Содержание к диссертации
Введение
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 7
2.1. Строение подчелюстных желез (анатомия, гистология, цитология) 7
2.2. Эндокринная функция подчелюстных желез и их связь с железами внутренней секреции 13
2.3. Компенсаторная функция подчелюстных желез при инсулярной недостаточности 17
2.4. Аллоксановый диабет 23
2.5. Изопротеренол и его действие на подчелюстные железы 2^
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 38
4. РЕЗУЛЬТАТЫ 43
4.1. Изменения подчелюстных желез мышей под влиянием изопротеренола 43
4.2. Изменения подчелюстных желез мышей при введении изопротеренола на фоне аллоксанового диабета 83
5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ 124
6. ВЫВОДЫ 142
7. БИБЛИОГРАФИЯ 145
- Строение подчелюстных желез (анатомия, гистология, цитология)
- МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
- Изменения подчелюстных желез мышей под влиянием изопротеренола
Строение подчелюстных желез (анатомия, гистология, цитология)
У мшпей подчелюстные железы занимают переднюю поверхность шеи и спускаются почти до самой ключицы; они имеют продолговатую овальную форму, розовый цвет. Железы имеют плотную консистенцию и окружены соединительнотканой капсулой, прослойки которой проникают внутрь железы, деля ее на дольки. Протоки этих желез (варто-новы) открываются в ротовой полости в подъязычной складке.
По типу строения подчелюстные железы относятся к сложным труб-чато-альвеолярным, по типу выделяемого секрета - к мерокринным, а по составу секреторного материала - к смешанным серомукозным. В железе можно выделить отдельные морфофуякциональные единицы. У взрослых мышей они состоят из 5 последовательных отделов: ацину-сов, вставочных, гранулярных, исчерченных и экскреторных отделов (рис.1).
Гранулярные и исчерченные отделы называют слюнными трубками.-Экскреторные отделы состоят из внутридольковых, междольковых и свет ацинуса окружен всего лишь 4-6 клетками, следовательно, не все клетки имеют прямой контакт с ним. Предполагается, что те клетки, которые не граничат с просветом, выделяют секрет в него через межклеточные пространства (Хаютин и др. , 1974; Бабаева Шубникова, 1979).
Цитологическое и гистохимическое изучение подчелюстных желез ( shackieford е.а. , 1962; Герловш, 1963; Шубникова, 1979) показывает, что клетки апинусов имеют пирамидальную форму. Базальные части клеток содержат богатую РНК цитоплазму. Ядра располагаются базально и имеют сильно конденсированный хроматин. Апикальные части клеток содержат скопления светлого секрета, который дает положительную реакцию на белки и слабую - на мукополисахари-ды.
Электронно-микроскопические исследования подчелюстных желез (Курц, 1967; Шубникова и др., 1976; Scott е.a. , I959;Caramia е.а., 1966а,Ъ; Luzzatto е.a., I968;Hand , 1971; Dorey е.а. , 1972; Martinez-Hernandez е.а. , 1972) показывают, что клетки аци-нусов характеризуются электроноплотным ядром неправильной формы. Часть хроматина образует плотные глыбки. Гранулярный эндоплазма-тический ретикулум (ГЭР) хорошо развит. Его цистерны располагаются упорядоченно, преимущественно в базальних частях клеток. Комплекс Гольджи представлен в виде длинных сплющенных цистерн. Секреторные гранулы с тонко -фибриллярным содержимым располагаются в апикальной и средней частях клеток. Иногда некоторые гранулы сливаются.
Материалы и методы
Аллоксан (аллоксангидрат; G O .SHgO; мол.масса 196,17; Lache-ma № 808610977) вводили внутрибрюшинно, двукратно, в расчете 0,2 мг/г веса животного, разведенный в 0,2 мл изотонического раствора NaCI (на I мышь).
Мышей взвешивали в начале опыта и перед забоем. За день до забоя животные голодали.
Опыты проводили по следующей схеме:
I. Введение изопротеренола с последующим забоем через 2, 3, 5 и 15 дней. Контролем служили интактные мыши.
П. Введение аллоксана: на 5-й день после первой инъекций вводили вторую дозу препарата, забивали животных на 2-й день после второй инъекции аллоксана. 7-й день после первой инъекции был выбран как день забоя потому, что в этот срок наблюдается оптимум действия аллоксана. Учитывались только те мыши, у которых реакция на диабет положительна. Степень диабета определяли по содержанию сахара в моче с помощью индикаторных ленточек Labstix: показателем диабета служило содержание глюкозы в моче в количестве 56-III ммоль/д. Контролем служили интактные мыши.
Введение изопротеренола на фоне аллоксанового диабета: на 7-й день после первой инъекции аллоксана мышам с полошітельной реакцией на диабет (см. П этап) вводили изопротеренол. Забивали животных на 5-й день. Выбор этого срока был обусловлен результатами I серии экспериментов, показавших, что максимальные изменения подчелюстной железы наступают именно на 5-е сутки после инъекции ИЗЇЇ.
Контролем к этой серии опытов служили здоровые мыши, аллокеан-диабетические мыши (см. П этап) и мыши на 5-е сутки после введения ИЗП (см. I этап).
Световая и электронная микроскопия. Для анализа подчелюстных желез на световом уровне материал фиксировали в 2,5%-ном забуфе-ренном растворе глутарового альдегида, обезвоживали и заключали в парафин обычным способом. Срезы толщиной 4-5 мкм окрашивали гематоксилином Карачи и эозином. Для электронной микроскопии ткань фиксировали в 2,5 -ном растворе глутарового альдегида на фосфатном буфере (рН 7,2) и дофиксировали 1%-ным забуференным раствором 0$04. Контрастировали 2$-ным уранилацетатом. Ткань обезвоживали в этаноле и заливали в эпон 812. Ультратонкие срезы контрастировали по методу Reynolds и просматривали в электронный микроскоп Jeoi-IQGB.
Радиоавтография. Для радиоавтографического изучения подчелюстных желез мышам вводили изопротеренол и аллоксан по схеме І, П и Ш. За час до забоя животным вводили %-тимидин в расчете I мкК/г веса животного. Срезы покрывали эмульсией типа М и экспонировали 2 недели. На каждый срок опыта просчитывали по 4000-6000 клеток и определяли отношение числа меченых ядер к общему числу подсчитанных клеток, выраженное в процентах.
Изменения подчелюстных желез мышей под влиянием изопротеренола
Первой задачей нашей работы являлось выяснение вопроса о степени гипертрофии подчелюстных желез под влиянием ИЗЇЇ и установление срока наибольшего действия ИЗЇЇ.
С этой целью мы изучили изменение веса подчелюстных желез на разных сроках после введения ИЗП.
Наши результаты (рис.1) показывают, что подчелюстные железы заметно гипертрофируются уже на 2-й день опыта, увеличиваясь в весе на 18,8% по отношению к контролю. На 3-й сутки железы увеличиваются на 45,8%, а на 5-е сутки - на 78,8%, что соответствует наивысшей точке гипертрофии. На 15-й день после введения ИЗП вес желез уменьшается, но все же превышает вес контрольных желез.
Из рисунка I (прерывистая линия, правая шкала) видно, что вес мышей уменьшается при введении ИЗП (в среднем к 5-му дню на 3 г). В дальнейшем, по нашим наблюдениям, вес мышей постепенно восстанавливается.
С целью установления, за счет каких отделов подчелюстных желез происходит гипертрофия, мы изучили изменения площадей клеток на гистологических срезах подчелюстных желез на протяжении всех сроков действия ИЗП (рис.2 и табл.2). Из гистограммы видно, что площади клеток гранулярных отделов возрастают уже на вторые сутки после введения ИЗП, увеличиваясь на 2,7% по отношению к контролю. На третьи сутки площади этих клеток увеличивались на 28%, на 5-е сутки - на 70%, что соответствует их максимальному увеличению. К 15-м суткам площади клеток уменьшаются, но остаются больше, чем в контроле (рис.2 и табл.2).
![Лимфатические узлы и лимфа в норме и при наследственном несахарном диабете в условиях фармако- и фитокоррекции (анатомо-экспериментальное исследование) [Электронный ресурс]](/i/i/4443/211145.png "Лимфатические узлы и лимфа в норме и при наследственном несахарном диабете в условиях фармако- и фитокоррекции (анатомо-экспериментальное исследование) [Электронный ресурс] Тыщенко Ольга Геннадьевна")
