Введение к работе
Актуальность темы. Лекарственные препараты, получаемые из растений, занимают важное место в современной медицине среди средств профилактики и лечения многих заболеваний. Это обусловлено их более мягким действием, малой токсичностью и почти полным отсутствием нежелательных побочных эффектов. Поиск новых видов лекарственных растений, способных расширить сырьевую базу и номенклатуру лекарственного сырья, является актуальной задачей.
Растения семейства розоцветные - Rosaceae обладают широким спектром биологической активности и используются как в научной, так и в народной медицине. Сабельник болотный Comarum palustre L. - один из представителей этого семейства, применяется в народной медицине для лечения туберкулеза легких, радикулита, ревматизма, нарушений обмена веществ, дизентерии, опухолей желез и других заболеваний. Широкий спектр фармакологической активности обусловлен содержанием в сабельнике болотном комплекса БАВ. Во всех частях растения содержатся дубильные вещества, флавоноиды, в надземной части - витамин С, фенолкарбоновые кислоты, липиды (Дикорастущие полезные растения России, 2001; Биологически активные вещества растительного происхождения, 2001). В сабельнике болотном, произрастающем на Северо-Западе России, наиболее подробно изучались лишь некоторые фенольные соединения: дубильные вещества, флавоноиды. Сведения о других группах биологически активных веществ, таких как полисахариды, терпеноидные и стероидные соединения, аминокислоты, являются фрагментарными либо вовсе отсутствуют (Косман, 1997).
В настоящее время Comarum palustre часто используется в составе биологически активных добавок (Прокопьева и др., 2003). Большая часть исследований посвящена подземной части сабельника болотного, из которой получена настойка противовоспалительного действия (Сапожникова и др., 2004). Однако, при заготовке подземных органов, надземная часть не используется. С точки
зрения биологической активности и рационального природопользования применение надземной части растения является перспективным.
Сабельник болотный достаточно широко распространен на территории России, в том числе и в Северо-Западном регионе. Поэтому представляется актуальным углубленное изучение компонентного состава и содержания биологически активных веществ в надземной части С. palustre с целью введения данного вида в научную медицину как источника новых фитопрепаратов, открывает перспективы для более эффективного использования растения.
Диссертационная работа выполнена на кафедре фармакогнозии Санкт-Петербургской государственной химико-фармацевтической академии в соответствии с планом научно-исследовательских работ СПХФА по теме «Мониторинг перспективных лекарственных растений флоры России» (номер Государственной регистрации 01200852355). Фармакологические исследования проводились на кафедре фармакологии СПХФА (зав. каф., проф., д.м.н. Крауз В. А.). Исследования с использованием приборных хроматографических и спектроскопических методов выполнены в аналитическом центре академии (Стрелкова Л. Ф.). Исследование аминокислотного состава проводили на базе ВНИИ Особо чистых биопрепаратов (Санкт-Петербург).
Цель и задачи исследования.
Целью данного исследования является фармакогностическое изучение и стандартизация травы сабельника болотного как перспективного источника лекарственного растительного сырья.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
Провести предварительный фотохимический анализ надземной части Comarum palustre, произрастающего на территории Северо-Запада России.
Изучить качественный состав основных групп биологически активных веществ и разработать методики их количественного определения, про-
вести исследование динамики накопления действующих веществ в зависимости от фазы вегетации и места произрастания растения.
Определить острую токсичность и специфические виды биологической активности водных и спиртовых экстрактов из надземной части С. palustre.
Установить макро- и микроскопические признаки сырья сабельника болотного.
Провести товароведческий анализ для установления норм качества лекарственного растительного сырья.
Обобщить полученные данные и на их основе разработать проект нормативного документа (ФСП) на сабельника болотного траву.
Научная новизна. В результате изучения компонентного состава надземной части С. palustre, произрастающего на Северо-Западе России, идентифицировано 13 фенолкарбоновых кислот, из которых впервые для данного вида сырья обнаружены: ванилиновая, и-оксикоричная, вератровая, и-оксибензойная, сиреневая, коричная, салициловая и гентизиновая. Впервые из С. palustre выделены водорастворимые полисахариды (ВРПС), пектиновые вещества (ПВ), изучен их мономерный состав и динамика накопления в разные фазы вегетации растения. Впервые определен качественный и количественный состав аминокислот. Определены компоненты липофильной фракции: основные пигменты и Р-ситостерол, изучена динамика их накопления и количественное содержание. Проведено сравнительное изучение биологически активных веществ (БАВ) надземной части и корневищ сабельника болотного, в результате которого было показано, что оба вида сырья содержат одни и те же группы БАВ, но по количественному содержанию отличаются.
Практическая значимость. Разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в надземной части С. palustre. Методика количественного определения дубильных веществ в траве сабельника болотного прямым спектрофотометрическим методом введена в практику научных исследований растительных объектов и учебного процесса на кафедре фармакогнозии СГГХФА. Определены сроки и оптимальная фаза вегетации для заготовки сырья, а также
предельный размер сырьевой части, подлежащей заготовке. Разработаны критерии подлинности и показатели доброкачественности травы С. palustre. Результаты работы использованы при разработке проекта ФСП на предлагаемый новый вид лекарственного сырья «Сабельника болотного трава». Экспериментально установлено, что водные и спиртовые экстракты из надземной части С. palustre обладают низкой токсичностью, противовоспалительной и анальгезирующей активностью. Данные о компонентном составе и результаты фармакологических исследований надземной части сабельника болотного могут быть использованы при целенаправленном создании новых фитопрепаратов, а также для введения этого вида сырья в практику научной медицины.
Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на: XI Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2004 г.); Международной научно-практической конференции, посвященной 85-летию академии «Выпускник фармацевтического ВУЗа (факультета) в прошлом, настоящем и будущем» 09.09.04 - 13.09.04 (Санкт-Петербург, 2004); DC Международном съезде «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения» ФИТОФАРМ 2005 (Санкт-Петербург, 2005); Региональной научно-практической конференции (с международным участием), посвященной 40-летию фармацевтического факультета КГМУ (Курск, 2006); 62-й и 63-й региональных конференциях по фармации и фармакологии (Пятигорск, 2007,^2008 гг.); Научно-практической конференции «Фармация из века в век» (Санкт-Петербург, 2008); 64-й региональной конференции по фармации и фармакологии (Пятигорск, 2009 г.).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 научных работ, в том числе 2 статьи в журналах, входящих в «Перечень ведущих рецензируемых научных журналов, рекомендованных ВАК».
Основные положения, выносимые на защиту.
Результаты обнаружения различных групп биологически активных веществ в надземной части С. palustre.
Результаты изучения качественного состава и количественного содержания аминокислот, дубильных веществ, полисахаридов, стероидных соединений, фенолкарбоновых кислот, флавоноидов С. palustre.
Результаты изучения некоторых видов биологической активности экстрактов из надземной части сабельника болотного.
Результаты товароведческого анализа сырья «Сабельника болотного трд-ва» и его стандартизация.
Объем и структура диссертации. Работа изложена на 163 страницах машинописного текста, иллюстрирована 43 рисунками и 38 таблицами. Диссертация состоит из введения, 5 глав (обзор литературы, материалы и методы и 3 главы, содержащие результаты экспериментальных исследований), выводов, списка литературы, включающего 162 источника, из них 43 на иностранных языках и 2 приложений.