Содержание к диссертации
Введение
І.Обзор литературы 9
1.1. Медиаторная и немедиаторная функции ацетилхолина 9
1.2. Холинэстеразы, их строение и функции 15
1.3. Система ацетилхолин-ацетилхолинэстераза в органах пищеварения у животных в постнатальном периоде 18
1.4. Морфофизиологическое становление органов пищеварения у свиней в раннем постнатальном периоде 20
1.5. Возрастные изменения аминотрансфераз, фосфатаз, а-амилазы в крови у животных 28
2. Материал и методики исследований 31
2.1. Условия проведения исследований и характеристика подопытных животных 31
2.2. Методики определения концентрации ацетилхолина и активности ферментов ацетилхолинэстеразы, аминотрансфераз, фосфатаз и а-амилазы в тканях 33
2.3. Определение количества лейкоцитов, эритроцитов, гемоглобина в крови, температуры тела, частоты дыхания у поросят и параметров микроклимата в свинарнике 34
3. Результаты собственных исследований и их обсуждение 35
3.1. Характер и темпы возрастных изменений содержания ацетилхолина, активности ацетилхолинэстеразы и величины холинергического индекса в тканях двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок у поросят крупной белой породы 35
3.2. Характер и темпы возрастных изменений содержания ацетилхолина, активности ацетилхолинэстеразы и величины холинергического индекса в тканях двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок у помесных поросят 49
3.3. Закономерности возрастных изменений активности ами-нотрансфераз, фосфатаз и а-амилазы в тканях двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок у поросят крупной белой породы 63
3.4. Закономерности возрастных изменений активности ами-нотрансфераз, фосфатаз и а-амилазы в тканях двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок у помесных поросят 92
3.5. Возрастные изменения активности аминотрансфераз, фосфатаз и а-амилазы в сыворотке крови у чистопородных и помесных поросят 124
3.6. Динамика массы тела, массы и длины тонкого кишечника и его кишок у разновозрастных поросят крупной белой породы 133
3.7. Динамика массы тела, массы и длины тонкого кишечника и его кишок у разновозрастных помесных поросят 139
Заключение 145
Выводы 160
Предложения и рекомендации 162
Список литературы 163
Приложение
- Медиаторная и немедиаторная функции ацетилхолина
- Условия проведения исследований и характеристика подопытных животных
- Характер и темпы возрастных изменений содержания ацетилхолина, активности ацетилхолинэстеразы и величины холинергического индекса в тканях двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок у поросят крупной белой породы
- Характер и темпы возрастных изменений содержания ацетилхолина, активности ацетилхолинэстеразы и величины холинергического индекса в тканях двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок у помесных поросят
Введение к работе
Актуальность темы. Нервная система через вегетативный отдел, в том числе "и через систему ацетилхолин-ацетилхолинэстераза, (П.П. Денисенко, 1980; А.Д. Ноздрачев, 1983; Н.Н. Беллер и др.,1986; A.M. Вейн, 1998) регулирует функциональную активность органов пищеварения и приспосабливает их к перевариванию к поступающей извне пище, отличающейся по качеству и количеству. В этой связи определение особенностей становления системы ацетил-холин-ацетилхолинэстераза в органах пищеварения у продуктивных животных после их рождения имеет существенное теоретическое и практическое значение.
Совокупность разнообразных структурных изменений и уровень метаболических процессов, происходящих в клетках, тканях и органах в течение пост-натального онтогенеза животных в значительной степени зависит от содержания в них медиаторов, гормонов и активности ферментных систем (Е.В. Ларина, 1970; М. Диксон, Э. Уэбб, 1982; А.И. Кузнецов, 1995; В.И. Максимов, 1999; В.Н. Гришин, 2000; Г.Г. Егорова и др., 2000; Г.Г. Ефремов, 2004; В.А. Гудин, Т.Е. Костина, В.Ф. Лысов, 2005).
Вместе с тем в научной литературе работ по выяснению характера и темпов развития системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза и ферментных систем в органах пищеварения в связи с их морфофизиологическим становлением у продуктивных животных в постнатальном периоде малочисленны. Отдельные исследования в этом направлении проведены на лабораторных (Г.Г. Ефремов и др. 1998; О.П. Максимова, Н.Г. Игнатьев, 2000) и сельскохозяйственных (Н.Г. Игнатьев, 1977; Т.Ц. Батоева, 1985; Г.Г. Ефремов, 1989; Н.Г. Игнатьев, Н.К. Кириллов, 2002; М.Г. Терентьева, 2008) животных. В научной литературе исследований по выяснению закономерностей развития системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза в тонком кишечнике у свиней не обнаружили.
Известно, что межпородное скрещивание положительно влияет на рост и развитие помесных животных, обогащая их наследственность объединением
!
6 '
разнокачественных гамет родителей (В.Г. Козловский и др., 1982; В.Л. Петухов и др., 1989; Г.М. Бажов, Л.А. Бахирева, 1994; В.Д. Кабанов, 1998; А. Ухтверов, 2000). Однако в научной литературе работ по выяснению особенностей становления системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза и активности ферментов, обеспечивающих структурно-физиологическое развитие тонкого кишечника, у помесных свиней отсутствуют.
Цель и задачи исследований. В связи с вышеизложенным целью нашей работы явилось выяснение особенностей характера и темпов возрастных изменений системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза в тканях двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок в связи с их морфофизиологическим становлением у чистопородных и помесных поросят в раннем постнатальном периоде.
Для достижения поставленной цели были определены следующие задачи:
Установить характер и темпы возрастных изменений параметров системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза в тканях двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок у чистопородных и помесных поросят в раннем постнатальном периоде.
Определить закономерности возрастных изменений активности аланин-, аспартатаминотрансфераз, а-амилазы, щелочной и кислой фосфатаз и выяснить их связь между возрастными изменениями содержания ацетилхолина, активности ацетилхолинэстеразы и величины холинергического индекса в тканях разных участков тонкого кишечника у чистопородных и помесных поросят.
Выявить связь между возрастными изменениями активности аланин-, аспартатаминотрансфераз, а-амилазы, щелочной и кислой фосфатаз в сыворотке крови и тканях тонкого кишечника поросят.
Выявить связь между возрастными изменениями массы тела поросят и массы, длины тонкого кишечника и его кишок, а также между массой, длиной тонкого кишечника и массой, длиной двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок у разновозрастных чистопородных и помесных поросят.
Научная новизна исследований. Впервые установлены характер и темпы
становления системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза и определены законо-
мерности возрастных изменений активности ферментов аланин-, аспартатами-нотрансфераз, а-амилазы, щелочной и кислой фосфатаз в крови и тканях разных участков тонкого кишечника у поросят. Выявлена связь между системой ацетилхолин-ацетилхолинэстераза и возрастными изменениями активности ферментов в тканях тонкого кишечника. Определена связь между возрастными изменениями активности ферментов в сыворотке крови и тканях тонкого ки- шечника, а также между массой тела и массой, длиной тонкого кишечника и его кишок, между массой, длиной тонкого кишечника и массой, длиной двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок у поросят.
Теоретическое значение и практическая ценность работы. Установленные характер и темпы возрастных изменений системы ацетилхолин-ацетилхолинэ-стераза и закономерности развития ферментных систем в тканях тонкого кишечника, выявленные связи между активностью ферментов сыворотки крови и тканей тонкого кишечника у свиней вносят существенное дополнение в определение онтогенетических особенностей становления системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза и ферментных систем у продуктивных животных.
Практическое значение полученных данных состоит в необходимости их использования для эффективного решения вопросов, связанных с особенностями кормления, диагностики и лечения болезней органов пищеварения у поросят, в научно-исследовательской работе для использования в качестве физиологических параметров при решении вопросов, требующих учета степени физиологической зрелости органов пищеварения и системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза, а также при чтении лекций и составлении учебных пособий, монографий по «Физиологии пищеварения животных», «Физиологии вегетативной нервной системы», «Возрастной и частной физиологии животных».
Реализация результатов исследований. Материалы исследований используются в учебном процессе на кафедрах биологии и экологии, морфологии, физиологии и зоогигиены, внедрены в производство УНПЦ «Студгородок» ФГОУ ВПО «Чувашской ГСХА».
Основные положения диссертации, выносимые на защиту.
1. Особенности характера и темпов возрастных изменений содержания ацетилхо-
лина, активности ацетилхолинэстеразы и величины холинергического индекса в
тканях двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок у чистопородных и по
месных поросят в раннем постнатальном периоде.
Закономерности возрастных изменений активности аланин- и аспартатами-нотрансфераз, щелочной и кислой фосфатаз, а-амилазы в тканях двенадцатиперстной, тощей, подвздошной кишок у разновозрастных чистопородных и помесных поросят и их связь с показателями системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза.
Закономерности возрастных изменений активности аланин- и аспартатами-нотрансфераз, щелочной и кислой фосфатаз, а-амилазы в сыворотке крови и корреляция их уровней между сывороткой крови и тканями тонкого кишечника.
Динамика морфометрических показателей тонкого кишечника и его кишок у разновозрастных чистопородных и помесных поросят.
Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены на: Всероссийской научно-практической конференции «Роль ученых в реализации приоритетного национального проекта «Развитие АПК» (Чебоксары, 2007); III и V научно-практической конференции молодых ученых, аспирантов и студентов (Чебоксары, 2007; 2009); Международной научно-практической конференции, посвященной 135-летию академии «Современные подходы развития АПК» (Казань, 2008); Всероссийской научно-практической конференции посвященной 80-летию профессора М.И. Голдобина (Чебоксары, 2008).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 5 работ, в том числе 1 статья "в научных трудах, рекомендованных ВАК РФ.
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 194 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований и обсуждения, заключения, выводов, списка литературы, который включает 246 источников, в том числе 54 иностранных автора и приложения. Работа иллюстрирована 18 таблицами и 55 рисунками.
Медиаторная и немедиаторная функции ацетилхолина
Система ацетилхолин-ацетилхолинэстераза включает два фактора - медиатор ацетилхолин и фермент, гидролизирующий его — ацетилхолинэстераза. Оба фактора находятся в холинергическом синапсе. По современным представлениям холинергический синапс имеет сложное строение (Ю.П. Пушкарев, И.Б. Михайлов, М.В. Неженцев, 1995; И. Дудель, 1996; А.Д. Ноздрачев, Е.И. Чума-сов, 1999; А.Л. Зефиров, СЮ. Черанов, 2000; В.И. Федоров, 2004; А.Л. Зефиров, 2007). Он состоит из пресинаптической мембраны, постсинаптической мембраны, синаптической щели, везикул, митохондрий. Пресинаптическая мембрана представляет собой мембрану нервного окончания, состоящий из двух листков. Мембрану эффекторной клетки называют постсинаптической мембраной. Она также состоит из двух листков - внутренней и наружной.
Ацетилхолин представляет собой сложный эфир холина и уксусной кислоты. В молекуле выделяется 2 специфически активных участка - катионная головка, несущая положительный заряд и эстеразная группа. Катионная головка и эстеразная группы имеют определенное пространственное расположение и расстояние (М.Я. Михельсон, Э.В. Зеймаль, 1970; А.Д. Ноздрачев, 1978).
Медиатор ацетилхолин является химическим посредником нервных импульсов в холинергических синапсах. Он обеспечивает передачу нервных импульсов от преганглионарных парасимпатических и симпатических нервных волокон к нейронам интроорганных ганглиев и к мозговому слою надпочечников, а также от постганглионарных парасимпатических волокон, идущих к сердцу, и от постганглионарных симпатических волокон, иннервирующих железы и гладкие мышцы (О.С. Глазачев, 1995; В.И. Овсянников, 2003). Ацетилхолин также является медиатором в синапсах двигательных нервов скелетных мышц и отдельных синапсах центральной нервной системы (Р.Н. Глебов, 1970; В.Н. Гурин, 1975; С. Contant et al, 1996; К.Б. Шаповалова, 1997; Р.К. Бердиев и др., 2003; К.Н. Дудкин и др., 2007; Т.Г. Комарова, И.В. Екимова, Ю.Ф. Пастухов, 2007).
Синтез ацетилхолина протекает в две последовательные фазы: включает активацию ацетильных групп и ацетилирование холина при посредстве холин-ацетилазы (С. Тучек, 1981).
В синапсах медиатор АХ находится в мелких синаптических везикулах в очень высокой концентрации — 0,11 —0,15 моль. Наряду с медиатором в везикулах находятся АТФ, ионы, ферменты и др. компоненты. Везикулы образуются в теле нервной клетки из эндоплазматического ретикулума и цистерн аппарата Гольджи, а затем транспортируются по аксону в нервные окончания (J.I. Hubbard, 1973; А.Д. Ноздрачев, А.В. Янцев, 1995; W.J. Betz, J.K. Angelson, 1998; Т.С. Sudhof, 2004; S.O. Rizzoli, WJ. Betz, 2005).
Везикулы выделяют медиатор в синаптическую щель посредством экзо-цитоза. Непосредственной причиной выделения медиатора является увеличение внутриклеточной концентрации ионов кальция на месте освобождения медиатора за счет открытия кальциевых каналов при деполяризации пресинаптиче-ской мембраны потенциалом действия (J.E. Heuser, T.S. Reese, 1973; J. Walrond, T.S. Reese, 1985; D. Parker, R. Hill, S. Crillner, 1996; M.R. Bennett, 1996; Y. Coda, 1997; Meir A. et al., 1999; О.П. Балезина, 2002; А.Л. Зефиров и др., 2002; О.П. Балезина, А.Н. Букия, В.И. Лаптева, 2005; А.Л. Зефиров, 2007).
В везикулах ацетилхолин находится в двух - трех видах. Различают функционально активный медиатор, который только что синтезированный. Второй вид называется резервный или мобилизационный. Он находится в везикулах, расположенных вне активной зоны. Третий вид - это стабильный медиатор, который не освобождается даже при продолжительной стимуляции нервных окончаний (Б. Катц, 1968; Р.Н. Глебов, Т.Н. Крыжановский, 1978; А.Д. Ноздрачев, 1983; D.A. Richards et al, 2003).
Медиатор АХ в синапсе освобождается в виде мультимолекулярных порций - квантов. В покое случайное освобождение из нервного окончания отдельных порций вызывает появление на постсинаптической мембране миниа тюрного потенциала концевой пластинки (МПКП), а в ответ на раздражение происходит синхронное освобождение нескольких десятков или сотен квантов и возникает возбуждающий потенциал концевой пластинки (ВГЖП). Электрофизиологическое определение показало, что квант медиатора состоит из 1000 -10000 молекул ацетилхолина (J. del Castillo, В. Katz, 1954; И.М. Глаголева, Е.А. Либерман, 1961; J.A. Boyd, A.R. Martin, 1965; Р.Н. Глебов, 1970;). В дальнейшем квантовая гипотеза освобождения медиатора получила подтверждение на самых разнообразных объектах и в настоящее время считается общепризнанной (В. Katz, 1969;W. Van der Kloot, J. Molgo., 1994; А.Л. Зефиров, 2000; H.B. Вале-ев, И.В. Ковязина, А.И. Скоринкин, 2001; L.A. Naves, W. Van der Kloot, 2001; R.D. Burgoyne, J.W. Barcleay, 2002; R. Jahn, T. Lang., T.C. Sudhof, 2003).
В процессе функционирования синапса, при изменении режима его активности, при действии эндогенных и экзогенных нейромодуляторов и разных видах патологии синаптическая передача подвергается пластическим перестройкам, следствием которых является повышение или снижение амплитуды постсинаптического ответа. Согласно квантово-везикулярной теории модуля-ция синаптической передачи на пресинаптическом уровне может реализоваться за счет изменения числа квантов медиатора, выделяемых в ответ на нервный импульс и величины кванта (L.G. Wu, W.J. Betz, 1998; Е.Е. Никольский, Э.А. Бухараева, 2004).
За последние годы появляются работы по неквантому освобождению ацетилхолина. В этих работах показана, что значительное количество ацетилхолина из нервных окончаний выделяется в неквантовой, молекулярной форме (Е.Е. Никольский, В.А. Воронин, Т.И. Оранская, 1985; А.И. Маломуж, А.Х. Уразаев, Е.Е. Никольский, 2004). А.К. Urazaev (1997) и M.R. Mukhtarov et al. (1999) считают, что неквантовый ацетилхолин регулирует состояние мышц и вызывает МПКП.
После прохождения синаптической щели АХ взаимодействует с холино-рецепторами постсинаптической мембраны. Холинорецепторы это взаимодействие трансформируют в специфические биохимические или физиологические реакции (М.Я. Михельсон, Э.В. Зеймаль, 1970; А.Д. Ноздрачев, Ю.П. Пушка-рев, 1980; А.Э. Авакаян, В.А. Ткачук, 2003).
Холинорецептор является сложной белковой макромолекулой (нуклео-протеидом), локализованной на внешней стороне постсинаптической мембраны. СВ. Аничков (1974, 1982) выделяет два класса холинорецепторов: 1) мус-кариночувствительные (м-холинорецепторы), находятся в периферических синапсах постганглионарных парасимпатических волокон и симпатических волокнах, иннервирующих потовые железы; 2) никотиночувствительные (н-холинорецепторы), находятся во всех ганглионарных синапсах (симпатических и парасимпатических), а также в соматических нервно-мышечных синапсах поперечно-полосатых мышц.
По своему химическому составу холинорецепторы представляют собой гликопротеиды, содержащие около 3% нейтральных Сахаров, среди которых — маноза, глюкоза, N-глюкозамин (A. Karlin et al., 1976). М-холинорецептор - это тетрамер с молекулярной массой 87x10 и имеет 4-5 субъединиц. Молекуляр-ная масса н-холинорецептора равна 40-45 х 10 , число субъединиц колеблется от 4 до 8. (R. Barlow, K.N. Burston, A. Viss, 1980; T.I. Bonner et al., 1987; В.И. Скок, A.A. Селянко, B.A. Деркач, 1987; П.В. Сергеев, Н.Л. Шимановский, 1987; П.В. Авдонин, И.А. Ткачук, 1994).
Условия проведения исследований и характеристика подопытных животных
Экспериментальная часть исследований и научно-производственные опыты выполнены в условиях свиноводческой фермы УНПЦ «Студгородок» Чувашской государственной сельскохозяйственной академии и биохимической лаборатории кафедры биологии и экологии Чувашской государственной сельскохозяйственной академии в течение 2005 — 2008 гг.
Для проведения исследований были отобраны 12 свиноматок крупной белой породы 2-4 опоросов. Из них 6 свиноматок скрещивали с хряком крупной белой породы и 6 свиноматок - хряком породы дюрок. Отъем поросят проводили в возрасте 2 месяцев.
Свиноматок с поросятами и поросят-отъемышей содержали в одном свинарнике в одинаковых условиях с соблюдением необходимых зоогигиенических требований. Кормили их с учетом возраста и живой массы по концентратно-картофельному типу без использования биологически активных добавок. Рационы сбалансировали по основным питательным веществам, витаминам, макро- и микроэлементам в соответствии рекомендуемым нормам (А.П. Калашников, и др. 2003).
Для исследований использовали хрячков в возрасте 1, 10, 21, 30 и боровков — 60 и 120 суток крупной белой породы и помесей. Животных подбирали по принципу аналогов с учетом клинико-физиологического состояния, возраста и живой массы. Для определения эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина брали кровь из хвоста поросят. В отдельные чистые пробирки кровь набирали для получения сыворотки. Животных декапитировали, извлекали органы пищеварения, очищали их от химуса, определяли массу и длину тонкого кишечника и его кишок. Отбирали пробы тканей из разных участков тонкого кишечника, замораживали их в жидком азоте для дальнейшего исследования.
Для определения концентрации ацетилхолина (АХ), активности ферментов ацетилхолинэстеразы (АХЭ), аспартатаминотрансферазы (AcAT), аланинами-нотрансферазы (АлАТ), а-амилазы, кислой (КФ) и щелочной (ЩФ) фосфатаз пробы тканей проксимального, медиального и дистального участков двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок взвешивали, гомогенизировали с кварце-вым песком в гомогенезаторе, гомогенат разбавляли в физрастворе 1:4.
Концентрацию АХ определяли по методу И.В. Шуцкого (1967), принцип методики заключается в том, что ацетилхолин, вступая в реакцию со щелочным раствором гидроксиламинхлорида, образует ацетгидроксамовую кислоту. Она с хлорным железом дает окраску пурпурно-коричневого цвета, который зависит от концентрации ацетилхолина.
Активность АХЭ определяли методики С. Хестрина в модификации А.Н. Панюкова (1966), который также основан на взаимодействии АХ со щелочным раствором гидроксиламинахлорида, в результате чего образуется ацетгидрокса-мовая кислота, дающая с солью железа цветную реакцию, интенсивность которой определяли фотоколориметрически (КФК-2).
Определение активности АсАТ, АлАТ, а-амилазы, ЩФ, КФ проводили по методикам, описанным в справочном пособии Б.Д. Кальницкого (1997).
Методика определения активности АсАТ и АлАТ (Райтмана и Френкеля) основан на разнице поглощения света динитрофенилгидразонами альфа-кетоглутаровой, щавелевоуксусной и пировиноградной кислот. Определяли их на фотоколориметре КФК-2 при длине волны 580 нм.
Активность КФ и ЩФ (методика Бессея-Лоури-Брока) определяли по гидролизу п-нитрофенола, который в щелочной и кислой среде имеет желтовато-зеленоватый цвет. Интенсивность окраски измеряли спектрофотометром (СФ -56А).
Активность а-амилазы определяли (методика Каравея) с применением ди-нитросалицилового реактива, главным компонентом которого является 3,5-динитросалициловая кислота, превращающаяся в З-амино-5-нитросалициловую кислоту, имеющую яркий желто-оранжевый цвет. Окрашенные продукты восстановления определяли колориметрически (КФК-2) при длине волны 530 нм.
Для определения активности ферментов использовали готовые растворы ООО «Витал Девелопмент Корпорэйшн» СПб. Расчет активности всех ферментов и АХ проводили по калибровочным графикам. Цифровой материал обрабатывали методом вариационной статистики (Р.Х. Тукшаитов, 2001).
Подсчет количества лейкоцитов, эритроцитов, содержания гемоглобина в крови осуществляли по общепринятым методикам, описанным в справочнике под руководством И.П. Кондрахина (2004). Показания температуры тела сни-мали в утренние часы электронным термометром (DT-622) в прямой кишке. Частоту дыхания определяли по количеству вдохов и выдохов.
Станки, в которых содержатся подсосные свиноматки, разделены на две зоны деревянными решетками. Свиноматки находятся в зоне, большей по площади, а на малой площадке находятся поросята этих свиноматок. В зоне логова для поросят подвешены лампы инфракрасного излучения типа ИКЗК-220-250 на высоте 70 - 80 см. Температуру и влажность воздуха определяли недельным термогигрографом марки М-16, скорость движения воздуха - крыльчатым анемометром АСО-3, концентрацию аммиака и сероводорода - универсальным газоанализатором УГ-2.
Характер и темпы возрастных изменений содержания ацетилхолина, активности ацетилхолинэстеразы и величины холинергического индекса в тканях двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок у поросят крупной белой породы
Определяли содержание ацетилхолина, активность ацетилхолинэстеразы и величину холинергического индекса в тканях двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок у поросят крупной белой породы в возрасте 1, 10, 21, 30, 60 и 120 суток.
Использовали 25 голов поросят. Всего провели 900 биохимических анализов. Двенадцатиперстная кишка. Данные исследований показывают, что у новорожденных поросят в тканях всех трех участков двенадцатиперстной кишки содержание ацетилхолина (АХ) определяется примерно на одинаковом уровне (табл. 1, рис. 2) и составляет соответственно 1,07±0,04; 1,09±0,05 и 1,14±0,03 мкмоль/г. К десятисуточному возрасту поросят концентрация медиатора в тканях всех трех участков кишки возрастает и в тканях проксимального участка достигает 1,97±0,16, в 1,8 раза, р 0,001, медиального - 1,71±0,02, в 1,6 раза, р 0,001 и дистального - 1,72±0,02 мкмоль/г, в 1,5 раза, р 0,001. С десятого по двадцать первые сутки жизни поросят содержание АХ в тканях всех трех участков кишки падает: проксимального - с 1,97±0,16 до 0,96±0,10, на 51,2%, р 0,001; медиального - с 1,71±0,02 до 0,64±0,02, на 62,7%, р 0,001; дистального - с 1,72±0,02 до 0,62±0,06 мкмоль/г, на 64,0%), р 0,001. С двадцать первого по тридцатые сутки концентрация медиатора вновь повышается: в тканях проксимального участка с 0,96±0,10 до 1,82±0,21, в 1,9 раза, р 0,01; медиального -с 0,64±0,02 до 1,56±0,12, в 2,4 раза, р 0,001; дистального - с 0,62±0,06 до 0,96±0,05 мкмоль/г, на 54,8%, р 0,01.
С тридцатого по шестидесятые сутки в проксимальном и медиальном участках кишки изменение концентрации АХ небольшое и недостоверное, лишь в ее дистальном участке она достоверно возрастает с 0,96±0,05 до 1,58±0,17 мкмоль/г, на 64,2%, р 0,01.С шестидесятого по сто двадцатые сутки жизни поросят в тканях всех участков двенадцатиперстной кишки возрастное изменение концентрации АХ небольшое и недостоверное.
У односуточных поросят в тканях разных участков двенадцатиперстной кишки активность ацетилхолинэстеразы (АХЭ) неодинаковая (табл. 1, рис. 3). Она наибольшая в тканях дистального участка и составляет 1,64±0,09, наименьшая - медиального 1,04±0,05, что ниже дистального на 57,9%, р 0,001, а в тканях проксимального участка активность фермента занимает промежуточное положение - 1,26±0,04 мкмоль/г ч, что выше медиального участка на 17,9%, р 0,05 и ниже дистального на 29,6%, р 0,01. В течение последующих девяти суток жизни поросят активность АХЭ в тканях медиального участка двенадцатиперстной кишки увеличивается до 1,27±0,08, на 22,5%, р 0,05, дистального -снижается до 1,34±0,07 мкмоль/г ч, на 18,1%, р 0,05, а проксимального - оста-ется на уровне односуточных. С десятого по двадцать первые сутки жизни поросят возрастное изменение активности фермента в тканях всех трех участков двенадцатиперстной кишки недостоверное.
С двадцать первого по тридцатые сутки активность АХЭ уменьшается в тканях проксимального участка с 1,53±0,09 до 0,99±0,11, на 35,2%, р 0,01, медиального - падает с 1,36±0,11 до 0,92±0,03 на 32,4%, р 0,01, дистального - снижается с 1,42±0,11 до 1,03±0,10 мкмоль/г ч, на 27,8%, р 0,05. С тридцатого по шестидесятые сутки в тканях проксимального и дистального участков возрастное изменение активности АХЭ небольшое и недостоверное, а медиального участка она возрастает достоверно, с 0,92±0,03 до 1,21±0,08 мкмоль/г ч, на 32,3%, р 0,01. С шестидесятого по сто двадцатые сутки в тканях проксимального, медиального и дистального участков возрастное изменение активности фермента незначительное и недостоверное.
У односуточных поросят величина соотношения ацетилхолина к ацетил-холинэстеразе, или холинергического индекса (ХИ) в тканях проксимального участка двенадцатиперстной кишки (табл. 1, рис. 4) относительно невысокая и составляет 0,85. В последующие девять суток жизни она возрастает в 1,8 раза и достигает 1,54. К двадцатиодносуточному возрасту величина ХИ уменьшается до 0,63, на 59,5%. К месячному возрасту она вновь увеличивается в 2,9 раза, до 1,83. У двухмесячных она сохраняется на уровне месячных - 1,60. В течение последующих двух месяцев жизни поросят величина ХИ возрастает незначительно, на 18,6% и достигает 1,9. У односуточных поросят в тканях медиально-го участка двенадцатиперстной кишки она выше проксимального на 23,5% и составляет 1,05. В этом участке в последующие девять суток жизни поросят исследуемый показатель также возрастает, в 1,3 раза, до 1,35. В дальнейшем, также как и в проксимальном участке, величина ХИ к двадцатиодносуточному возрасту уменьшается, на 65,0%, до 0,47. Повторное повышение этого показателя выявляется у месячных, в 3,6 раза, до 1,70. На уровне месячных величина ХИ колеблется у двух- и четырехмесячных, соответственно 1,61 и 1,73. В тканях дистального участка двенадцатиперстной кишки величина ХИ у односуточных поросят самая наименьшая и составляет 0,69, что ниже проксимального и медиального участков на 18,8 и на 52,2%). К десятисуточному возрасту эта величина, как и в предыдущих участках, повышается в 1,8 раза, до 1,28. К двадцатиодносуточному возрасту она падает до 0,44 на 65,9%. В дальнейшем, к месячному возрасту поросят, увеличивается до 0,94, в 2,1 раза.
Характер и темпы возрастных изменений содержания ацетилхолина, активности ацетилхолинэстеразы и величины холинергического индекса в тканях двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок у помесных поросят
Определяли содержание ацетилхолина, активность ацетилхолинэстеразы и величину холинергического индекса в тканях двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок у помесных поросят в возрасте 1, 10, 21, 30, 60 и 120 суток.
Использовали 25 голов поросят. Всего провели 900 биохимических анализов. К двухмесячному возрасту содержание АХ в тканях медиального и дистального участков изменяется недостоверно, а проксимального - достоверно, и снижается до 2,43±0,11 мкмоль/г, на 14,4%, р 0,05. К четырехмесячному возрасту в тканях проксимального и дистального участков двенадцатиперстной кишки уровень содержания медиатора изменяется несущественно, а медиального участка он снижается до 2,24±0,11 мкмоль/г, на 11,5%, р 0,05.
Достоверная разница содержания медиатора в тканях двенадцатиперстной кишки между чистопородными и помесными поросятами выявляется в тканях всех участков в течение первого месяца жизни поросят.
Помесные поросята рождаются с разной активностью АХЭ (табл. 4, рис. 12) в тканях двенадцатиперстной кишки: наименьшая активность выявляется в тканях медиального участка - 0,78±0,05 мкмоль/г ч, что ниже проксимального - на 42,9%, р 0,001 и еще ниже дистального - в 2,0 раза, р 0,01. В течение последующих девяти суток жизни поросят активность фермента в тканях проксимального и медиального участков сохраняется на прежнем уровне, а дистального снижается с 1,58±0,13 до 0,98±0,07 мкмоль/г ч, на 38,0%, р 0,01.
С десятого по двадцать первые сутки жизни поросят возрастное изменение активности АХЭ достоверно только в тканях проксимального участка кишки, увеличивается с 1,22±0,06 до 1,66±0,12 мкмоль/г ч, на 36,1%, р 0,05. С двадцать первого по тридцатые сутки активность АХЭ в тканях всех участков кишки уменьшается значительно: проксимального участка - с 1,66±0,12 до 0,85±0,06, на 48,8%, р 0,001, медиального - с 0,92±0,06 до 0,61±0,09, на 33,7%, р 0,05, дистального - с 1,08±0,04 до 0,71±0,04 мкмоль/г ч, на 34,3%, р 0,001. С тридцатого по шестидесятые сутки обнаруживается повторное повышение активности фермента АХЭ в тканях всех участков кишки: проксимального - до 1,64±0,16, на 93,4%, p 0,01, медиального - до 1,37±0,18, в 2,2 раза, р 0,01, дистального - до 1,27±0,09 мкмоль/г ч, на 78,9%, р 0,001. К четырехмесячному возрасту в тканях всех участков двенадцатиперстной кишки возрастное изменение активности фермента незначительное и недостоверное.
Достоверная разница активности АХЭ в тканях двенадцатиперстной кишки между чистопородными и помесными поросятами выявляется: у односуточных — медиального участка; у десяти-, двадцатиодно- и тридцатисуточных — медиального и дистального участков.
Величина ХИ (табл. 4, рис. 13) в тканях проксимального участка двенадцатиперстной кишки у односуточных поросят-помесей составляет 1,22. В последующие девять суток она увеличивается до 2,20, на 80,5%. К двадцатиодно-суточному возрасту величина ХИ снижается до 1,14, на 48,4% и в последующие девять суток резко увеличивается до 3,34, в 2,9 раза. К двухмесячному возрасту она повторно снижается до 1,48, на 55,8%. К четырехмесячному возрасту вновь возрастает до 2,16, на 46,1%. В тканях медиального участка у односуточных поросят эта величина максимальная и составляет 2,30, что выше проксимального и дистального участков соответственно в 1,8 и 2,4 раза. К десятисуточному возрасту отмечается повышение величины ХИ до 3,36, на 46,2%. В последующем, до двухмесячного возраста, изменение этой величины в тканях медиаль ного участка происходит также как и проксимального участка. Так, к двадцати-односуточному возрасту она снижается до 1,35, на 59,8%, к месячному — возрастает до 3,75, в 2,8 раза, к двухмесячному - падает до 1,84, на 50,9%. У четырехмесячных поросят в тканях данного участка возрастное изменение величины ХИ несущественное. В тканях дистального участка у новорожденных поросят величина ХИ наименьшая и составляет 0,96. К десятисуточному возрасту она повышается до 2,22, в 2,3 раза. У двадцатиодносуточных величина ХИ снижается до 1,06, на 52,1%. К месячному возрасту отмечается повторное ее повышение, до 2,28, в 2,1 раза и на таком же уровне она сохраняется у двух- и четырехмесячных.
Полученные данные показывают, что наиболее высокие величины концентрации АХ в тканях проксимального и медиального участков двенадцатиперстной кишки у помесных поросят выявляются в возрасте десять, тридцать, шестьдесят и сто двадцать, а дистальном - десять, шестьдесят и сто двадцать суток. Наиболее высокие величины фермента АХЭ выявляются в тканях проксимального участка в возрасте двадцать один, шестьдесят, медиального - шестьдесят и дистальном - первые сутки. Высокие величины ХИ в тканях проксимального и медиального участков отмечаются у месячных, дистального - у четырехмесячных поросят.
Наивысшие темпы возрастных изменений содержания медиатора обнаруживаются в тканях проксимального и медиального участков с первого по десятые и с двадцать первого по тридцатые, а дистального — с первого по десятые и с десятого по двадцать первые сутки жизни поросят. Наиболее высокие темпы возрастных изменений активности фермента обнаруживаются в тканях всех участков с тридцатого по шестидесятые сутки. Высокими темпами величина ХИ изменяется в тканях проксимального и медиального участках с двадцать первого по тридцатые, дистального — с первого по десятые и с двадцать первого по тридцатые сутки.
Тощая кишка. У суточных помесных поросят содержание АХ (табл. 5, рис. 14) в тканях разных участков тощей кишки неодинаковое. В тканях меди ального участка оно наименьшее и составляет 0,85±0,03 мкмоль/г, проксимального - выше медиального на 18,7%, р 0,01, дистального - еще выше медиального - на 55,7%о, р 0,01. В течение девяти суток жизни поросят концентрация медиатора в тканях проксимального участка падает до 0,71±0,03, на 32,4%, р 0,001, дистального - до 0,89±0,05 мкмоль/г, на 33,1%, р 0,01. В последующем, с десятисуточного по месячный возраст, в тканях проксимального участка изменение количества медиатора небольшое и недостоверное. В тканях медиального участка существенных возрастных изменений этого показателя в течение всего первого месяца жизни поросят не выявляется.
