Введение к работе
Актуальность проблемы определяется необходимостью дальнейшего поиска средств направленного воздействия на гемостаз, поскольку ассортимент антикоагулянтов прямого действия существенно ограничен. Широко применяемый в медицинской практике единственный официальный прямой антикоагулянт - гепарин, отличающийся сильным, но кратковременным действием, не лишен ряда недостатков, а именно: сложность дозирования, способность вызывать агрегацию тромбоцитов /Bertele V. et al., 1983; Cimo P. et al., 1979/ и тромбоцитопению /Ansell J., Deykin D., 1980; Borg J., 1986/, эффект «бумеранга» /Nordon et al., 1981/ и др. Известны случаи гепаринрезистентности /Баркаган З.С. и соавт., 1982; 1988/.
Гепарин, угнетая активность тромбина, в некоторой степени тормозит и скорость аутополимеризации фибринмономеров /Кудряшов Б.А. и соавт., 1975/. Однако ингибиторы, ограничивающие неферментативные превращения фибриногена и имеющие практическое применение, до настоящего времени не известны. Эффекторы такого типа упорно исследуются. Так, Laudano A., Doolittle R. (1978; 1979) получили серию пептидов - аналогов N-концевого участка ос-цепи фибриногена, имеющих последовательность Gly-Pro-Arg и способных ингибировать полимеризацию мономерного фибрина. Подобные пептиды могут быть выделены из плазмы крови и тканей внутренних органов человека и животных /Бышевский А.Ш., Чирятьев Е.А., 1980 - 1991/. В то же время применение этой группы пептидов в качестве антикоагулянтов прямого действия невозможно вследствие их быстрой элиминации из кровотока /Чипенс Г.И., 1982; Бышевский А.Ш., Чирятьев Е.А., 1991/.
В лабораториях кафедр Тюменской медицинской академии установлено, что в ряде растений содержатся антикоагулянты прямого действия, представляющие собой гликопептиды, чей эффект реализуется на уровне заключительной фазы свертывания. По данным И.А. Дементьевой, О.А. Русаковой и А.Г. Губаева /1991 - 1996/ растительные гликопептиды действуют достаточно продолжительно (до 24 ч после однократной инъекции), не вызывают гиперкоагулемии и не обладают токсическим действием.
Известно, что водные растения, (в т.ч. ряска, стрелолист, сине-зеленые водоросли и др.) обеспечивают до 80% органической фазы донных иловых грязей. Эти растения не отличаются высоким содержанием пептидов-антикоагулянтов, однако процесс естественного концентрирования путем формирования сапропелей, может принести свой результат. В связи с этим, а также принимая во внимание неограниченность сырьевых запасов
сапропелей, представляется интересным их изучение как альтернативных источников антикоагулянтов прямого действия.
Цель исследования - изучение возможности получения фракции сапропеля, обладающей антикоагулянтнои активностью, предварительная характеристика эффектора свертывания и механизма влияния на плазмокоа-гуляцию.
Задачи исследования. 1. Разработать способ получения из сапропеля экстракта, обладающего антикоагулянтнои активностью. 2. Разработать способ количественной оценки антикоагулянтнои активности. 3. Выделить носитель антикоагулянтнои активности и установить его природу. 4. Расшифровать механизм ограничения свертывающей активности плазмы крови полученной фракцией. 5. Дать предварительную оценку состояния гемокоа-гуляции при внутривенном введении фракции экстракта сапропеля лабораторным животным.
Научная новизна. Впервые установлено, что сапропель содержит антикоагулянты прямого действия. Впервые разработан способ выделения фракции сапропеля, обогащенной по антикоагулянту. Определена природа носителя антикоагулянтнои активности и механизм действия. Показана перспективность исследований по созданию нового средства фармакологической коррекции гемостаза.
Практическая ценность. Впервые предложен "Способ получения средства, обладающего антикоагулянтнои активностью" (Патент №2101023, зарегистрирован в Государственном реестре изобретений 10 января 1998 г), который позволяет получать его в достаточных для исследовательской работы количествах и может явиться основой для промышленного способа.
Выявлена принципиальная возможность создания нового средства фармакологической коррекции свертывающей активности крови с точкой приложения на заключительном этапе фибринообразования и показано, что источником нового антикоагулянта прямого действия может служить сапропель, ресурсные запасы которого не ограничены.
Получены данные, которые обосновывают перспективность и целесообразность дальнейшего глубокого фармакологического и биохимического исследования ингибитора свертывания сапропеля по схеме, предусмотренной Фармакологическим комитетом для доклинических испытаний антикоагулянтов прямого действия, и могут быть использованы в лабораториях, занимающихся поиском новых средств фармакологической коррекции гемостаза.
Апробация и публикации. Основные положения диссертации доложены на проблемной комиссии "Фармация" Тюменской медицинской ака-
демии, опубликованы в материалах конференции "Актуальные вопросы теоретической и клинической медицины" (Тюмень, 1994), конференции, посвященной 25-летию фармацевтического факультета Самарского медицинского университета (Самара, 1996), а также в межвузовском сборнике научных трудов "Актуальные проблемы фармации" и Медико-биологическом вестнике им. Я.Д. Витебского.
Объем и структура работы. Материалы работы, включая указатель литературы, изложены на 141 странице машинописного текста. В тексте работы содержится 37 рисунков и 15 таблиц. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы с описанием материалов и методов исследований, главы (содержащей 7 подразделов), в которой изложены результаты собственных исследований, заключения и выводов. Указатель литературы представлен 128 отечественными и 91 иностранным авторами.
Похожие диссертации на Антикоагулянтная активность фракции сапропеля : Получение, природа и механизм действия
