Введение к работе
Актуальность работы
Лимфоаденопатия (ЛАП) представляет системное увеличение лимфатических узлов, не связанное с воспалением [Румянцев А.Г. и др., 1998], являющееся результатом пролиферации, метастазирования, воздействия факторов экзогенного и эндогенного характера [Баранов А.А. и др., 1998]. Больные с ЛАП составляют 40% всех пациентов детских онкогематологов в связи с необходимостью исключения онкогематологического заболевания [Чернов В.М. и др., 1992]. Однако причиной увеличения ЛУ в большинстве случаев являются процессы, не связанные с гемобластозами: чаще всего это общепедиатрические, инфекционные, иммунные и другие состояния [Румянцев А.Г. и др., 1998].
В работах отечественных и зарубежных ученых показано, что инфекционный синдром играет ведущую роль в развитии ЛАП, при этом особое значение имеют вирусы герпетической группы [Краснов В.В.,2003; Уразова О.И., 2004; Shizuma T., 2005]. Клинически герпес-вирусная инфекция чаще всего проявляется лимфоаденопатией, субфебрилитетом и лейкемоидной реакцией [Стюф И.Ю. и др. 2007; Учайкин В.Ф., 2001]. Наиболее изучена лейкемоидная реакция при острой VEB-инфекции, проявляющаяся в абсолютном лимфоцитозе и наличии атипичных лимфоцитов [Воробьев А.И., 1985; Hoffbrand A.V., et al., 1993]. Менее изучена реакция со стороны крови при других герпетических (в том числе микст) инфекциях. Остальные параметры крови также изучены в меньшей степени.
Наличие дефектов в звеньях иммунной противовирусной защиты определяет особенности течения заболевания, прогноз и качество жизни конкретного человека [Шульженко А.Е., 2005]. Герпетическая инфекция сочетается с изменениями популяционного состава лимфоцитов, показателей гуморального и клеточного звена [Александровский А.В. и др., 2000]. Особую роль в защите организма против вирусной инфекции играют цитотоксические Т-клетки [Ярилин А.А., 1999]. Однако количество проведенных в данной области исследований при лимфоаденопатии крайне незначительно, особенно в отношении детей раннего возраста, и находится в настоящее время на стадии накопления данных [Пичугина Л.В., 2006]. Иммунные нарушения часто ассоциируются с гематологическими нарушениями [Караулов А.В., 2002], однако при ЛАП взаимосвязи между иммунологическими и гематологическими параметрами остаются практически неизученными.
В патогенезе инфекционных заболеваний важную роль играют нарушения апоптоза, основной физиологической функцией которого является защита от патогенов [Самуилов В.Д., 2001]. В связи с этим, особую актуальность приобретает изучение характера цитотоксического ответа и апоптоза иммунокомпетентных клеток у детей с ЛАП на фоне инфекции. Анализ взаимосвязей между гематологическими показателями и характером цитотоксического Т-клеточного иммунного ответа поможет уточнить патогенез ЛАП и разработать новые методы ранней диагностики и прогнозирования нарушений функции иммунной системы у детей с ЛАП.
Цель работы
Установить особенности состояния клеток с цитотоксической активностью у детей с лимфоаденопатией с учетом возраста, инфекционного фона и гематологических параметров, на основании чего разработать новые способы прогнозирования нарушений функции иммунной системы у данной группы больных.
Задачи исследования
-
Установить возрастные особенности распространенности ЛАП и инфекционного фона у детей с лимфоаденопатией.
-
Дать характеристику состояния цитотоксических Т-клеток у детей с лимфоаденопатией.
-
Установить особенности ранних и поздних этапов апоптоза лимфоцитов у детей с лимфоаденопатией.
-
Дать характеристику лейкемоидной реакции и выявить взаимосвязи между гематологическими показателями, характером Т-клеточного иммунного ответа и параметрами апоптоза у детей с лимфоаденопатией.
-
Разработать новые способы ранней диагностики нарушений функции иммунной системы у детей с лимфоаденопатией.
Научная новизна исследования
Установлено, что формирование лимфоаденопатии сопровождается высокой частотой вирусных ассоциаций во все возрастные периоды и выявлением маркеров активной ВЭБ-инфекции у детей младше 6 лет.
Впервые установлено, что иммунные механизмы участвуют в патогенезе ЛАП, проявляясь у детей с ЛАП нарушением баланса наивных и коммитированных ЦТЛ, а также увеличением количества различных популяций лимфоцитов с TCR типа.
Установлено, что развитие ЛАП у детей 3-14 лет ассоциируется с нарушением апоптоза, что проявляется в увеличении уровня клеток на ранних этапах и снижении уровня клеток на поздних необратимых его этапах.
Впервые установлено, что ЛАП у детей ассоциируется со снижением апоптоз-индуцирующей способности лимфоцитов, а также угнетением готовности лимфоцитов к апоптозу у детей младше 6 лет и повышением готовности ЦТЛ к апоптозу у детей старше 6 лет.
Установлено, что развитие ЛАП сопровождается лейкемоидной реакцией со стороны трех ростков кроветворения: красного, белого и тромбоцитарного. Ведущим гематологическим проявлением у детей с ЛАП 3-14 лет является наличие атипичных лимфоцитов.
Показано, что при формировании ЛАП изменяются количество, характер и сила корреляционных взаимосвязей между иммунологическими, а также иммунологическими и гематологическими параметрами.
Впервые установлено, что нарушение соотношения наивных CD45RA+ и коммитированных CD45RO+ лимфоцитов у детей с ЛАП позволяет прогнозировать частую и длительную заболеваемость.
Практическая значимость работы
Разработан прогностический критерий развития длительной и частой заболеваемости у детей, основанный на определении соотношения наивных CD45RA+ и коммитированных CD45RO+ лимфоцитов в периферической крови у детей с ЛАП (Патент №2317549 от 20.02.2008).
Реализация результатов работы
Результаты диссертационной работы внедрены в практику отделения детской гематологии ОГУЗ «Ивановская областная клиническая больница» Департамента здравоохранения Ивановской области, а также в практику педиатрического и пульмонологического отделений ГУЗ «Областная детская клиническая больница» Департамента здравоохранения Ивановской области.
Апробация работы
Диссертация прошла апробацию на объединенной научной конференции ФГУ «Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства имени В.Н. Городкова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи» 4 апреля 2008 года. Материалы диссертации доложены и обсуждены на Республиканской конференции «Иммунология репродукции» (Иваново, 2005), на X Всероссийском научном Форуме с международным участием имени академика В.И. Иоффе «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (Санкт-Петербург, 2006), на 2-ой Республиканской конференции «Иммунология репродукции: теоретические и клинические аспекты» (Сочи, 2007).
Основные положения, выносимые на защиту
Формирование лимфоаденопатии у детей ассоциируется с иммунными и гематологическими нарушениями, которые зависят от возраста и инфекционного фона. Лимфоаденопатия у детей сопровождается нарушением количества, дифференцировки и апоптоза клеток с цитотоксической активностью. Гематологические нарушения характеризуются развитием лейкемоидной реакции со стороны всех трех ростков кроветворения. Между иммунологическими и гематологическими параметрами выявляются корреляционные взаимосвязи, которые у детей с ЛАП характеризуются, меньшей силой, увеличением числа и изменением характера.
Нарушение соотношения наивных (CD45RA+) и коммитированных (CD45RО+) лимфоцитов может использоваться для прогнозирования частой и длительной заболеваемости у детей с лимфоаденопатией.
Структура и объем диссертации
Материалы диссертации изложены на 164 страницах машинописного текста. Работа состоит из введения, обзора литературы, главы «Материалы и методы исследования», 4 глав собственного исследования, главы «Обсуждение результатов», выводов, практических рекомендаций и указателя литературы, включающего 241 источник. Работа иллюстрирована рисунками и таблицами.
