Содержание к диссертации
Введение
Глава 1. Современное состояние проблемы инфекционной безопасности донорской крови 13
1.1. Распространенность гемотрансмиссивных инфекций в общей популяции и у доноров 13
1.1.1. Вирусные гепатиты В, С, ВИЧ-инфекция и сифилис среди открытых популяций в мире 13
1.1.2. Вирусные гепатиты В, С, ВИЧ-инфекция и другие гемотрансмис- сивные ифекции среди доноров крови в мире и Российской Федерации .23
1.2. Методы обеспечения инфекционной безопасности донорской крови .31
1.2.1. Лабораторное обследование и вакцинация доноров 31
1.2.2. Карантинизация 37
1.2.3. Вирусинактивация 43
1.2.4. Лейкофильтрация 51
Глава 2. Материалы и методы исследования 53
2.1. Дизайн исследования 53
2.2. Общая характеристика групп обследованных доноров Алтайского края 57
2.3. Методы клинического, лабораторного и инструментального исследования 62
2.3.1. Поэтапная система выявления брака крови 62
2.3.2. Серологические методы диагностики 63
2.4. Метод карантинизации компонентов крови СПК Алтайского края 66
2.4.1. Методика работы со свежезамороженной плазмой СЗП 66
2.4.2. Методика работы с эритроцитами 67
2.5. Методы статистического анализа 69
Глава 3. Анализ лиц, отведенных от донации крови 70
3.1. Общее данные по первичному браку донорской крови 70
3.2. Структура первичного брака донорских гемокомпонентов 72
Глава 4. Карантинизация компонентов донорской крови. анализ вторичного абсолютного брака в системе мер по предупреждению заражения гемотрансмисивными инфекциями в алтайском крае 76
4.1. Общие данные по вторичному браку карантинных гемокомпонентов .76
4.2. Динамика абсолютного вторичного брака в донорской плазме и эритроцитарной массе по годам внедрения параллельной системы карантинизации гемокомпонентов в Алтайском крае 80
4.3. Динамика выявления вторичного брака в заложенных на карантин гемокомпонентов 83
Глава 5. Значение повышенного уровня трансаминаз в прогнозе зараженности донорской популяции и эффективности применения метода карантинизации 88
5.1. Влияние повышенного АЛТ на структуру донорского брака 88
5.2. Анализ структуры вторичного брака крови по биохимическим изменениям 91
Глава 6. Значение пцр-диагностики в системе мер по предупреждению заражения гемотрансмиссивными инфекциями 95
6.1. Сравнение выявления вторичного брака крови по ИФА-маркерам и ПНР методом 95
6.2. Оценка применения входного ПЦР-контроля для выявления дополнительного брака крови 97
Глава 7. Вирус-инактивация донорской плазмы - реализация сегмента приоритетного национального проекта «здоровье» в алтайском крае 100
Глава 8. Обсуждение результатов исследования. разработка оптимальной схемы обеспечения инфекционной безопасности донорских гемо- компонентов на основе поэтапного внедрения методов противовирусной защиты 105
Заключение 110
Выводы 116
Практические рекомендации 118
Список используемой литературы 119
Приложение 159
- Методы обеспечения инфекционной безопасности донорской крови
- Общая характеристика групп обследованных доноров Алтайского края
- Структура первичного брака донорских гемокомпонентов
- Динамика абсолютного вторичного брака в донорской плазме и эритроцитарной массе по годам внедрения параллельной системы карантинизации гемокомпонентов в Алтайском крае
Введение к работе
Вопросы обеспечения безопасности вливаний компонентов донорской крови реципиентам до настоящего времени являются одними из самых сложных в трансфузиологии. В последние годы прошлого столетия выявилась проблема, связанная со значительным увеличением частоты встречаемости ВИЧ-инфекции и вирусных гепатитов В и С у доноров крови и плазмы [35, 126, 136, 267, 337, 344].
Данная проблема явились следствием общей тенденции к возрастанию в мире и Российской Федерации числа зараженных ВИЧ-инфекцией и вирусными гепатитами В и С, так и соответственно нарастанием частоты встречаемости этих инфекций у доноров крови и плазмы и трансфузионнозависимых больных [108, 190, 280, 353, 412]. Тем самым реципиенты компонентов и препаратов крови оказались в недостаточной мере защищены от гемотрансмиссивных инфекций [148, 229, 328, 387].
Большинство исследователей основным источником передачи инфекций считает бессимптомных носителей, которые могут быть потенциальными донорами с отсутствием каких-либо проявлений заболеваний [85, 183, 200, 306, 329, 390]. Это ведет к быстрому распространению данных инфекций в группах высокого риска.
Высокий риск инфицирования характерен для больных наркоманией, лиц, имеющие случайные половые связи, гомосексуалистов, для лиц с гемотрансфузионным анамнезом, а также некоторых категорий медицинских работников из отделений гемодиализа, гематологии, станций переливания крови. При этом главным механизмом передачи возбудителей является парентеральный [27, 113, 126, 127, 381, 383].
Новые возможности лабораторной диагностики, в частности NAT-технологии, а также вакцинация населения против гемотрансмиссивных инфекций, вирусинактивация донорской плазмы позволяют уменьшить посттрансфузионный риск инфицирования реципиентов [184, 345, 363, 400].
Вместе с тем по сообщениям ряда авторов, применение монотехнолгогии, в частности NAT-генотипирования не исключают возможности заражения реципиентов крови гемотрансмиссивными инфекциями. Остаточный риск инфицирования составляет по вирусным гепатитам В и С, а также ВИЧ от 1:77000 до 1:3100000 NAT-исследований в Европейских странах и США [187, 266, 279, 315, 331, 377, 395]. Это связано это с пресероконверсионным этапом инкубационного периода инфекций, когда титр вируса в крови еще очень низкий, а лимитирующими факторами исследования остаются: качество тестируемого материала, наличие ингибиторов, методы экстракции нуклеиновых кислот и температурный режим проведения полимеразнои цепной реакции. Так для гепатита В данный пресероконверсионный период может составлять около 1,5 месяцев, для гепатита С - до 1 месяца, по ВИЧ-инфекции - не менее 10 дней [31, 36, 187,395].
В рамках реализации Приоритетного Национального Проекта «Здоровье» уже начато внедрение метода вирусной инактивации донорской плазмы на основе ультрафиолетового облучения обработанной метиленовой синью донорской плазмы. ГУЗ Алтайская краевая СПК использует эту технологию с 2009 года.
Между тем, несмотря на эффективность фотоинактивации вирусных патогенов, высокая затратность данной технологии требует определения наиболее эффективной точки ее приложения в системе мер по обеспечению инфекционной безопасности компонентов донорской крови [21,22,23].
Нет достоверных данных об эффективных вакцинах против гепатита С и ВИЧ [99, 267].
Впервые в Российской Федерации в повседневную практику службы крови шестимесячная карантинизация донорской плазмы была введена с
1999 года, а двухкомпонентная параллельная карантинизация замороженных гемоокомпонентов с 2000 года [54, 207]. Нами также было предложено понятие «вторичного абсолютного брака» донорской крови - как выявленного в период серонегативного окна карантинизации крови (Елыкомов И.В. и соавт., 2004).
Проведение программы карантинизации позволяет дополнительно выявлять инфицированные образцы вторичного брака, что указывает на недостаточность исследования донора при первой донации [20, 55, 135].
Вместе с тем, неявка доноров на повторные исследования в процессе карантинизации донорской плазмы и эритроцитов, оказалась сложной проблемой. Это потребовало разработки как новых подходов к организации локальной и выездной работы станций переливания крови, так и внедрения новых производственных технологий и углубленных лабораторных исследований [65, 81, 191].
Таким образом, несмотря на широкое внедрение в службе крови принципиально важных мероприятий по снижению гемотрансфузионного риска, промышленная схема инфекционной безопасности донорских гемокомпонентов с учетом возможностей NAT-генотипирования и вирус-инактивации до настоящего времени не разработана.
Цель работы
Разработать оптимальную схему инфекционной безопасности компонентов донорской крови при поэтапном внедрении современных технологий в службе крови.
Задачи исследования
1) оценить структуру и количественные характеристики первичного и вторичного инфекционного брака донорской крови;
2) оценить эффективность параллельной и однокомпонентной промышленных систем карантинизации донорских гемокомпонентов;
3) сравнить эффективность 3-х и 6-месячного сроков хранения донорских гемокомпонентов в карантине;
4) оценить роль ПЦР-скрининга доноров в период серонегативного окна на гемотрансмиссивные инфекции в схеме обеспечения вирус- безопасности крови;
5) определить показания к применению технологии вирусной инактивации патогенов в плазме в схеме обеспечения инфекционной безопасности донорской крови;
6) разработать подходы к оптимальному применению технологий карантинизации, NAT-генотипирования и вирусной инактивации компонентов донорских гемокомпонентов в промышленной схеме обеспечения инфекционной безопасности крови.
Научная новизна
Впервые разработана оптимальная схема промышленной технологии обеспечения инфекционной гемотрансфузионной безопасности, основанная на рациональной интеграции NAT-генотипирования, технологии параллельной двухкомпонентной карантинизации и вирусной инактивации патогенов донорской крови.
Впервые доказано преимущество параллельной двухкомпонентной карантинизации донорских эритроцитсодержащих сред и плазмы перед однокомпонентной карантинизации плазмы в обеспечении инфекционной безопасности донорской крови.
Впервые показан помесячный прирост частоты выявления маркеров гемотрансмиссивных инфекций в течение полугодового карантина донорской крови.
Установлено, что срок карантина крови в 6 месяцев значительно увеличивает его эффективность против 3 месячного хранения гемокомпонентов.
Основные положения, выносимые на защиту
Использование ПЦР-скрининга позволяет дополнительно выявлять маркеры гемотрансмиссивных инфекций в образцах крови, заготовленных от доноров, находящихся в периоде серонегативного окна.
Эффективность метода карантинизации крови существенно повышается при введении параллельного хранения плазмы и эритроцитсодержащих компонентов каждого донора не менее 6 месяцев.
Оптимальная схема обеспечения инфекционной безопасности донорской крови основана на клинико-лабораторном контроле с входным ПЦР-скринингом доноров, карантинизации гемокомпонентов и вирусной инактивации плазмы.
Практическая значимость работы
Разработаны базисная и оптимальная схемы обеспечения инфекционной безопасности компонентов донорской крови, основанные на технологии параллельной карантинизации с рациональной интеграцией NAT-генотипирования и процедуры вирусной инактивации патогенов в плазме крови.
Применение технологии параллельной карантинизации компонентов донорской крови привело к снижению поступления в лечебную сеть Алтайского края контаминированных по гемотрансмиссивным инфекциям образцов крови.
Скрининговое NAT-генотипирование компонентов крови, не прошедших процедуру карантинизации, существенно снижает остаточный риск посттрансфузионного инфицирования.
Разработанная схема карантинизации позволяет оптимизировать процесс обеспечения вирусной безопасности гемокомпонентов и использовать ее не только на станциях переливания крови и центрах крови, но и в отделениях переливания крови.
8. Показана информативность определения АЛТ у доноров крови и ее компонентов в учреждениях службы крови как косвенного маркера инфицирования вирусными гепатитами В и С.
Внедрение в практику
В практику службы крови Алтайского края, Новосибирской, Кемеровской и Томской областей внедрены усовершенствованные методы карантинизация плазмы и эритроцитов, входной ПЦР-контроль. Дополнительная вирусинактивация плазмы внедрена на ГУЗ АКСПК. Основные положения диссертации используются в учебном процессе на кафедре гематологии и трансфузиологии факультета усовершенствования врачей ГОУ ВПО «Алтайский государственный медицинский университет» Росздрава и ГНЦ РАМН «Алтайский филиал».
Апробация материалов диссертации
Основные положения работы доложены и обсуждены на научных конференциях общества трансфузиологов Сибирского федерального округа (Барнаул, 2002, 2005; Мыски, 2004), 61-й и 62-й Всероссийских конференциях молодых ученых и студентов (Екатеринбург, 2006, 2007). Материалы диссертации использованы в работе по научному гранту, одобренному комиссиями ГНО «Фонд содействия развитию малых форм предприятий в научно-технической сфере» (Барнаул, 2007; Екатеринбург, 2007, 2008).
Публикации
По теме диссертации опубликовано пять научных работ, в том числе одна в рецензируемом журнале, рекомендованном ВАК.
Личный вклад автора
Автором лично собран первичный материал по донорским учетным записям и записям отведенных от донации лиц, проведено формирование исследуемых групп. Разработаны и предложены к использованию базисная и оптимальная схемы инфекционной безопасности крови. Предложен рациональный способ интеграции NAT-генотипирования и вирусной инактивации плазмы в оптимальную схему обеспечения инфекционной безопасности крови. Проведена статистическая обработка материала, написание статей и методического пособия.
Структура и объем диссертации
Диссертация изложена на 159 страницах машинописного текста. Работа состоит из введения, 9 глав (включающих обзор литературы, анализ материалов и методов исследования, изложения собственных результатов исследования), обсуждения результатов, заключения, выводов, практических рекомендаций, приложения, библиографического списка, который содержит 211 отечественных источников и 218 иностранных. Диссертация иллюстрирована 18 таблицами и 11 рисунками.
Методы обеспечения инфекционной безопасности донорской крови
До недавнего времени основной акцент в плане обеспечения инфекционной безопасности гемотрансфузий делался на повышение качества отбора доноров и внедрение в лабораторную диагностику гемотрансмиссивных инфекций наиболее чувствительных методов [57, 173,404,414].
В России согласно приказам МЗ РФ проверка донора и гемопрепаратов на наличие вирусных гепатитов В и С, ВИЧ-инфекции производится методами ИФА [56, 72, 137, 138, 139, 140, 193].
По сравнению с предшествующими методами ИФА повысил выявляемость вирусных гепатитов В и С и ВИЧ-инфекции в несколько раз. Вместе с тем с помощью метода ИФА невозможно диагностировать вирусоносительство в преконверсионный (серонегативный) период. Тем самым объясняется феномен «проскока» зараженных доноров, так как возможность инфицирования вирусами при гемотрансфузиях сохраняется в основном из-за наличия «серонегативного окна», в течение которого инфицированный человек может стать донором [36, 93, 129, 265, 315, 370].
Таким образом, проблема инфекционной безопасности гемотрансфузий, сводящаяся, главным образом, к отбору доноров и высокочувствительной и специфичной лабораторной диагностике инфекционных агентов на уровне использования методов, определяющих антитела, оказалась до конца нерешенной. Главным камнем преткновения данной проблемы остается «серонегативное окно» [5, 54, 58, 120, 243, 371].
Поэтому с момента создания в 1985 году американцем K.B.Muihs метода амплификации ДНК(технологии NAT) посредством полимеразной цепной реакции (ПЦР) появилась возможность преодолеть «серонегативное окно» благодаря определению собственных ДНК и РНК инфектов, причем присутствующих в минимальных количествах. Однако, несмотря на хорошие результаты ПНР-тестирования доноров на инфицированность вирусами HCV, HBV и HIV-1 говорить о 100% исключении случаев постгемотрансфузионных данных вирусных инфицирований нельзя [73, 178, 264, 252, 302, 364, 380]. По данным ряда исследователей по распространенности вирусов HCV, HBV и HIV-1 среди людей, подвергшихся ПНР-диагностике, инфицированность этими вирусами может быть снижена на 72%, 42% и 50% соответственно [89, 184, 194, 332, 339, 354, 386].
Использование ген-амплификационных методов на основе ПЦР в диагностике сифилиса также дало высокие, но недостаточные результаты. Так чувствительность ПЦР в сравнении с результатами РИТ составила 78%. Ни в одном случае отрицательной РИТ ПЦР не оказалась положительной [134, 147, 281, 333, 362].Применение метода ПЦР оптимизирует обнаружение вирусов в активной фазе, что, несомненно, превосходит эффективность их детекции с помощью ИФА [134, 165, 240, 254,277,280,317,338,377].
Тем не менее, высокая частота инфицирования трансфузионно-зависимых пациентов обосновывает важность использования как развёрнутого ИФА, так и ПЦР в целях ранней диагностики этих инфекций. Из невирусных инфекций доноров обязательно обследуют на сифилис. «Золотым стандартом» его лабораторной диагностики на сегодняшний день считается РИФабс (FTA-absorbtion test). Однако тест этот технически сложен и требует постоянного количественного контроля для получения достоверных и воспроизводимых результатов. Кроме того, каждый тест должен считываться индивидуально квалифицированным сотрудником, что исключает автоматизацию теста и может вносить субъективизм в интерпретацию результатов [205, 362].
В России информационным письмом МЗ и МП РФ от 01.12.95 г. рекомендовано широкое внедрение в практику диагностики сифилиса ИФА с реакцией микропреципитации (РМП). Положительными моментами в диагностике сифилиса с помощью ИФА являются уменьшение серонегативного окна до 3 недель и выявление лиц, перенесших сифилис, пролечившихся и имеющих отрицательные результаты в РМП и РСК, так как таким лицам запрещено донорство согласно инструкции МЗ РФ от 16.11.98 г.
В настоящее время в России специалистами службы крови обсуждается проблема целесообразности определения активности АЛТ в крови доноров в качестве неспецифического маркера вирусных гепатитов [46, 91].
Увеличение АЛТ является основанием для отвода доноров от крово- и плазмодачи ввиду высокого риска инфицирования реципиентов как вирусом гепатита В (ВГВ), так и С (ВГС). По данным одних авторов, уровень АЛТ не может достоверно отражать инфицированную когорту больных, а следовательно, его использование нецелесообразно [35,36, 120]. Тогда как по результатам исследований других, определение анти-HCV коррелирует с повышением уровня этого фермента в крови [91, 171, 176, 177, 327].
Общая характеристика групп обследованных доноров Алтайского края
Материалом для исследований, послужили донорские учетные записи в период с 1999 по 2009 гг. Исследования проведены на базе АГМУ и государственных учреждений здравоохранения Алтайского края: АКСПК, БСПК (Бийская станция переливания крови), РСПК (Рубцовская станция переливания крови).
Для проведения исследования было проанализировано 327084 донорских учетных записей и 31889 записей отведенных от донации лиц (с учетом вторичного брака) единого донорского центра, а также официальные ежегодные данные Роспотребнадзора Алтайского края.
Гемокомпоненты 330542 доноров прошли по критериям начальной схемы инфекционной безопасности и были заложены на карантин, т.е. составили основу исследования по карантинизации. А гемокомпоненты остальных 28431 лиц были сразу отбракованы и утилизированы в соответствии с нормативными документами службы крови. Группа доноров не была статичной и ежегодно обновлялась за счет новых доноров. У 330542 доноров (с учетом вторичного брака) было проведено 885402 донации (2,7 донаций на 1 донора). Перед каждой донацией доноров обследовали в соответствии с обязательными отраслевыми нормативными документами. При отсутствии маркеров гепатитов В и С, ВИЧ и сифилиса, повышения АЛТ и билирубина образцы гемокомпонентов закладывались на 6-месячное хранение.
В связи с явкой 225066 лиц на обязательные повторные исследования для завершения процедуры карантинизации, только данная группа доноров анализировалась на наличие вторичного брака.
При введении входного ПЦР-контроля на гемотрансмиссивные инфекции в 2007 году, 157547 доноров, завершивших процедуру карантинизации, были взяты в группу по исследованию остаточного риска инфицирования гемокомпонентов после ПЦР-обследования. В процессе исследвания наша группа исследователей разработала и далее использовала два следующих определения видов брака крови.
Первичный брак донорской крови — это суммарная частота выявленных маркеров гемотрансмиссивных инфекций (гепатитов В и С, ВИЧ, сифилиса) при стандартном исследовании лиц перед донацией.
Вторичный брак донорской крови — это суммарная частота дополнительно выявленных маркеров гемотрансмиссивных инфекций (гепатитов В и С, ВИЧ, сифилиса) у доноров в период хранения образцов крови в карантине. кадровых доноров и доноров резерва. Лица, сдавшие плазму составили большинство - 283287 (86,61%), сдавшие эритромассу - 43797 человека (13,39%). Кадровых доноров было 279199(85,36%), доноров резерва -48047(14,64%).
Также показано, что среди доноров женщин было на 16% больше, чем мужчин. Женщин было 189741 (58,01%), мужчин - 137343 (41,99%). Возраст обследуемых (п=327084) варьировал от 18 до 63 лет, из них 154155 (47,13%) вошли в возрастную группу до 30 лет, а 172929 (52,87%) составили группу старше 30 лет. Из всей изучаемой группы 225156 (68,09%) на момент обследования сдали кровь повторно, а 105518 (31,91%) были первичными донорами.
Как видно из таблицы 2.2.2 кадроваые доноры сдавали в подавляющем случае плазму, приходя при этом на повторные плазмодачи. Доноры резерва чаще всего сдавали кровь однократно, плазмодач в этой группе было всего около 30% . Доноры, чьи гемокомпоненты были заложены на карантин, при последующих донациях обследовались в обычном режиме. Во всех образцах исследовались маркеры ВИЧ, гепатитов В, С, сифилиса и АЛТ общепринятыми методами в соответствии с нормативными документами для службы крови. Если выявлялись маркеры инфекций в 1 образце, уничтожались как настоящий образец, так и все образцы, находящиеся на хранении в карантине.
Обследование доноров проводилось в соответствии с нормативными приказами Миндравсоцразвития для службы крови. Включало клинические исследование, изучение краевых электронных баз данных доноров, инфекционных больных и их контактных лиц. Лабораторные исследования включали, наряду с общепринятыми для доноров методиками общего и биохимического анализа крови, ИФА-исследование на сифилис, гепатиты В, С и ВИЧ и ПЦР-диагностику гепатитов В, С и ВИЧ-инфекции.
Структура первичного брака донорских гемокомпонентов
Из представленной в таблицах 3.1.3 и 3.1.4 данных видно, что на первом этапе нашего исследования широкое внедрение параллельной бикомпонентной карантинизации крови и своевременные медотводы от донаций по единой компьютерной базе данных доноров края привели к снижению в течение 7 лет суммарного первичного брака донорской крови с учетом всех исследуемых параметров с 9,0% до 6,5%. Первичный брак по маркерам гемотрансмиссивных инфекций ВИЧ, гепатитов В, С и сифилиса в среднем за это время составил 4,64±0,13%. Уменьшение суммарного брака напрямую связано со снижением выявления частоты маркеров инфекций у доноров с 4,95% до 2,95% (р 0,01, распределение Фарадея), так как выявление повышенных АЛТ и других биохимических параметров осталось практически прежним.
Это снижение связано, в первую очередь, с организацией системы выявления потенциально «опасных» доноров и блокированием их последующих кроводач в любом из подразделений службы крови за счет общей компьютерной базы данных в Едином донорском центре. Существенную лепту в снижение брака донорской крови внесло внедрение донорского аппаратного и стандартного (на центрифугах) плазмацитафереза. Постоянно, каждые две недели, сдающие плазму и тромбоциты доноры с неизменно отрицательными результатами на маркеры инфекций составили «элитную» кагорту активных доноров.
Как видно из представленных в таблице 3.1.4 и рис. 3.1 данных практически половина всех маркеров гемотрансмиссивных инфекций у доноров Алтайского края приходится на гепатит С, что соответствует сообщениям других авторов, исследовавших эту проблему донорства в России [ПО, 126, 136]. Резюме: Первичный инфекционный брак донорской крови в Алтайском крае составил в целом 4,64%. В структуре брака в 49% выявлены маркеры гепатита С, маркеры гепатита В, сифилиса и ВИЧ обнаружены соответственно в 26%, 24% и 1% случаев.
Как было показано нами в предыдущей главе, первично выявляемый брак донорской крови имел схожие характеристики в других регионах Сибирского Федерального округа и был, вместе с тем несколько выше, чем в Европейской части страны. Однако в литературе мы не обнаружили данных по распределению маркеров инфекций в структуре первичного и вторичного брака донорской крови при параллельной карантинизации плазмы и эритроцитов.
После каждых шести месяцев карантинизации плазмы и эритроцитной массы подводились промежуточные итоги, которые затем были объединены и систематизированы. В разработку включено 615640 доз донорской плазмы от 286397 доноров (объем промышленной заготовки - 76 954,95 литров). Из них прошедших повторный контроль (карантинизированных) - 213720 доз от 199046 доноров (объем карантинизированной плазмы — 53430,1 л), что составляет - 69,5%.
В исследование вошли 53137 доз донорских эритроцитов от 44277 доноров (объем промышленной заготовки - 6642,125 литров). Из них прошедших повторный контроль (карантинизированных) - 27454 доз от 22891 донора (объем карантинизированных эритроцитов - 3431,375 литров), что составляет 51,7%.
Среди отведенных от донации лиц женщин было 13684 (42,91%), мужчин - 18205 (57,09%). Возраст обследуемых (п=31889) варьировал от 18 до 62 лет, из них 23721 (74,39%) вошли в возрастную группу до 30 лет, а 8168 (25,61%) составили группу старше 30 лет. Отведенные от донации лица были разделены на сдававших эритромассу и плазму в зависимости от вида кроводачи, аналогично группе здоровых доноров, ретроспективно. Лица, сдавшие плазму составили 27240 (85,42%), сдавшие эритромассу - 4649 человек (14,58%).
Из 330542 доноров повторно через 6 месяцев были обследованы 225066 человек, чьи плазма и эритроцитная масса были заложены в карантин (68,1%). За семь лет целенаправленной работы по внедрению промышленной двухкомпонентной системы карантинизации донорской крови выявлено 6976 доз гемокомпонентов от 3458 «зараженных» доноров, что составляет 1,5% от доноров, пришедших на повторное обследование.
При параллельном динамическом сравнении результатов повторного исследования доноров с изначальными параметрами образцов донорской плазмы, заложенной на карантин, дополнительно выявлено 3055 случаев носительства вышеуказанных гемотрансмиссивных инфекций. От этих доноров было заготовлено 783,67 литров плазмы (6170 доз), в дальнейшем забракованных.
При карантинизации эритромассы дополнительно выявлено 403 новых случаев носительства. От этих доноров было заготовлено 100,375 литров эр. массы (806 доз), в дальнейшем забракованных.
Следовательно, до введения карантинизации крови в лечебную сеть и на фармпредриятия могли попасть потенциально зараженные компоненты крови. Таким образом, использование технологии параллельной карантинизации компонентов донорской крови существенно снижает гемотрансфузионный риск в сравнении с однокомпонентной карантинизацией плазмы.
Динамика абсолютного вторичного брака в донорской плазме и эритроцитарной массе по годам внедрения параллельной системы карантинизации гемокомпонентов в Алтайском крае
Карантинизация донорской крови, как мы уже указывали ранее, началась с создания в крае банка замороженной плазмы в 1999 г. Выдерживание до полугода образцов плазмы потребовало значительного увеличения объема заготовки донорской крови для перекрытия клинической потребности больниц в свежезамороженной плазме. В 1999 году общий объем заготовки донорской крови в крае был 34962,6 л, а в 2001 году - уже 41913,6 л, т.е. на 20% больше. В краевой СПК, где был открыт первый в крае банк плазмы, объем заготовки увеличился вдвое. Такие существенные изменения объемов заготовки крови потребовали и изменения принципов заготовки крови на станциях, отделениях переливания крови и в больницах, заготавливающих кровь. В частности, на СПК стал превалировать донорский плазмаферез, выездные бригады обеспечивали кратную карантину заготовку цельной крови, значительно снизилась заготовка крови в ОПК и больницах. В этой связи для нас казалось важным проанализировать отдельно для каждого гемокомпонента систему карантинизации по годам практического введения системы обеспечения вирус-безопасности донорской крови на Алтае. Результаты представлены в табл. 4.2.1 и 4.2.2. Как было ранее указано нами в табл. 4.1.2 вторичный брак гемокомпонентов составил в среднем 1,51% от повторно обследованных. При исследовании свежезамороженной плазмы абсолютный вторичный брак обнаружен в 1,34±0,03% от всех карантинизированных образцов плазмы.
СЗП практически совпали с общей тенденцией по исследованию гемокомпонентов.
При анализе результатов карантинйзации эритроцитов выяснилось, что данные 2004 года явно выпадают из средне-статистических показателей (табл. 4.2.2). Так при подсчете результатов 2000—2003 гг. вторичный брак у повторно обследованных составил в среднем 1,7%, тогда как в 2004 г. — бракераж достиг 6,5%.
Мы считаем, что это были явно завышенные цифры, связанные с рядом причин при промышленной карантинйзации компонентов в крае, так как результаты карантинйзации плазмы в этот год незначительно отличались от многолетних. В 2004 году началось широкое масштабирование карантинйзации эритроцитов на Бийской и Рубцовской станциях переливания крови по методике, разработанной на краевой СПК. В этой связи донации плазмы осуществляли от кадровых доноров методом плазмафереза, а цельную кровь заготавливали выездными бригадами в селах края. До отработки всей схемы заготовки крови в районах кратность кроводач была меньше 2 в год, что не позволяло вовремя первично отводить доноров крови. Это также стало и причиной низкого уровня карантинизации гемокомпонентов. Если изначально при внедрении технологии на краевой СПК на повторное обследование приходили до 75% доноров, то в первый год масштабирования на двух других СПК на исследования являлись не более 38,% доноров. У ранее не обследованных доноров соответственно был и больший шанс оказаться в серонегативном окне. Вместе с тем, на наш взгляд не исключена и возможность получения ложно-положительных результатов лабораторных данных, так в 2004 году на станциях использовались тест-системы для ИФА-исследований от разных производителей. В этой связи данные 2004 года не включены нами в исследование вторичного брака эритромассы. На основании статистической обработки суммарный вторичный брак донорских эритроцитов за 2000-2006 гг. составил 1,9%.
Нами была выполнена работа по динамике помесячного выявления абсолютного вторичного брака образцов гемокомпонентов, находящихся в карантине, так и по ИФА-маркерам гемотрансмиссивных инфекций.
Исследование проведено методом ретроспективного анализа результатов выявления маркеров гепатитов, сифилиса и ВИЧ у доноров плазмафереза ежемесячно в течение полугода. Наряду с определением частоты выявления маркеров инфекций ежемесячно, был посчитан и прирастающий суммарный вторичный брак к окончанию карантина.
Как показано в таблице 4.3.1 суммарный вторичный брак по всем маркерам инфекций нарастал помесячно почти на половину в равном темпе в первые 3 месяца карантина. Затем темп прироста замедлился и вышел на плато к пятому месяцу хранения плазмы и эритроцитов в карантине.
Динамика прироста отбракованных образцов на шестом месяце карантина составила всего 2% и достоверно не отличалась от предыдущего периода. Прирост за первые 4 месяца составлял ежемесячно около 0,4%, с постепенным снижением к окончанию срока карантина почти в 10 раз (до 0,03%), составив в итоге 1,5%.
Практически чрезвычайно важно было выяснить, какова должна быть минимальная продолжительность карантинизации гемокомпонентов.
