Введение к работе
Актуальность проблемы. Несмотря на более чем столетнюю историю изучения, проблема амилоидоза продолжает привлекать внимание исследователей (F.Ferrario, M.Rastaldi, 2006), что обусловлено помимо достаточно широкой распространенности, тяжестью клинических проявлений со склонностью к развитию почечной недостаточности (R. Rysava, 2007). Амилоидоз и сегодня остается малоизученным, сложным для диагностики и лечения патологическим процессом. В связи с этим перспективными могут явиться экспериментальные исследования, направленные на создание моделей амилоидоза с использованием животных, совмещающих в себе два качества: достаточный размер и доступность. Кроме того актуальным остается поиск новых средств профилактики и лечения амилоидоза, обладающих минимальным количеством побочных эффектов и эффективностью.
Механизм лечебного действия сульфидных минеральных вод на организм в целом сложен, многообразен и подлежит дальнейшему изучению. Исследования, показавшие, что сульфидные минеральные воды обладают выраженным обезболивающим и противовоспалительным действием, дали возможность применять воду «Редант-4Р» для лечения многих воспалительных и системных заболеваний, обусловленных дезорганизацией соединительной ткани (Хетагурова З.В., Амбалова С.А., 1988; Чамокова Е.Ф., Тадеева С.Х., Осипова Л.В., 1974-1992гг; Гобеев В.Н., Кастуева Н.З., Цебоев Б.Б.,1989). Перечисленные свойства позволяют предположить, что минеральная вода Северной Осетии «Редант-4Р» может оказывать тормозящее действие на процессы синтеза и отложения амилоида.
Есть основание полагать, что играющие определенную роль в патогенезе приобретенного амилоидоза нарушения гомеостазиса могут корригироваться препаратами, оказывающими мембраностабилизирующий, антигипоксический и антиоксидантный эффекты. Одним из таких препаратов является янтарная кислота, обладающая иммуномодулирующим и цитомембраностабилизирующим действием (А.А. Хадарцев, 2003,2004; А.Л. Коваленко, А.Ю. Петров, М.Г. Романцов, 2005). Получен положительный терапевтический эффект от применения янтарной кислоты при экспериментальном амилоидозе у хомяков (Пухова И. У., Брин В.Б., Козырев К.М. 2009).
Все вышеизложенное диктует целесообразность изучения возможности применения сульфидной минеральной воды и янтарной кислоты раздельно и в их сочетании для коррекции нарушений при нефропатическом типе генерализованного амилоидоза.
Целью работы явилось создание моделей экспериментального нефропатического типа амилоидоза, изучение функциональных и патогистоструктурных характеристик их патогенеза, анализ возможности корригирующего влияния янтарной кислоты и минеральной воды «Редант-4».
Задачи исследования. Для достижения указанной цели в работе решались следующие задачи:
-
Создать модели экспериментального генерализованного нефропатического амилоидоза у крыс: 1) методом длительного введения нативного яичного альбумина старым животным (возраст 18-24 месяца, масса тела 330-380 гр); 2) методом однократного введения нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда. Провести функциональное и морфологическое их сопоставление с ранее созданными в лаборатории моделями амилоидоза.
-
Изучить характер функционально-структурных изменений у животных, получавших в процессе моделирования амилоидоза минеральную воду «Редант-4».
-
Изучить характер функционально-структурных изменений у животных, получавших в процессе моделирования амилоидоза янтарную кислоту
-
Изучить характер функционально-структурных изменений у животных, получавших в процессе моделирования амилоидоза минеральную воду «Редант-4» в сочетании с янтарной кислотой.
Научная новизна. Впервые разработан метод моделирования амилоидоза путем длительного (60 дней) подкожного введения старым крысам нативного яичного альбумина в дозе 0,025 мл/г массы тела, а также метод моделирования амилоидоза путем однократного подкожного введения крысам равнодолевой смеси нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда из расчета по 0,2 мл в пять точек инъекций. Обе модели проявляются системным амилоидозом с преимущественным поражением почек, сердца, печени, селезенки. Выявлены особенности развития амилоидоза почек, сопровождающегося снижением основных показателей электролитоводовыделительной функции.
Установлено, что применение сульфидной минеральной воды, янтарной кислоты и их сочетания уменьшает изменения водовыделительной и ионовыделительной функции почек, значительно снижает степень протеинурии. Уменьшается выраженность патогистологических изменений в почках, сердце, печени, селезенке.
По теме диссертационной работы, на основании результатов исследования получены 3 патента на изобретение Федерального института промышленной собственности: от 20 ноября 2009 г под № 2373581; от 27 января под № 2410761; от 27 января под № 2410764.
Научно-практическая значимость работы. Исследование носит экспериментальный характер, полученные результаты, демонстрирующие эффекты длительного подкожного введения старым крысам яичного альбумина, а также однократного введения старым крысам равнодолевой смеси яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда, сопровождающиеся развитием амилоидоза, относятся к области фундаментальных знаний, так как расширяют представления о возможностях моделирования амилоидоза, вносят определенный вклад в теорию его этиологии и патогенеза. Выявленные эффекты применения сульфидной минеральной воды «Редант-4» и янтарной кислоты, демонстрируют возможность профилактического их применения с целью нормализующего влияния на измененное состояние электролито-водовыделительной функции почек при экспериментальном амилоидозе.
Результаты исследования могут быть использованы при преподавании патофизиологических и гистоструктурных основ стромально-сосудистых диспротеинозов, при разработке способов профилактики и лечения амилоидоза.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Длительное (60 дней) подкожное введение старым крысам нативного яичного альбумина в дозе 0,025 мл/г массы тела приводит к развитию системного амилоидоза с преимущественным поражением почек, сердца, печени, селезенки. Однократное введение старым крысам равнодолевой смеси нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда из расчета по 0,2 мл в 5 точек инъекций также приводит к развитию системного амилоидоза с преимущественным поражением почек, сердца, печени, селезенки. Формирование экспериментального амилоидоза сопровождается протеинурией, изменением показателей электролито-и водовыделительной функции почек.
-
Применение сульфидной минеральной воды одновременно с нативным яичным альбумином способствует уменьшению выраженности признаков поражения почек, приводя к частичному восстановлению электролита- и водовыделительной функции и снижению уровня протеинурии.
-
Применение янтарной кислоты одновременно с нативным яичным альбумином способствует уменьшению выраженности признаков поражения почек, приводя к частичному восстановлению электролито- и водовыделительной функции и снижению уровня протеинурии.
-
Применение сульфидной минеральной воды в сочетании с янтарной кислотой при моделировании амилоидоза способствует более выраженному уменьшению признаков поражения почек, приводя к частичному восстановлению электролито- и водовыделительной функции и снижению уровня протеинурии.
Личный вклад автора: Автором самостоятельно выполнена экспериментальная часть работы, математическая и статистическая обработка данных.
Публикации и апробация диссертационной работы. По теме диссертации опубликовано 11 научных работ, включая 3 патента РФ на изобретение и 4 публикации в изданиях, определенных Высшей аттестационной комиссией.
Материалы исследований доложены и обсуждались на 10-й Юбилейной научной сессии, посвященной 70-летию СОГМА (Владикавказ, 2009); IX Конференции молодых ученых СОГМА (Владикавказ, 2010); X Конференции молодых ученых и специалистов СОГМА (Владикавказ, 2011); совместном заседании кафедр нормальной и патологической физиологии, патологической анатомии, фармакологии и ЦНИЛ ГОУ ВПО СОГМА Минздравсоцразвития РФ от 14 июня 2011 года.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 155 страницах машинописного текста, включая введение, обзор литературы, описание материалов и методов исследования, результаты исследования, их обсуждение, заключение, выводы, список использованной литературы и приложение. Работа иллюстрирована 57 рисунками и 10 таблицами, размещенными в приложении.
