Введение к работе
Актуальность проблемы. По современным представлениям эндотели-альная дисфункция (ЭД) является одним из ведущих патогенетических звеньев сердечно-сосудистых заболеваний. Так, роль дисфункции эндотелия доказана в патогенезе ряда наиболее распространенных заболеваний и патологических состояний: атеросклерозе, артериальной гипертензии, легочной гипертензии, сердечной недостаточности, дилагационной кардиомиопатии, ожирении, гиперли-пидемии, сахарном диабете, гипергомоцистеинемии (Laufs U., 1998; Белоусов Ю.Б., Намсараев Ж.Н., 2006).
Основным механизмом, лежащим в основе ЭД, является снижение образования и биодоступности оксида азота (N0) при одновременном повышении уровня супероксид-аниона и продукции мощных вазоконстрикторов (Марков Х.М., 2005).
Таким образом, дисфункция эндотелия проявляется дисбалансом между медиаторами, обеспечивающими в норме оптимальное течение всех эндотелий-зависимых процессов (Shimokawa Н., 1998; Luscher T.F., 2001).
Нарушения продукции, взаимодействия, разрушения эндотелиальных ва-зоактивных факторов наблюдаются одновременно с аномальной сосудистой реактивностью, изменениями в структуре и росте сосудов, которым сопутствуют сосудистые заболевания (Хи С, 2001).
NO синтезируется из L-аргинина под влиянием эндотелиальной NO-синтазы (eNOS) путем присоединения молекулярного кислорода к конечному атому азота гуанидиновой группы L-аргинина (Casino P.R., Kilcoyne СМ., Quyyumi А.А., Hoeg J.M., Panza J.A., 1994).
Изучение состояния сосудистой стенки и поиск возможностей целенаправленного лечения ЭД является важной клинико-экспериментальной задачей, но вместе с тем в настоящее время не существует препаратов для специфической коррекции.
Одной из важных точек приложения терапевтического воздействия при ЭД является восстановление дефицита NO, которое возможно путем активации фермента eNOS (Бабак О.Я., 2004).
Оксид азота (NO) - ведущий гуморальный эндотелиальный модулятор дилатации, релаксирующий сосуды. Фактор вырабатывается эндотелиоцитами. Поскольку клетки эвдотелия выделяют большое количество различных веществ в кровь и окружающие ткани, их комплекс можно рассматривать как самую большую эндокринную систему (Dzau V.J., 2001).
В настоящее время достаточно большое внимание уделяется препарату «Импаза» производства (ООО НПФ «Материа Медика Холдинг», Россия) для коррекции эректилыюй дисфункции (Мазо Е.Б., Гамидов СИ., Овчинников Р.И., 2003).
Ряд исследований свидетельствует о том, что эректильная дисфункция, представляя собой проявление эндотелиальной дисфункции, является независимым фактором риска сердечно-сосудистых заболеваний, поскольку повреждение эндотелия сосудов считается одним из первых этапов формирования ате-росклеротической бляшки. В клинических исследованиях по изучению эндоте-
лийзависимой и независимой дилатация плечевой артерии данные значения оказались сниженными у пациентов с эректильной дисфункцией по сравнению со здоровыми мужчинами (Мартюшев-Поклад А.В., Дугина Ю.Л., Сергеева С.А., Эпштейн О.И., 2003).
Таким образом, зректильная дисфункция нередко оказывается первым проявлением эндотелиальной дисфункции (по современным представлениям -первого патогенетического звена атерогенеза).
В связи с вышеизложенным являлось актуальным изучение эндотелио-протективных свойств препарата «Импаза» и его комбинаций с ингибитором ангиотензинпревращающего фермента (АПФ) - эналаприлом и блокатором ан-гиотензиновых рецепторов (ATI) - лозартаном при экспериментальном дефиците оксида азота.
Номер государственной регистрации темы - 01.2.006 10387.
Цель исследования: провести оценку эндотелио- и кардиопротективных эффектов препаратов «Импаза», эналаприл, лозартан и их комбинаций на модели L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота в эксперименте.
Задачи исследования:
-
Изучить гемодинамические эффекты препарата «Импаза».на ненарко-тизированных животных.
-
Изучить эндотелиопротективную активность препарата «Импаза» L-NAME-индуцированной модели дефицита NO в эксперименте.
-
Изучить эндотелиопротективную активность сочетанного применения препарата «Импаза» и ингибитора АПФ - эналаприла при L-NAME-индуцированной модели дефицита NO в эксперименте.
-
Изучить эндотелиопротективную активность сочетанного применения препарата «Импаза» и блокатора ATI-рецепторов лозартана калия при L-NAME-индуцированной модели дефицита NO в эксперименте.
Научная новизна исследования. В работе впервые показано, что «Импаза» 1 таб./кг (1 таблетка на 100 мл воды, со свободным доступом к питью с учётом объема потребляемой жидкости 20±3 мл/животное/сут.) оказывает эндоте-лиопротективное действие на модели L-NAME-индуцированной NO-дефицитной ЭД. Эналаприл 0,5 мг/кг и лозартан калия 6 мг/кг (однократно внутрижелудочно в течение 7 суток) как монотерапия также обладали эндоте-лиопротективными эффектами на выбранной модели патологии. Сочетанное использование препарата «Импаза» с ингибитором АПФ эналаприлом и блокатором ATI-рецепторов лозартаном калия показало положительное эндотелио-протективное взаимодействие, выражающееся в снижении коэффициента эндотелиальной дисфункции.
В работе впервые показано, что «Импаза» 1 таб./кг (1 таблетка на 100 мл воды, со свободным доступом к питью с учётом объема потребляемой жидкости 20±3 мл/животное/сут.) оказывает выраженное кардиопротективное действие на модели L-NAME-индуцированной NO-дефицитной ЭД, выражающееся в предотвращении повышения адренореактивности и снижения миокардиального резерва.
В работе впервые показано, что «Импаза» 1 таб./кг (1 таблетка на 100 мл воды, со свободным доступом к питью с учетом объема потребляемой жидкости 20±3 мл/животное/сут.) предотвращала увеличение поперечного диаметра миокардиоцитов, вызванное L-NAME-индуцированной NO-дефицитной ЭД. Сочетанное использование препарата «Импаза» с ингибитором АПФ энала-прилом и блокатором ATI-рецепторов лозартаном калия показало аддитивное действие на диаметр миокардиоцитов.
Научная новизна подтверждается получением патента РФ (RU 2306953, «Способ коррекции эндотелиальной дисфункции смесью растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной син-тазе оксида азота человека - СІ2, СЗО, С200) и положительным решением на выдачу патента РФ (Заявка 2007134108) «Способ коррекции эндотелиальной дисфункции лозартаном в комплексе с смесью растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека — С12, СЗО, С200».
Практическая значимость. В работе обоснована эффективность соче-танного применения препарата «Импаза» с ингибитором АПФ эналаприлом и блокатором ATI-рецепторов лозартаном калия для коррекции L-NAME-индуцированной NO-дефицитной ЭД в эксперименте. Показано, что их сочетанное использование позволяет нормализовать изменение соотношения сосудистых реакций на ацетилхолин (эндотелийзависимая вазодилатация) и нитро-пруссид натрия (эндотелийнезависимая вазодилатация) с увеличением коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД) в 5 раз, предотвратить снижение показателей биохимических маркеров (Total NO, экспрессия NO-синтетазы), а также добиться положительной динамики морфофункциональных показателей сердечно-сосудистой системы (диаметр миокардиоцитов, прирост давления при пробе на нагрузку сопротивлением и адренореактивность и т.д.).
Экспериментально доказано, что введение препарата «Импаза» вызывает коррекцию NO-дефицитной эндотелиальной дисфункции.
Полученные данные позволяют рекомендовать целенаправленные клинические испытания препарата «Импаза» при состояниях, сопровождающихся эндотелиальной дисфункцией.
Внедрение результатов научных исследований. Материалы диссертационного исследования, касающиеся изучения эндотелиопротективной активности стимулятора eNOS, используются и в ООО НПФ «Материа Медика Холдинг», Россия, с целью формирования представления об эндотелиопротективной активности данного препарата.
Материалы диссертационного исследования, касающиеся антигипертеь-зивной и эндотелиопротективной активности лозартана калия «Блоктран» и эналаприла малеата «Рениприл» (производства ОАО «Фармстандарт-Лексредства», Курск), включены в состав документов, поданных на регистрацию в МЗ РФ (РУ № 000084/01-2000).
Апробация работы. Материалы работы доложены на итоговых научных сессиях и конференциях молодых ученых КГМУ в 2006, 2007 и 2008 гг., ХШ национальном конгрессе «Человек и лекарство». Апробация диссертации про-
ведена на научно-практической конференции кафедр фармакологии, клинической фармакологии и фармакотерапии, внутренних болезней № 2, гистологии, анатомии человека, НИИ экологической медицины КГМУ. По материалам диссертации опубликовано 20 печатных работ, в том числе 4 работы в журналах, рекомендуемых ВАК.
Положения, выносимые на защиту
-
«Импаза» 1 таб./кг (1 таблетка на 100 мл воды, со свободным доступом к питью с учётом объема потребляемой жидкости 20±3 мл/животное/сут.) оказывает дозозависимое эндотелиопротективное действие на модели L-NAME-индуцированной NO-дефицитной ЭД. Эналаприл 0,5 мг/кг и лозартан калия 6 мг/кг однократно в течение 7 суток внутрижелудочно как монотерапия также обладали эндотелиопротективными эффектами на выбранной модели патологии.
-
Сочетанное использование препарата «Импаза» 1 таб./кг (1 таблетка на 100 мл воды, со свободным доступом к питью с учётом объема потребляемой жидкости 20±3 мл/животное/сут.) с эналаприлом 0,5 мг/кг оказывает выраженное эндотелиопротективное действие на модели L-NAME-индуцированного дефицита NO, что выражается в снижении КЭД, а также в предотвращении снижения содержания нитрит-ионов NOx. При этом не отмечается предотвращение развития гипертензии. Результаты нагрузочных проб выявили способность комбинации предотвращать повышения адренореактивности на фоне снижения реакции на реоксигенацию. Морфологические исследования миокар-диоцитов обнаружили предотвращение под влиянием комбинации препарата «Импаза» с эналаприлом увеличения поперечного диаметра миокардиоцитов.
-
Комбинированное использование препарата «Импаза» 1 таб./кг (1 таблетка на 100 мл воды, со свободным доступом к питью с учётом объема потребляемой жидкости 20±3 мл/животное/сут.) с лозартаном калия 6,0 мг/кг оказывает эндотелиопротективное действие на модели L-NAME-индуцированного дефицита NO, выражающееся в снижении КЭД, положительной динамике результатов нагрузочных проб и морфологических исследований, а также в предотвращении снижения содержания нитрит-ионов NOx. При этом так же не отмечается предотвращение развития гипертензии.
Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, результатов исследования, обсуждения полученных результатов, выводов и списка используемой литературы, включающего 309 источников, из них 121 отечественных и 188 зарубежных авторов. Диссертация изложена на 162 страницах машинописи, содержит таблиц - 15, рисунков - 39, схем - 1.
