Введение к работе
Актуальность проблемы Современный уровень аналитических исследований, расширение арсенала применяемых в медицинской практике лекарственных средств требуют совершенствования методик биохимического контроля, так как содержащиеся в биологических жидкостях лекарственные вещества и их метаболиты нередко искажают результаты анализа.
Распространенным лабораторным исследованием является биохимический анализ крови, в частности, определение содержания общего билирубина, что важно для прогноза и контроля течения заболеваний печени и желчевыво-дящих путей пациента.
Замечено, что у больных, принимающих салофальк (МНН месалазин), наблюдаются нарушения функций печени, тогда как концентрация общего билирубина в сыворотке крови, определяемая унифицированным и нормативным методом Иендрашика Л.И., остается в пределах нормы.
Искажение результатов лабораторного исследования общего билирубина сыворотки крови может вызвать лекарственная аналитическая интерференция, то есть участие лекарственных веществ или их метаболитов в химических реакциях, лежащих в основе анализа (Меньшиков В.В., 2001). Однако механизмы подобного влияния, а, соответственно, и способы их устранения, недостаточно изучены. Поэтому актуальной является разработка новых или совершенствование существующих методик биохимического анализа, в том числе при лабораторных исследованиях на фоне терапии лекарственными веществами различной химической структуры.
Цель и задачи работы Целью работы явилась разработка способа количественного определения общего билирубина в сыворотке крови, исключающего аналитическую интерференцию, возможную при лекарственной терапии натрия и-аминосалицилатом, месалазином, парацетамолом. Для достижения поставленной цели предстояло решить следующие задачи:
Изучить влияние натрия и-аминосалицилата (ПАСК-Na), 5-аминосалициловой кислоты (5-АСК) и и-аминофенола - метаболита парацетамола на результаты количественного определения общего билирубина в сыворотке крови, получаемые по нормативной методике.
Установить причину аналитической интерференции ПАСК-Na, 5-АСК и и-аминофенола при определении общего билирубина в сыворотке крови методом Иендрашика и предложить способ ее устранения.
Выбрать селективные методики для количественного определения ПАСК-Na, 5-АСК и и-аминофенола в сыворотке крови.
Апробировать способ количественного определения общего билирубина в сыворотке крови пациентов с учетом аналитической интерференции ПАСК-Na, 5-АСК и и-аминофенола.
Разработать форму запроса лабораторного исследования.
Научная новизна работы Впервые показана возможность количественного определения 5-АСК и и-аминофенола в сыворотке крови фотометрическим методом на основе реакции с и-диметиламинобензальдегидом (ПДМАБА).
Установлено, что в результате аналитической интерференции ПАСК-Na, 5-АСК и л-аминофенола результат количественного определения общего билирубина методом Иендрашика получается заниженным на величину, соответствующую значению оптической плотности интерферирующего вещества, определяемого тем же методом.
Разработан способ количественного определения общего билирубина крови на фоне ПАСК-Na, 5-АСК и л-аминофенола, основой которого является методика используемого на практике унифицированного метода Иендрашика, и исследуемых веществ на основе реакции с ПДМАБА. Расчет концентрации билирубина предложено проводить по фактору среднему. Экспериментально доказана правильность получаемых данным способом результатов.
Практическая значимость и внедрение результатов исследования
Разработанный способ количественного определения общего билирубина крови методом Иендрашика на фоне лекарственной терапии натрия п-аминосалицилатом, месалазином и парацетамолом рекомендован для использования при биохимических исследованиях в клинико-диагностических лабораториях лечебных учреждений, а также в учебном процессе кафедр лабораторной диагностики средних специальных учебных заведений.
Способ используется в практической деятельности биохимического отдела отделения лабораторной диагностики ГУЗ «Свердловская областная клиническая больница № 1», отдела лабораторной диагностики МУ «Екатеринбургский консультативно-диагностический центр», в работе Центральной научно-исследовательской лаборатории Уральской государственной медицинской академии Росздрава.
Материалы диссертационного исследования использованы при разработке пособия «Определение билирубина на фоне лекарственной терапии» для специалистов лабораторной службы учреждений практического здравоохранения, которое утверждено ученым советом Пермской государственной фармацевтической академии, а также методических указаний к практическим занятиям по теме: «Способ определения общего билирубина в сыворотке на фоне лекарственной терапии» для студентов, обучающихся по специальности «Лабораторная диагностика», утвержденных методическим советом Свердловского областного медицинского колледжа.
Фрагменты диссертационных исследований введены в программу учебной дисциплины «Клиническая химия» повышенного уровня образования специальности «Лабораторная диагностика» и в программы циклов повышения квалификации специалистов лабораторной службы со средним медицинским образованием Свердловского областного медицинского колледжа.
Разработана и предложена форма запроса лабораторного исследования, позволяющая специалистам лабораторной службы иметь представление о пре-аналитическом этапе подготовки пациента, в том числе его фармакотерапевти-ческом фоне.
Апробация работы Результаты и основные положения диссертационной работы доложены на областной научной конференции молодых ученых, студентов, аспирантов «Молодежная наука Прикамья» (Пермь, 2002г.), межвузовской научно-практической конференции профессорско-преподавательского состава «Вузы и регион» (Пермь, 2003 г.), втором Съезде медицинских работников со средним образованием Свердловской области (Екатеринбург, 2006 г.).
Публикации По теме диссертации опубликовано 9 научных работ, в числе которых 3 статьи и 6 тезисов.
Объем и структура диссертации Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы (первая глава), экспериментальной части (две главы), в которых изложены результаты исследований, общих выводов, списка литературы и приложений. Материалы диссертации изложены на 125 страницах машинописного текста, включающего 42 таблицы, 8 рисунков, 3 схемы. Библиографический указатель содержит 113 источников, из них 17 на иностранных языках.
