Введение к работе
АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ. Современное развитие фармации и медицины, расширение номенклатуры лекарственных средств, требует постоянно развивающихся и совершенствующихся методов анализа биологически активных соединений в различных объектах. В лекарственных формах с целью контроля их качества, в растительном сырье, служащем источником получения широкой группы препаратов, в биологических жидкостях организма человека для проведения фармакокинетических исследований, коррекции схемы дозирования лекарств с целью их рационального, безопасного, эффективного и индивидуального назначения.
Для этого необходимы современные, высокочувствительные и селективные, точные методики качественного и количественного анализа лекарственных веществ в различных объектах.
Большинство научных исследований в этом направлении основываются на использовании различных приемов анализа органических соединений и поиске новых путей решения поставленных задач.
В арсенале методов, применяющихся в фармацевтическом, биофармацевтическом и фитохимическом анализе, особое место занимает флуоресцентный анализ, обладающий высокой точностью, селективностью и чувствительностью. Известно достаточное количество способов флуориметрического определения органических и неорганических веществ в различных объектах. Однако, применение их в фармацевтическом и биофармацевтическом анализе имеет все еще ограниченный характер в связи с недостаточной изученностью способности соединений различного химического строения флуоресцировать при достижении определенных условий.
Вместе с тем, известно, что способностью флуоресцировать обладают природные и синтетические кумарины, широко использующиеся в качестве лекарственных средств, в том числе и
производные хромен- а -пирона и карбокромена. Однако, это их свойство совершенно недостаточно изучено и поэтому мало используется в практических целях.
В связи с этим представляется актуальным изучение способности производных хромен-а-пирона и карбокромена образовывать флуоресцирующие продукты реакции и разработать на этой основе высокочувствительные, селективные и точные способы их флуориметрического определения, пригодные для целей фармацевтического, биофармацевтического и фотохимического анализа.
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Целью работы является разработка способов флуориметрического определения производных хромен-а-пирона и карбокромена в лекарственных формах, биологических жидкостях организма человека и растительном сырье.
Для достижения поставленной цели решали следующие задачи:
изучить современное состояние вопроса по анализу производных хромен-а-пирона и карбокромена;
изучить оптимальные условия флуоресценции производных хромен-а-пирона и карбокромена;
выбрать условия экстракционного выделения и хроматографического разделения изучаемых соединений из биологических жидкостей и растительного сырья;
разработать флуориметрические способы определения карбокромена в лекарственных формах и биологических жидкостях (кровь.моча);
изучить возможность применения разработанного способа определения карбокромена в крови и моче для фармакокинетических исследований и расчета схемы дозирования препарата;
изучить химическое строение основного продукта биотрансформации карбокромена в организме;
разработать флуоресцентные способы определения пиранокумарина виснадина в лекарственных формах с целью контроля их качества и в исходном растительном сырье;
разработать флуориметрический способ определения пиранокумарина пеуценидина в растительном сырье.
На основании проведенных экспериментальных исследований изучены условия флуоресценции производных хромен-а-пирона и карбокромена. Выбраны условия экстракционного выделения и хроматографнческого разделения производных хромен-а-пирона и карбокромена из биологических жидкостей и растительного сырья. Впервые разработаны способы определения карбокромена в лекарственных формах и биологических жидкостях (кровь,моча) с использованием флуоресцентного метода. Впервые разработаны флуоресцентные способы определения пиранокумаринов виснадина в лекарственных формах с целью контроля их качества и в исходном растительном сырье, пеуценидина - в растительном сырье. С применением разработанного способа определения карбокромена в крови и моче изучены основные фармакокинетические параметры и рассчитаны схемы дозирования препарата. Определено количественное содержание пиранокумаринов в растительном сырье: виснадина - в плодах Ammi visnaga и корнях Phlojodicarpus sibiricus, пеуценидина - в плодах Peucedanum oreoselinum.
НАУЧНО - ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ.
Результаты изучения флуоресцирующей способности карбокромена, виснадина и пеуценидшт положены в основу разработанных новых способов их качественного и количественного определения в различных объектах.
Способы определения карбокромена и виснадина в лекарственных формах дают возможность повысить их качество в процессе промышленного производства, а способы определения в
исходном растительном сырье - усилить контроль его качества по содержанию действующих веществ, поэтому эти способы рекомендованы для внедрения в контрольно-аналитические лаборатории на предприятиях-изготовителях. Способы определения виснадина и пеуценидина в растениях позволили также использовать их в изучении химического состава растительного сырья.
Разработанный флуориметрический способ определения карбокромена в крови позволил использовать его в клинических исследованиях с целью коррекции схем дозирования препарата с учетом индивидуальных особенностей организма пациента, для эффективной и безопасной фармакотерапии карбокроменом.
Разработанные способы анализа апробированы и использованы в научных исследованиях и учебном процессе ряда высших учебных заведений при изучении аналитической и фармацевтической химии, клинической фармакотерапии, фармакогнозии студентами, аспирантами и научными работниками.
ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ РАБОТЫ. На основании проведенных исследований внедрены: способ определения карбокромена -
в Государственном научно-исследовательском институте по стандартизации и контролю лекарственных средств (акт № 14 от 10.03.1998 г.),
в Научно-исследовательском институте фармации, в исследованиях лаборатории биологических и физико-химических методов контроля качества лекарственных средств (акт № 26 от 9.04.1998 г.),
в учебном процессе и научных исследованиях в Пятигорской государственной фармацевтической академии, на кафедре фармацевтической химии (акт № 55 от 20.05.1998 г.), в испытательном фармацевтическом центре «Фармакон» Курского государственного медицинского университета (акт № 12 от
19.05.1998 г.), в Пермской государственной фармацевтической академии, на кафедре фармацевтической химии факультета последипломного образования (акт от 01.03.1999 г.), на кафедре фармацевтической химии Санкт-Петербургской государственной химико-фармацевтической академии (акт от 11.05.99 г.);
способы определения виснадина и пеуценидина -
- в учебном процессе и научных исследованиях на кафедре аналитической химии в Тюменской государственной медицинской академии (акты №№ 68,69 от 24.12.1998 г.), в Запорожской государственной медицинской академии, на кафедре аналитической химии (акты от 17.02.1999 г.), в испытательном фармацевтическом центре «Фармакон» Курского государственного медицинского университета (акт № 17 от 26.05.1998 г. и акт № 27 от 23.12.1998 г.).
Курским областным правлением Всероссийского химического общества им. Д.И.Менделеева утверждены и выпущены методические рекомендации «Флуоресцентный анализ некоторых производных кумарина» (Курск, 1999 г.)
СВЯЗЬ ИССЛЕДОВАНИЙ С ПРОБЛЕМНЫМ ПЛАНОМ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ НАУК. Представленные результаты исследований относятся к теме-заданию «Разработка новых, совершенствование и унификация существующих методов исследования лекарственных веществ», включенных в проблему «Фармация» (01.9.70003273). Диссертация выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Курского государственного медицинского университета по проблеме «Фармация», номер государственной регистрации 01.9.30009247.
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Материалы диссертационной работы доложены на 2-м и 4-м Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (г. Москва, 1995 и 1997 гг.), научной
конференции «Решение актуальных задач фармации на современном этапе», посвященной 50-летию НИИ фармации (г. Москва, 1994 г.), 4-й Всесоюзной конференции по аналитической химии органических веществ (г. Москва, 1991 г.), Всероссийской научной конференции «Экологические интоксикации: биохимия, фармакология, клиника» (г.Чита, 1996 г.), межвузовской научно-производственной конференции «Актуальные проблемы современной фармакотерапии» (г. Саратов, 1996 г.), конференции «Актуальные проблемы профессиональной и экологической патологии» (г.Курск, 1994 г.), конференции «Актуальные вопросы медицинской науки», посвященной 60-летию Курского госмедуниверситета (г. Курск, 1997 г.), итоговых научных конференциях «Актуальные проблемы медицины и фармации» (г. Курск, 1996 и 1999 гг.).
ПУБЛИКАЦИИ. По материалам диссертационных исследований опубликовано 11 работ, в том числе 1 методические рекомендации.
ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ. Диссертационная работа шложена на 121 странице машинописного текста, содержит 37 таблиц и 10 рисунков, состоит из введения, четырех глав, включая обзор литературы, выводов, списка литературы, включающего 157 источников, в том числе 69 работ зарубежных авторов.
результаты изучения условий флуоресценции карбокромена, пиранокумаринов виснадина и пеуценидина;
способы определения карбокромена в биологических жидкостях (кровь, моча) и лекарственных средствах флуоресцентным методом;
- способы качественного обнаружения и количественного определения виснадина в лекарственных формах и в исходном растительном сырье, пеуценидина - в растительном сырье.
