая и прогностическая значимость этих
методов на несколько порядков выше известных
гистоморфологических, цитогенетических и культуральных методик. Внедрение их в клиническую практику открывает путь не только для понимания во многом неизвестных механизмов развития лейкемического процесса, но и позволит в дальнейшем приступить к генодиагностике, а затем и генотерапии.
Специфическим цитогенетическим маркером ХМЛ яєляется Филадельфийская хромосома (Ph'): возникающая в результате реципрокной транслокации t(9;22) [ Nowell Р.С. с соав., 1960 Rowley J.D. с соавт., 1973 ]. Транслокация приводит к образованию химерного гена BCR/ABL на длинном плече 22 хромосомы. Выделяют два основных типа этой транслокации в зависимости от числа входящих в химерный ген экзонов. Тип транслокации 5' обусловливает транскрипцию Ь2-а2 тип мРНК BCR/ABL, определяемую разрывом 22-й хромосомы в точке, лежащей левее второго сайта узнавания рестриктазой Hindlll. В результате разрыва 22-й хромосомы в точке, лежащей правее второго сайта узнавания рестриктазой Hindlll возникает З'-тип транслокации и образуется соответствующая ей Ь3-а2 тип мРНК BCR/ABL [ Shtivelman Е. с соавт., 1985].
В последние годы опубликованы данные о корреляции типа транслокации t(9;22) с клиническими параметрами ХМЛ [Mills К.!.с
лежащей правее второго сайта узнавания рестриктазой Hindlll возникает З'-тип транслокации и образуется соответствующая ей Ь3-а2 тип мРНК BCR/ABL [ Shtivelman Е. с соавт., 1985].
В последние годы опубликованы данные о корреляции типа транслокации t(9;22) с клиническими параметрами ХМЛ [Mills K.I.с соавт. ,1989, , Eisenberg А. с соавт., 1988, Ardern JC с соавт,1993 .Morris SW с соавт., 1990].
В нашем исследовании анализируется корреляция клинической эволюции заболевания вплоть до его исхода с типом транслокации 1(9; 22).
Целью настоящего исследования является определение
клинического и прогностического значения двух различных типов
хромосомной транслокации t(9;22) у больных хроническим
шелолейкозом.
Задачи исследования: 1 .Определить тип хромосомной транслокации у больных хроническим миелолейкозом с помощью обратной транскрипционной полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР) или амплификацией кДНК, полученной обратной транскрипцией мРНК .
-
Охарактеризовать клинико-гематологические особенности ХМЛ у больных с различными типами транслокации.
-
Сравнить показатели выживаемости, длительность хронической фазы (ХФ) и фаз акселлерации (ФА) и бластного криза (БК) у больных с различными типами хромосомной транслокации.
4. Оценить прогностическую значимость типа хромосомной
транслокации t(9;22) при ХМЛ.
Научная новизна.
На основе сопоставления клинико-гематологических параметров и выживаемости больных ХМЛ с различными типами транслокации t(9;22) выявлена прогностическая значимость определения типа хромосомной транслокации. Показано, что данные молекулярной диагностики в совокупности с другими неблагоприятными прогностическими факторами являются критерием для выделения группы больных с повышенным риском раннего наступления бластной трансформации.
Научно-практическое значение.
Молекулярно-биологические исследования позволяют выделить группу больных с неблагоприятным прогнозом заболевания, которые нуждаются в применении более интенсивных программ лечения.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 научных работ.
Апробация работы. Настоящее исследование является
фрагментом темы, выполняемой по плану НИР ГНЦ РАМН 02.04.
"Разработка эффективных режимов моно- и полихимиотерапии при
лимфо- и миелолролиферативных заболеваниях с использованием
отечественных и зарубежных противоопухолевых препаратов и
методов экстракорпорального очищения крови" ( N Госрегистрации
01900013983). Работа апробирована 11.06.98 на заседании
проблемной комиссии ГНЦ РАМН " Опухоли системы крови и
неопухолевые заболевания белой крови, депрессии кроветворения,
трансплантация костного мозга , гемоцитология ". Основные
положения диссертации доложены на 3 научных конференциях: Первом съезде медицинских генетиков( Москва, 1994г.); " Школах гематолога " ( г. Львов, 1995г.) , ( г. Москва, 1996г.); на второй встрече Европейской гематологической ассоциации ( г.Париж ,1996 г.).
Объем и структура работы. Диссертация изложена на 95 стр. Состоит из введения, 3 глав, заключения, выводов и указателя литературы. В работе 10 таблиц и 11 рисунков. Диссертация выполнена в отделении химиотерапии лейкозов и патологии эритрона ( зав.-доктор медицинских наук Н.Д.Хорошко) Гематологического Научного Центра РАМН ( директор-академик РАМН , профессор А.И.Воробьев), на базе 6-го гематологического отделения Московской городской клинической больницы им. СП. Боткина. Молекулярно-биологические исследования проводились в лаборатории генной инженерии (зав. лаб.-проф. Гринеза Н.И.), блот-гибридизационный анализ осуществлял Домнинский Д.А..