Введение к работе
Актуальность проблемы. Иммунная система интегрирует реакции систем организма на безграничное число экзо- и эндогенных факторов и тен. самым поддерживает гомеостаз в постоянно меняющейся среде. Расстройства этой системы приводят к сниявния защитных сил организма и повшкнной- заболеваемости.
Производство пищевых яиц и птичьего мяса в больших масштабах требует получения огромного количества яиц с высокими инкубационными качествами. Для правильного выбора технологии инкубации яиц, выращивания молодняка и содержания взрослой птицы помимо знания физиологии, биохкшш образования яйца, необходимо знать механизмы влияния различных факторов на развитие птицы, механизмы иммунологических, процессов, источников заболевания домашней птицы. Исследования в этом направлении позволили бы решить проблему увеличения продуктивности птицеводства.
Иммунная система птиц представляет собой качественно новый
этап филогенетического развития с'четкой дкффзренцировкой морфо
логического субстрата для созревания В-лимфоцитов. Изучение пос
ледовательных этапов дифференціфовки В-лимфоцитов птиц является
одним из подходов к раскрытию механизма иммуногенеза Известно,
что в процессе дифференцировки бурсы «абрициуса птиц по мере
становления иммунной функции в эмбриогенезе образуются и .равв№
ваотся фолликулы. Диффэрешцфовка последних зависит от пролнфэ-
рации и дифференцировки В-лимфоцитов, которые детерминируют рав-
витив и сохранение гуморального иммунитета. А поскольку извест
но, что доинкубационное облучение малыми дозами радиации сткму-
ледтоще воздействует на рост и развитие птиц, то исследования;
посвященные изучению гумор'ільного иммунитета при облучении пред*'
ставляет теоретический и практический интерес. Особое значение -
при этой приобретают формирование н дифференцировка фолликулов
бурсы, так как именно в них происходит дифференцировка В-лнмфо- :
цитоз (Qlavlts et al., 1983). у'
Одной из важных проблем в изучении иммунной системы птиц является, идентификация лимфоцитов, имеющих поверхностные ищу*. ноглобулиновыэ рецепторы, дающие возможность полнее изучить механизмы иммунных реакций. Исследование В-лимфоцитов, различающихся по набору поверхностных рецепторов, применяется для оценки функционального состояния организма (Novak et al., 1982).
Исследование трансформирующей актимюоти лимфоцитов в культуре с различным» стимуляторами в сонзстрвлении го спонтанной трансформацией лимфоците иопольвуетсч в числе w-о'ш клиш»-
[
ко~ла5ораторных показателей для оценки степени выраженности активності процесса и состояния гуморального иммунитета. Именно на данных, полученных в таких экспериментах, основаны представления о ранних биохимических процессах при активации лимфоцитов (В. R Хоробрых, 1983). Шэгому реакция блаеттранебормации лимфо-цитов (РВТЛ), стимулированных различными штогенами, является показателем функциональной активности иммунокомпетентных клеток in vitro, который в свою очередь позволяет судить о состоянии гуморального иммунитета іn vivo.
На основании результатов выпеуказашшх реакций можно судить об изменениях физиологического статуса лимфоцитов иммунных органов и лимфовдной системы в целом. Бесспорна, на наа взгляд, важность и необходимость такой информации при проведения исследований, связанных с изучением механизмов становления иммунной системы в процессе онтогенеза.
Дели и задачи работы. Целью настоящего исследования явилось сравнительное изучение морфогенеза фолликулов бурсы Фабрициуса, диффєренцировки Б-лимфоцитов, а таккз анализ мигоген-индуцированной активности бурсальньи лим^оидида клеток у кур а онтогеие-ае и при доинкубациошюм воздействии малой дозы ионизирующей ра-дкации.
Соответственно решались следущие задачи:
-
исследование морфологических, морфометрических и Функциональных характеристик бабркдаевоп сумки в эмбриональном к постэмбриональном периодах развития в норме и при доинкубационнэм юздэястгл-f малой дозы ионизирующей радиации;
-
определение сроков появления и плотности локалигациИ поверхностных иммуноглобулинов на В-лимфоцитах бурсы Фабрициуса в онтогенезе кур интаїстних и доинкубацимшо облученных малой дозой радиации;
-
изучение качественных.и количественных изменений Б-лимфоцитов, несущих поверхностные IgM;
-
определение интенсивности блзеттрансформации лимфоцитов бурсы Фабрициуса кур нн'тактных и доинкубационно облученных малой дозой ионизирукздэп радиации в онтогеневе и при изменении концентрации митогенов. J
Научная новизна и практическая ценность работы. Показано, что дікМ^реі-'Ц'.фовка фолликулов бурсы Фабрициуса доинкубационно
облученных icyp происходит с опережением на 1 сутки, чей у ннтак-тных и подразделяется на -1 этапа К 18 суткам эмбрионального развішш фолликулы им-эга признаки завершшиих дифїеренцировку тюлевых структур.
Методом персксвдаза-антітероксидааа (ПАП) впервые еиявлшш 1<г',4-поло.-'отелыше В-лки$оцнтц в бурсе Ф?.бридауса кур, причем, у доинкубзциошю облученных птиц поверхностные IgM определяется на 2 сутск раньше, чем у їздтактішх (на 9 сутки у опитних, на 11 сутки у контрольних). Отмечено увеличение пяо'шости лскэднааида IgM на ї,:е!.йране в процессе дийеронцировші клеток. По степени плотности поверхностных IgM на шмбракэ показано 3 типа клеток В-лимфоцитов: с точечной'штксй на одной из поласоз клетки, с преривистой и силосной линией продукта реаіаши на ІШІ-кошлекс.
В бурсе Фабрициуса обнаружены 2 типа лтфттов, различающихся по шр<$ологяческш признакам: "темные" II "СВЗТЛШ" КЛЄТКИ, "Теыше" лшфоцнты определены как Т-лш4оциты, а "светлые" - кдк В-яимфоцигы.
Впервые изучена спонтанная пролгоїеративная активность лимфоцитов Оурсы интактиых и доинкубоционно облучениях малыми дсэа->,51 эмбрионов и цыплят по включений 8Й-тими дина, которая представлена 2 ликами на 11 и 17 сутки эмбрионального развития. Отмечено, что пролиферативная активность титек бурсы интаганых вьпга, чем у доинкубаиионио облученных.
Определена оптимальная ісонцентрация JiliC (липоподнсахарнда), сшілзающая бласттрансфсрмаци» лимфоцитов бурсы Сабрициуса, что дает основание рекомендовать ее для сценки иммунного статуса птиц а промышленном птицеводстве.
Шявлена иеотоцвчивоеть бурсальннх клеток на ЄГА (фитоге-ыагглютинин), тогда как на ЛПС пролифератившл! ответ обнаружен только с 30 суток постэмбрионального развития.
Результаты исследований вносят существенный вклад в изучение проблемы клеточной дифференцнровки и ее активации, что дает возможность получить дополнительную информацию о функциональном состоянииклеток и способствует раскрытию механизма действия ио-нивиругацеи радиации в малой дозе на развивающийся организм.
Публикации и апробация работа По материалам диссертации опубликовано 6 работ. Основные положения диссертации доложрны но: I Всесоюзной конференции молодых ученых по еедьскохо-
- Я -
аяйотвенной радиологии (Обнинск, 1963); Второй Всесоювной конференции по прикладной радиобиологии (Киев, 1985); Европейском конгрессе по радиобиологии (Прага, 1985); Шждународноы конгрессе по радиационным исследованиям (Торонто, 1991).
Структура диссертации. Диссертационная работа включает следующие разделы; "Введение", "Обзор литературы" (4 главы), "Материалы и методи исследований", "Результата и обсуждение" (3 главы) . "Заключение", "Выводы". Диссертация изложена на страницах, иллюстрирована 3 таблицами и 43 рисунками. "Список исподь-вованноя литературы" содержит 152 наименования ( 51 отечественных, 101 иностранных).