Введение к работе
Актуальность темы. Основным путем улучшения сортов в растениеводстве является селекционный процесс. Однако, несмотря на достигнутые успехи,дальнейший прогресс в селекции винограда по созданию новых сортов долкен быть связан с разработкой принципиально новых подходов. Клеточные технологии, появившиеся в процессе исследований культуры тканей и клеток растений, уже сейчас позволяют использовать их потенциал для ускорения селекционного процесса. Основными компонентами этих технологий в большинстве случаев являются воспроизводимые методы-регенерации растений в культуре тканей. Одним из путей реализации морфогенетической программы клеток in vitro является эмбриоидоге-нез. Однако, для широкого внедрения этого метода в практику имеется целый ряд трудностей как фундаментального, так и методического характера. 3 связи с этим актуальными являются исследования углубляющие наше понимание явления эмбриоидогенеза.
Цель и задачи исследований^ Целью наших исследований являлось изучение процесса индукции эмбриоидогенеза у винограда для решения имеющихся проблем при создании клеточных технологий. Задачи исследований: изучить зависимость эмбриоидогенеза у винограда от содержания регуляторов роста в питательных средах, генотипа и типа эксплантов; разработать методику получения растений через эмбриоидогенез из листьев и стебля произвольного генотипа винограда; исследовать пути возможного использования эмбриоидогенеза для решения некоторых фундаментальных вопросов физиологии и биологии развития винограда in vitro и создание клеточных технологий для практической селекции.
Научная новизна. Впервые определены факторы питательной среды специфичные для каждого генотипа и типа эксплантов при индукции эмбриоидогенеза у винограда. Впервые выявлена дискретность по концентрациям действия цитокининов на растительные ткани и клетки. Впервые показано, что увеличение содержания 2,4-Д в средах первого этапа приводит к расширению области значений концентрации БАП в средах для получения эмбриогенных каллусов. Впервые для культуры винограда получены растения из стебля и листьев путем эмбриоидогенеза со специфически измененными относительно исходной формы морфофизиологическими признаками: морфология листа и образование соцветий in vitro.
На защиту выносятся следующие положения:
'- разработанный метод индуцированного эмбриоидогенеза у отечественных сортов винограда и форм ценных для практической селекции;
- разработанный метод, позволяющий получать растения из стебля и
листьев винограда путем эмбриоидогенеза со специфически измененнь относительно исходной формы морфофизнологическими признаками: морф логия листа, образование соцветий в условиях in vitro;
- новые особенности действия 2,4-Д и БАЛ в процессе индукции эк риоидогенеза: расширение спектра эффективных для получения эмбриог ных каллусов концентраций БАП при увеличении содержания 2,4-Д; дис ретность по концентрациям действия цитокининов на ткани и клетки винограда.
Практическая ценность. Отработаны условия индукции эмбриоидоген за и получены растения-регенеранты из стебля и листьев отечественных сортов и форм винограда, которые могут представлять ценность к исходный материал для практической селекции. Это открывает возможность для широкого применения этого метода при создании клеточных технологий в практической селекции винограда. Методика получения растений винограда с измененными фенотипами позволяет создавать ма сив измененных регенерантов сортов винограда и отбирать среди них новые сорта и формы. Явление дискретности по концентрациям действи БАП и НУК на ткани и клетки винограда может быть использовано как метод для определения относительной физиологической активности дру гих аналогов этих регуляторов роста.
Апробация работы. Результаты исследований доложены на Всесоюзно научно-техническом совещании "Перспективы генетики и селекции вино рада на фитоиммунитет" (Симферополь, 1986), Международном симпозиу по виноградарству, виноделию, экономике и связанным с ними основны предметами (Кечкемет, Венгрия, 1986), Международной конференции "Биология культивируемых клеток" (Новосибирск, 1988), Всесоюзном совещании "Методы отбора по комплексам признаков в селекции растений (Симферополь, 1989).
Пу_бликации. По материалам диссертации опубликовано 7 работ.
Структура и объем работы. Диссертация изложена на 129 страницах машинописного текста (включая 17 таблиц и 36 рисунков) и состоит и введения, обзора литературы, методической части, результатов иссле дований, обсуждения, выводов. Список литературы включает 228 найме нований, в том числе 192 на иностранных языках.