Введение к работе
Актуальность темы: Периодонтиты характеризуются воспалением поддерживающих тканей зубов и приводят к резорбции альвеолярного отростка челюсти, уменьшению степени прикрепления мятких тканей к зубам и потере последних Изменения связаны с персистенцией лейкоцитов в гиншвалыюй и периодоігтальной соединительной ткани (Holland R et al, 1983, Sashima M et al, 1990, Wactawski-Wende J ct al, 1996, Forna N et al, 1998, Sawa T et al, 1999, Wactawski-Wende J, 2001, Mitsuta T et al, 2002)
При изучении лейкоцитов в биопсиях десны пациентов с пародонтитом иногда было найдено много В-клеток (78-87%), Т-лимфоцитов и мононуклеаров (10%) Сделано заключение о роли дисбаланса иммунной регуляции в возникновении периодонтита (Syrjanen S et al, 1984, Михалева Л М и др , 2001, Hillmann G et al, 2001, Erciyas К et al, 2006) Тенденция к формированию обширных плазмоклеточных инфильтратов свидетельствует о невозможности противостоять нериодонтопатогенным бактериям и о предрасположенности к периодонтиту (Kinane DF, 2000, Kinane DF, Lappin D F, 2001, Lappin D F et al, 2003) Дефицит IgA приводит к продолжительной активации иммунокомпетентных клеток и индукции воспалительного процесса, сопровождающегося лимфонеогенезом (Lazarus N Н et al, 2003, Fagarasan S HonjoT , 2004, Fagarasan S, 2006, Suzuki K. et al, 2007)
Соїласно данным R Gillett и соавт (1986) воспалительные инфильтраты десны при хроническом пародонтиге можно разделить па 2 группы из-за различной активности процесса Когда активность невысока, объем воспаленной соединительной ткани десны небольшой и здесь преобладают малые В-лимфоцигы В случае активации объем пораженных тканей возрастает, и большинство В-клеточной популяции трансформируется в плазматические клетки В В Гаврилова (2007) также сообщает о наличии в отдельных лейкоцитарных инфильтратах слизистой оболочки десны больных хроническим периодонтитом большого числа плазматических клегок
Таким образом, несмотря на большой объем литературных данных, посвященных изменениям тканей при различных периодонтитах, практически полностью отсутствуют результаты сравнительного изучения динамики численности плазматических клеток в слизистой оболочке десны при патологии периодонта у пациентов различного возраста Также в литературе нет сведений о возможности формировании лимфоидных фолликулов в десне при хроническом воспалении, хотя такие лимфоидные структуры образуются в слизистых оболочках других органов при хронических воспалительных процессах
Цель работы. Определить изменения численности плазматических клегок в воспалительных инфильтратах слизистой оболочке десны при деструктивном хроническом периодонтите у пациентов различного возраста
Задачи исследовании.
Методами световой микроскопии с применением моноклональных антител к антигену CD38 изучить плазмоцитарную инфильтрацию слизистой оболочки десны здоровых людей различного возраста и пола
На основании использования иммуноцитохимиии исследовагь численную плотность плазматических клеток в лейкоцитарных инфильтратах слизистой оболочки десны пациентов с хроническим деструктивным периодонтитом
Установить особенности строения различных, в зависимости от количества плазмоцитов, воспалительных инфильтратов десны больных хроническим деструктивным периодонтитом
Изучить возрастную динамику морфологии различных типов лейкоцитарных инфильтратов слизистой оболочки десны пациентов с хроническим деструктивным периодонтитом
Научная новизна. Впервые проведено исследование лейкоцитарных инфильтратов слизистой оболочки десны пациентов с хроническим деструктивным периодонтитом с применением моноклональных ангител к антигену CD38 Было обнаружено, что в десне присутствует 2 типа воспалительных инфильтратов инфильтраты с высокой численностью плазмоцитов (плазматические клетки составляют 10-30% от общего числа клеток с численной плотностью 80-220 плазмоцитов на 10^ мкм2 площади среза инфильтрата) и структуры с низким содержанием плазматических клеток (с относительной и абсолютной численностью данных клеточных элементов менее 2% и до 30 клеток на единицу площади среза структуры, соответственно) Различия средних величин количества плазматических клеток между инфильтратами с высоким и низким их содержанием в некоторых случаях достигают 100-кратных величин
Впервые доказано существование лимфоидных фолликулов с высоким числом плазматических клеток в слизистой оболочке десны при хроническом деструктивном периодонтите В лимфоидных фолликулах десны при визуальном наблюдении отсутствуют светлые центры, сами структуры сильно деформированы, крайне редко на срезе имеют овальную форму из-за малого объема слизистой оболочки, отсутствия подслизистой и склероза тканей вследствие хронического воспалительного процесса
Впервые продемонстрировано, что воспалительные инфильтраты с малым числом плазматических клеток содержат много нейтрофильных лейкоцитов (26-37% от общего числа клеток и 220-370 нейгрофилов на 10s мкм2 площади среза инфильтрата) и являются истинными лейкоцитарными инфильтратами, формирующимися в тканях в местах высокой концентрации антигенных веществ В клеточном составе инфильтратов с большим количеством плазмоцитов относительно мало нейгрофилов (3-12% от всех клеток и 23-95 лейкоцитов на единицу площади среза) и эти структуры являются лимфоидными фолликулами, образующимися в слизистой оболочке десны, как и в других органах, при хроническом воспалении
Впервые изучена возрастная динамика строения лейкоцитарных
инфильтратов слизистой оболочки десны пациеігтов с хроническим деструктивным периодонтитом Было найдено, что с возрастом больных уменьшается размер лейкоцитарных инфильтратов с низким содержанием плазматических клеток, в цитоархитектонике этих структур сокращается количество моноцитов и лимфоцитов, увеличивается число макрофагов и клеток с признаками деструкции Инфильтраты с высокой концентрацией плазматических клеток (лимфоидные фолликулы) имеюг более стабильную структуру, практически не меняющуюся с возрастом обследованных
Впервые получены данные, что во всех лейкоцитарных инфильтратах слизистой оболочки десны, независимо от численности плазматических клеток в них, по мере увеличения возраста пациентов с хроническим деструктивным периодонтитом увеличивается содержание макрофагов, что косвенно указывает на возрастание значения этих клегок в местном иммунитете
Впервые установлено, что CD38+ клетки отсутствуют в эпителии десны пациентов всех возрастных групп с хроническим деструктивным периодонтитом
Теоретическая и практическая значимость. В результате проведенного исследования в слизистой оболочке десны пациентов с хроническим деструктивным периодонтитом найдены лимфоидные фолликулы с большим количеством плазматических кчеток Дифференциальная диагностика таких лимфоидных фолликулов и нейтрофильных лейкоцитарных инфильтратов должна включать иммуногистохимическое исследование для выявления истинной численности плазматических клеток В связи с тем, что в самой старшей возрастной группе пациентов с хроническим деструктивным периодонтитом в лейкоцитарных инфильтратах выше численная плотность эритроцитов и макрофагов, целесообразно проводить лечение периодонтита и гингивита с учетом возраста пациентов, у больных старших возрастных групп необходимы разработка и проведение методов лечения, направленных на стабилизацию стенки кровеносных сосудов и поддержание адекватной иммунной защиты в тканях десны
Основные положения, выносимые на защиту.
В слизистой оболочке десны пациентов с хроническим деструктивным периодонтитом присутствует 2 типа воспалительных инфильтратов инфильтраты с высокой численностью плазмоцитов (лимфоидные фолликулы) и структуры с низким содержанием плазматических клеток (истинные лейкоцитарные инфильтраты)
С возрастом пациентов в цитоархитектонике лейкоцитарных инфильтратов с низким содержанием плазматических клеток сокращается количество моноцитов и лимфоцитов, увеличивается число макрофагов и клеток с признаками деструкции Лимфоидные фолликулы имеют более стабильную структуру, практически не меняющуюся с возрастом
Плазматические клетки отсутствуют в эпителии десны пациентов всех возрастных групп с хроническим деструктивным периодонтитом
Внедрение результатов исследования в практику. Результаты исследований внедрены в практику научно-исследовательской работы Центра новых медицинских технологий ГУ НИИ химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН и лечебную практику ООО «Дента» (Новосибирск)
Апробация материалов диссертации. Основные положения диссертации доложены на научно-практической конференции, посвященной 80-летию ГОУ ДПО «Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей Росздрава» и 20-летию кафедр стоматологического профиля НГИУВа «Актуальные вопросы стоматологии и челюстно-лицевой хирургии» (Новокузнецк, 2007), VIII Международном симпозиуме и IX Чуйской научно-практической конференции «Проблемы саногенного и патогенного эффектов экологического воздействия на внутреннюю среду организма» (Бишкек, 2007), Международной гистологической конференции, посвященной 80-летию со дня рождения Заслуженного деятеля науки РФ профессора П В Дунаева «Морфогенезы в эволюции, индивидуальном развитии и эксперименте» (Тюмень, 2008) и на объединенном заседании сотрудников кафедр ГОУ ВПО Новосибирского государственного медицинского университета Росздрава, практических врачей и научного персонала лабораторий ГУ НИИ химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН (Новосибирск, 2008)
Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 печатных работ, 3 из которых в изданиях, рекомендованных ВАК РФ для публикации результатов диссертационных исследований
Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, 3 глав собственных результатов с их обсуждением, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы Работа изложена на 150 страницах компьютерного текста, содержит 16 таблиц, иллюстрирована 29 многокомпонентными рисунками Список литературы включает 309 источников (50 отечественных и 259 иностранных) Весь материал, представленный в диссертации, получен, обработан и проанализирован лично автором
