Введение к работе
Актуальность темы
В настоящее время в качестве препаратов выбора для первичной и вторичной профилактики атеросклероза и сердечно-сосудиоых заболеваний, рекомендуется использовать статины (И.А. Либов, О.С. Гультикова, 2002; Л.Л. Лякишев, 2000). Первым препаратом этой группы, внедренным в клиническую практику, был ловастатин. Несмотря на применение в клинике новых статинов, ловастатин в настоящее время, является наиболее широко апробированным препаратом с доказанной клинической эффективностью и безопасностью (Ю.Б. Белоусов, О.В. Леонтьева, 1999; М.В. Леонова, 2001). Несмотря на многочисленные доказательства преимущества статинов, в России назначение этих препаратов явно недостаточно (Д.М. Аронов, 2000).
Основной причиной ограниченного использования препаратов этой группы является высокая стоимость лекарственных средств зарубежного производства (И.А. Либов, О.С. Гультикова, 2002; Л.И. Ольбинская, 2003). Проблема может быть решена путем выпуска отечественных воспроизведённых препаратов (дженериков), основным преимуществом которых является доступная цена. Однако, любой дженерик должен быть биоэквивалентен оригинальному препарату. В связи с этим важное практическое значение имеет оценка биоэквивалентности отечественных воспроизведённых препаратов по сравнению с оригинальными.
Ловастатин метаболизируется в печени с помощью семейства изофермен-тов цитохрома Р 450 ЗА4 в основной метаболит - (3 -гидроксикислоту, коюрая, являясь конкурентным ингибитором фермента ГМГ-КоА редуктазы, подавляет синтез холестерина (О.И. Карпов, А.А. Зайцев, 1997).
В литературе имеются данные о внутри - и межвидовой вариабельности метаболизма лекарственных препаратов цитохромом ЗА4 (В.Г. Кукес, В.Г. Фи-сенко, 2001). В связи с этим представляется интересным сопоставиїь фармако-кинетические параметры ловастатина и его метаболита у животных и людей.
і РОС. НАЦИОНАЛЫМЯ і
І БИБЛИОТЕКА і
Другим фактором, ограничивающим применение статинов, является наличие побочных эффектов при длительном применении препаратов (Е.А. Уш-калова, 2002). Ловастатин избирательно действует в клетках печени и оказывает воздействие на ее функцию - вызывает повышение активности аминотранс-фераз, холестатические изменения (Н.А. Грацианский, 1994; К.С. Kwan, 1997). Подавляя синтез холестерина на этапе образования мевалоната, стат ины вызывают снижение количества промежуточных продуктов (фурнезола и геранилга-раниола), тем самым, снижая скорость посттрансляционной модификации регу-ляторных белков и оказывая токсическое действие на миоциты (М.В. Леонова, 2001; Е.Р. Van Puijenbroek, 1996). Наиболее опасным побочным эффекюм статинов считается рабдомиолиз, биохимическим маркером которого является повышение активности КФК сыворотки крови, более чем в 10 раз по сравнению с верхней границей нормы (А.Н. Бриттов, 2004). Данные о влияние ловастатина на уровень стероидных гормонов противоречивы (Д.М. Аронов, 2000; Ф.И. Комаров, 2001; Х.Х. Мансуров, 2004) и включают ограниченное число параметров.
Особенно актуальной проблема безопасности является для воспроизведенных препаратов, так как они регистрируются на основе сокращенного досье, без предоставления результатов экспериментальных и клинических исследований.
Цель исследования
Исследование влияния воспроизведенного препарата ловастатина на активность ферментов и гормональный статус в эксперименте, а также сравнительная оценка видовых особенностей фармакокинетики препарата.
Задачи исследования
Разработать методику совместного количественного определения ловастатина и его метаболита в плазме крови и ткани печени методом ВЭЖХ.
Изучить активность ферментов (АЛТ, ACT, ЛДГ, у-ГТП, ЩФ, КФК и а-амилазы) в сыворотке крови крыс при курсовом назначении воспроизведенного препарата ловастатина «Холетар».
Оценить влияние курсового назначения воспроизведенного препарата ловастатина «Холетар» на гормональный статус (уровень тестостерона, эстра-диола, прогестерона, кортизола, пролактина, ФСГ, ТТГ, ЛГ) крыс.
Исследовать особенности фармакокинешки ловастатина и его метаболита в сыворотке крови и ткани печени крыс при многократном введении препарата, во взаимосвязи с активностью ферментов и уровнем гормонов.
Изучить динамику концентрации ловастатина и его метаболита в плазме крови у здоровых испытуемых и кроликов при однократном введении препарата и сопоставить фармакокинетические параметры ловастатина и его метаболита у людей и животных.
Научная новизна
Впервые изучено влияние курсового назначения воспроизведенного препарата ловастатина «Холетар» на активность ферментов в сыворотке крови и гормональный статус крыс. Впервые проведен анализ изменения активности ферментов и содержания гормонов в сыворотки крови крыс в соответствии с концентрацией воспроизведенного препарата ловастатина и его метаболита в сыворотке крови и ткани печени. Разработана методика совместного количественного определения ловастатина и его метаболиіа в плазме крови и ткани печени методом ВЭЖХ. Впервые исследована биоэквивалентность нового воспроизведенного препарата ловастатина «Кардиостатин» (как по активному метаболиту, так и по исходному препарату) в эксперименте и клинике, изучена относительная биодоступность воспроизведенного препарата ловастатина «Холетар» на кроликах и проведено сопоставление показателей у людей и животных. Выявлены видовые различия процесса выведения воспроизведенных препаратов ловастатина.
Практическая значимость
Проведенные биохимические и фармакокинетические исследования позволят повысить клиническую эффективность и снизить вероятность возникновения побочных явлений при назначении ловастатина. Разработанная методика совместного количественного определения ловастатина и его метаболита в
плазме крови с помощью ВЭЖХ может быть использована в клинической лабораторной практике. На основании полученных результатов биоэквивалентности, исследуемый воспроизведенный препарат «Кардиостатин» (ЗАО "МА-КИЗ-ФАРМА", Россия) может быть рекомендован к медицинскому применению, что позволит расширить арсенал генерических препаратов ловастатина в клинической практике.
Апробация работы
Результаты проведенных исследований были представлены на десяюй Российской гастроэнтерологической неделе (Москва, 2004); на XII Российском конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2005); на 9-ой международной Пу-щинской школе-конференции молодых ученых «Биология-наука XXI века» (Пущино, 2005); на научно-практической конференции, посвященной 60-летию победы в Великой Отечественной войне (Рязань, 2005); на 7-ой и 9-ой Республиканских научно-практических конференциях с международным участием «Социально-гигиенический мониторинг здоровья населения» (Рязань, 2003, 2005). Апробация работы проведена на межкафедральном заседании кафедр фармакологии с курсом фармакотерапии ФПДО, биологической и биоорганической химии с курсом клинической лабораторной диагностики, внутренних болезней, фармакогнозии с курсом ботаники, профильных гигиенических дисциплин ГОУ ВПО «Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова Росздрава».
Публикации
Основные положения диссертации опубликованы в 6 работах.
Структура диссертации
Диссертация изложена на 145 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов исследования, обсуждения результатов выводов, практических рекомендаций, списка литературы, включающего 325 источников (201 на русском и 124 на иностранных языках). Работа проиллюстрирована 21 таблицей и 43 рисунками.
