Введение к работе
Актуальность темы
Лекарственные средства из группы холиноблокаторов широко применяются в медицинской практике. В терапевтических дозах препараты обладают слабым влиянием на ЦНС, однако, при употреблении высоких доз возможно развитие «холинолитического синдрома», который характеризуется двигательным и психическим возбуждением, беспокойством, галлюцинациями и другими нежелательными эффектами. Немедицинское применение данной группы средств связано с их способностью вызывать яркие зрительные галлюцинации и необычные «телесные ощущения».
Первым холинолитиком, который использовался для достижения состояния одурманивания, был циклодол. Однако в последние годы обозначилась тенденция к злоупотреблению другими, более доступными препаратами «Триган Д» и «Тропикамид», которые можно свободно приобрести в аптеке.
«Триган Д» относится к ненаркотическим анальгетикам. В своем составе препарат содержит холинолитическое вещество дицикловерина гидрохлорид и парацетамол. Препарат «Тропикамид» широко применяется в офтальмологии в виде глазных капель (0,5 и 1%) в качестве мидриатика.
Следует отметить, что препарат «Триган Д» в основном используется подростками на этапе поиска доступных одурманивающих средств. «Тропикамид» же популярен у наркозависимых лиц «со стажем». Большинство потребителей вводит «Тропикамид» внутривенно в сочетании с другими наркотическими средствами и психотропными веществами, в основном с героином. Однако «Тропикамид» применяется и как индивидуальный «наркотик».
По данным химико-токсикологической лаборатории Пермского краевого наркологического диспансера за последние три года зафиксировано 25 случаев обнаружения дицикловерина в образцах мочи, поступившей на химико-токсикологическое исследование.
Аналитическими службами Пермского края в 2011 году выявлено четырехкратное увеличение случаев обнаружения тропикамида в биологических объектах по сравнению с 2010 годом. За 2011 г. в ХТЛ ПКНД было выявлено 222 случая обнаружения тропикамида в образцах мочи (в 2010 г. – 62 случая). По данным судебно-химического отделения Пермского Бюро судебно-медицинской экспертизы за 2011 год выявлен 181 случай обнаружения тропикамида в биообъектах (в 2010 г. – 56 случаев).
Препараты «Триган Д» и «Тропикамид» в качестве средств одурманивания используются относительно недавно, поэтому актуальна разработка методик определения психоактивных веществ в биологических объектах для установления факта их немедицинского употребления и в случаях острых отравлений.
Цель и задачи исследования
Целью диссертационной работы является разработка методик обнаружения и количественного определения дицикловерина гидрохлорида и тропикамида в моче для целей химико-токсикологического анализа.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
Разработать методики предварительного обнаружения дицикловерина гидрохлорида и тропикамида в экстрактах из мочи методом тонкослойной хроматографии для этапа скрининговых исследований.
Изучить возможность совместного определения тропикамида и опиатов в моче методом тонкослойной хроматографии.
Для этапа подтверждающих исследований разработать высокочувствительные методики качественного и количественного определения изучаемых веществ в извлечениях из биожидкости с использованием современных инструментальных методов (ВЭЖХ, ГЖХ, ГХ/МС).
Изучить условия экстракции дицикловерина гидрохлорида и тропикамида из водных растворов органическими растворителями с учетом ряда влияющих факторов и разработать оптимальную методику извлечения исследуемых веществ из мочи.
Оценить пригодность разработанных методик обнаружения и количественного определения изучаемых веществ в практике химико-токсикологического анализа путем их апробации на реальных образцах мочи, поступивших на исследование в химико-токсикологическую лабораторию ГБУЗ «Пермский краевой наркологический диспансер» на наличие дицикловерина гидрохлорида и тропикамида.
Личный вклад автора
Автором самостоятельно проведены исследования в качестве оператора аналитического оборудования и осуществлен анализ полученных экспериментальных данных. Автором выполнены исследования по установлению хроматографических параметров дицикловерина гидрохлорида и тропикамида в условиях анализа методами тонкослойной, газо-жидкостной и высокоэффективной жидкостной хроматографии, а также изучены условия экстракции исследуемых веществ из водных растворов и определены оптимальные условия их изолирования из мочи. На основе полученных данных разработаны методики идентификации и количественного определения исследуемых веществ.
Научная новизна
Впервые изучены условия экстракции дицикловерина гидрохлорида и тропикамида из водных растворов и определены оптимальные условия их изолирования из мочи.
Установлены оптимальные условия разделения дицикловерина гидрохлорида и тропикамида методом тонкослойной хроматографии на пластинках «Сорбфил», обоснован способ детектирования, определена чувствительность предлагаемых детекторов к исследуемым веществам. Предложена схема обнаружения тропикамида методом тонкослойной хроматографии при совместном присутствии с опиатами в извлечении из биожидкостей.
Разработаны методики обнаружения дицикловерина гидрохлорида и тропикамида методами ТСХ, ВЭЖХ, ГЖХ и ГХ-МС, определены пределы обнаружения исследуемых веществ.
Разработаны методики количественного определения дицикловерина гидрохлорида методом газо-жидкостной хроматографии, тропикамида – методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Предложены схемы химико-токсикологического исследования дицикловерина гидрохлорида и тропикамида в моче для установления факта их немедицинского употребления.
Практическая значимость
Разработанные методики изолирования, обнаружения и количественного определения дицикловерина гидрохлорида и тропикамида в моче апробированы и внедрены в работу судебно-химического отделения ГУЗ «Самарское областное бюро судебно-медицинской экспертизы» (акт внедрения от 07.12.2011 г.), химико-токсикологических лабораторий ГБУЗ «Пермский краевой наркологический диспансер» (акт внедрения от 12.12.2011 г.), ГБУЗ АО «Амурский областной наркологический диспансер» (акт внедрения от 28.11.2011 г.), ГУЗ СПб «Межрайонный наркологический диспансер №1» (акт внедрения от 05.12.2011 г.), токсикологической лаборатории МБУЗ «Городская клиническая больница скорой медицинской помощи», г. Пенза (акт внедрения от 15.12.2011 г.).
Материалы работы внедрены в учебный процесс кафедры фармацевтической химии ГБОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная химико-фармацевтическая академия» (акт внедрения от 22.11.2011 г.), биохимии с курсом токсикологической химии ГБОУ ВПО «Оренбургская государственная медицинская академия» (акт внедрения от 01.12.2011 г.), фармацевтической химии с курсами аналитической и токсикологической химии ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» (акт внедрения от 28.11.2011 г.).
По материалам исследования подготовлено два информационных письма: «Определение компонентов препарата Триган Д в моче при химико-токсикологическом анализе» и «Химико-токсикологическое исследование мочи на наличие тропикамида», утвержденные ученым советом ФГБУ РЦСМЭ Минздравсоцразвития России (протокол № 4 от 22 ноября 2011 г.).
Апробация работы
Основные материалы работы доложены на межвузовской научной конференции студентов и молодых ученых «Фармация в XXI веке: эстафета поколений» (Санкт-Петербург, 2009), Российской научно-практической конференции с международным участием «Актуальные вопросы судебно-химических, химико-токсикологических исследований и фармацевтического анализа» (Пермь, 2009), 74-ой итоговой студенческой научно-практической конференции с международным участием, посвященной 100-летию со дня рождения проф. А.М. Дыхно (Красноярск, 2010), межрегиональной научно-практической конференции с международным участием, посвященной 75-летию судебно-медицинской службы в Кировской области «Актуальные вопросы судебно-медицинской науки и практики» (Киров, 2010), 85-ой Всероссийской студенческой научной конференции памяти академика АН РТ, проф. Д.М. Зубаирова (Казань, 2011), межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы судебно-химических и химико-токсикологических исследований» на базе ГБУЗ СО «Бюро судебно-медицинской экспертизы» (Екатеринбург, 2011), научно-практической конференции с международным участием, посвященной 75-летию ПГФА «Актуальные проблемы науки фармацевтических и медицинских ВУЗов: от разработки до коммерциализации» (Пермь, 2011).
Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научных исследований Пермской государственной фармацевтической академии (номер государственной регистрации 01.9.50 007417). Тема диссертации утверждена на заседании Ученого Совета Пермской государственной фармацевтической академии 27 декабря 2007 г., протокол № 5.
Публикации
По материалам диссертации опубликовано 13 печатных работ, из них 11 статей, из которых 4 – в изданиях, рекомендованных ВАК.
Объем и структура диссертации
